Name: Eine robuste Entdeckungsplattform zur Identifizierung neuartiger Mediatoren der Melanommetastasierung (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-03-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 41 s
Description: Erfahren Sie eine standardisierte Arbeitsablauf-Technik zur Bewertung von Melanom-Metastasenregulatoren in vivo. Diese Methode verbessert die Reproduzierbarkeit durch robuste Tiermodelle und unterstützt die Zielentdeckung für Therapien.

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Wir danken der Division of Advanced Research Technologies (DART) an der NYU Langone Health und insbesondere dem Experimental Pathology Research Laboratory, dem Genome Technology Center, dem Cytometry and Cell Sorting Laboratory, dem Pre-Clinical Imaging Core, die teilweise durch den Perlmutter Cancer Center Support Grant NIH / NCI 5P30CA016087 unterstützt werden. Wir danken der NYU Interdisciplinary Melanoma Cooperative Group (PI: Dr. Iman Osman) für den Zugang zu patientenabgeleiteten Melanom-Kurzzeitkulturen + (10-230BM und 12-273BM), die durch IRB-genehmigte Protokolle (Universal Consent Study #s16-00122 und Interdisciplinary Melanoma Cooperative Group Study # 10362) erhalten wurden. Wir danken Dr. Robert Kerbel (University of Toronto) für die Bereitstellung von 113/6-4L und 131/4-5B1 Melanom-Zelllinien* und Dr. Meenhard Herlyn (Wistar Institute) für die Bereitstellung von WM 4265-2, WM 4257s-1, WM 4257-2 Melanom-Kurzzeitkulturen**. E.H. wird unterstützt von NIH/NCI R01CA243446, P01CA206980, einem American Cancer Society-Melanoma Research Alliance Team Science Award und einem NIH Melanoma SPORE (NCI P50 CA225450; PI: U.A.). Abbildung 1 wurde mit Biorender.com erstellt.

<ol><li>Sung, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+Cancer+Statistics+2020%3A+GLOBOCAN+Estimates+of+incidence+and+mortality+worldwide+for+36+cancers+in+185+countries%5BTitle%5D)+AND+%22CA%3A+A+Cancer+Journal+for+Clinicians%22%5BJournal%5D)">Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN Estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 71 (3), 209-249 (2021).</li>
<li>Adler, N. R., Haydon, A., McLean, C. A., Kelly, J. W., Mar, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastatic+pathways+in+patients+with+cutaneous+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Metastatic pathways in patients with cutaneous melanoma.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 30 (1), 13-27 (2017).</li>
<li>Platz, A., Egyhazi, S., Ringborg, U., Hansson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+cutaneous+melanoma%3B+a+review+of+NRAS+and+BRAF+mutation+frequencies+in+relation+to+histogenetic+subclass+and+body+site%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Oncology%22%5BJournal%5D)">Human cutaneous melanoma; a review of NRAS and BRAF mutation frequencies in relation to histogenetic subclass and body site.</a> Molecular Oncology. 1 (4), 395-405 (2008).</li>
<li>Alonso, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+study+in+melanoma+identifies+epithelial-mesenchymal+transition+as+a+major+determinant+of+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">A high-throughput study in melanoma identifies epithelial-mesenchymal transition as a major determinant of metastasis.</a> Cancer Research. 67 (7), 3450-3460 (2007).</li>
<li>Rowe, C. J., Khosrotehrani, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+and+biological+determinants+of+melanoma+progression%3A+Should+all+be+considered+for+clinical+management%5BTitle%5D)+AND+%22Australasian+Journal+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Clinical and biological determinants of melanoma progression: Should all be considered for clinical management.</a> Australasian Journal of Dermatology. 57 (3), 175-181 (2016).</li>
<li>Plebanek, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-metastatic+cancer+exosomes+induce+immune+surveillance+by+patrolling+monocytes+at+the+metastatic+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Pre-metastatic cancer exosomes induce immune surveillance by patrolling monocytes at the metastatic niche.</a> Nature Communications. 8 (1), 1319(2017).</li>
<li>Orgaz, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+pigment+epithelium-derived+factor+enables+migration%2C+invasion+and+metastatic+spread+of+human+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Loss of pigment epithelium-derived factor enables migration, invasion and metastatic spread of human melanoma.</a> Oncogene. 28 (47), 4147-4161 (2009).</li>
<li>Ladhani, O., Sanchez-Martinez, C., Orgaz, J. L., Jimenez, B., Volpert, O. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pigment+epithelium-derived+factor+blocks+tumor+extravasation+by+suppressing+amoeboid+morphology+and+mesenchymal+proteolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Pigment epithelium-derived factor blocks tumor extravasation by suppressing amoeboid morphology and mesenchymal proteolysis.</a> Neoplasia. 13 (7), 633-642 (2011).</li>
<li>Ju, R. J., Stehbens, S. J., Haass, N. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+melanoma+cell-stroma+interaction+in+cell+motility%2C+invasion%2C+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Medicine+-+Dermatology%22%5BJournal%5D)">The role of melanoma cell-stroma interaction in cell motility, invasion, and metastasis.</a> Frontiers in Medicine - Dermatology. 5, 307(2018).</li>
<li>Wiley, H. E., Gonzalez, E. B., Maki, W., Wu, M. T., Hwang, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+CC+chemokine+receptor-7+and+regional+lymph+node+metastasis+of+B16+murine+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+National+Cancer+Institute%22%5BJournal%5D)">Expression of CC chemokine receptor-7 and regional lymph node metastasis of B16 murine melanoma.</a> Journal of the National Cancer Institute. 93 (21), 1638-1643 (2001).</li>
<li>Meier, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastatic+pathways+and+time+courses+in+the+orderly+progression+of+cutaneous+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Metastatic pathways and time courses in the orderly progression of cutaneous melanoma.</a> British Journal of Dermatology. 147 (1), 62-70 (2002).</li>
<li>Turner, N., Ware, O., Bosenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+metastasis%3A+melanoma+and+other+cancers%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+%26+Experimental+Metastasis%22%5BJournal%5D)">Genetics of metastasis: melanoma and other cancers.</a> Clinical & Experimental Metastasis. 35 (5-6), 379-391 (2018).</li>
<li>Ubellacker, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymph+protects+metastasizing+melanoma+cells+from+ferroptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Lymph protects metastasizing melanoma cells from ferroptosis.</a> Nature. 585 (7823), 113-118 (2020).</li>
<li>Cukierman, E., Pankov, R., Stevens, D. R., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taking+cell-matrix+adhesions+to+the+third+dimension%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Taking cell-matrix adhesions to the third dimension.</a> Science. 294 (5547), 1708-1712 (2001).</li>
<li>Cunningham, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin-binding+protein+requirement+for+cortical+stability+and+efficient+locomotion%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Actin-binding protein requirement for cortical stability and efficient locomotion.</a> Science. 255 (5042), 325-327 (1992).</li>
<li>Unger, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+human+carcinomas%3A+physiologically+relevant+3D+models+to+improve+anti-cancer+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Drug+Delivery+Reviews%22%5BJournal%5D)">Modeling human carcinomas: physiologically relevant 3D models to improve anti-cancer drug development.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 79-80, 50-67 (2014).</li>
<li>Fong, E. L., Harrington, D. A., Farach-Carson, M. C., Yu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heralding+a+new+paradigm+in+3D+tumor+modeling%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Heralding a new paradigm in 3D tumor modeling.</a> Biomaterials. 108, 197-213 (2016).</li>
<li>Nakamura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+mouse+melanoma+cell+lines+by+their+mortal+malignancy+using+an+experimental+metastatic+model%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Science%22%5BJournal%5D)">Characterization of mouse melanoma cell lines by their mortal malignancy using an experimental metastatic model.</a> Life Science. 70 (7), 791-798 (2002).</li>
<li>Meeth, K., Wang, J. X., Micevic, G., Damsky, W., Bosenberg, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+YUMM+lines%3A+a+series+of+congenic+mouse+melanoma+cell+lines+with+defined+genetic+alterations%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">The YUMM lines: a series of congenic mouse melanoma cell lines with defined genetic alterations.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 29 (5), 590-597 (2016).</li>
<li>Koya, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BRAF+inhibitor+vemurafenib+improves+the+antitumor+activity+of+adoptive+cell+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">BRAF inhibitor vemurafenib improves the antitumor activity of adoptive cell immunotherapy.</a> Cancer Research. 72 (16), 3928-3937 (2012).</li>
<li>Jenkins, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+murine+BRaf%28V600E%29+melanoma+cell+lines+with+sensitivity+to+PLX4032%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Multiple murine BRaf(V600E) melanoma cell lines with sensitivity to PLX4032.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 27 (3), 495-501 (2014).</li>
<li>Tuncer, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SMAD+signaling+promotes+melanoma+metastasis+independently+of+phenotype+switching%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">SMAD signaling promotes melanoma metastasis independently of phenotype switching.</a> The Journal of Clinical Investigation. 129 (7), 2702-2716 (2019).</li>
<li>Schwartz, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incipient+Melanoma+Brain+Metastases+Instigate+Astrogliosis+and+Neuroinflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Incipient Melanoma Brain Metastases Instigate Astrogliosis and Neuroinflammation.</a> Cancer Research. 76 (15), 4359-4371 (2016).</li>
<li>Perez-Guijarro, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multimodel+preclinical+platform+predicts+clinical+response+of+melanoma+to+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Multimodel preclinical platform predicts clinical response of melanoma to immunotherapy.</a> Nature Medicine. 26 (5), 781-791 (2020).</li>
<li>Krepler, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Comprehensive+Patient-Derived+Xenograft+Collection+Representing+the+Heterogeneity+of+Melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">A Comprehensive Patient-Derived Xenograft Collection Representing the Heterogeneity of Melanoma.</a> Cell Reports. 21 (7), 1953-1967 (2017).</li>
<li>Agrawal, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systems+biology+approach+identifies+FUT8+as+a+driver+of+melanoma+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A systems biology approach identifies FUT8 as a driver of melanoma metastasis.</a> Cell. 31 (6), 804-819 (2017).</li>
<li>Hanniford, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenetic+silencing+of+CDR1as+drives+IGF2BP3-mediated+melanoma+invasion+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Epigenetic silencing of CDR1as drives IGF2BP3-mediated melanoma invasion and metastasis.</a> Cancer Cell. 37 (1), 55-70 (2020).</li>
<li>Kim, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PRMT5+control+of+cGAS%2FSTING+and+NLRC5+pathways+defines+melanoma+response+to+antitumor+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">PRMT5 control of cGAS/STING and NLRC5 pathways defines melanoma response to antitumor immunity.</a> Science Translational Medicine. 12 (551), (2020).</li>
<li>de Miera, E. V., Friedman, E. B., Greenwald, H. S., Perle, M. A., Osman, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+five+new+melanoma+low+passage+cell+lines+representing+the+clinical+and+genetic+profile+of+their+tumors+of+origin%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Development of five new melanoma low passage cell lines representing the clinical and genetic profile of their tumors of origin.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 25 (3), 395-397 (2012).</li>
<li>Morsi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+a+clinically+relevant+mouse+model+of+melanoma+brain+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of a clinically relevant mouse model of melanoma brain metastasis.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 26 (5), 743-745 (2013).</li>
<li>Huynh, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+in+vivo+microRNA+targeting+of+liver+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Efficient in vivo microRNA targeting of liver metastasis.</a> Oncogene. 30 (12), 1481-1488 (2011).</li>
<li>Zou, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+variables+that+affect+human+hepatocyte+AAV+transduction+in+liver+chimeric+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy+Methods+and+Clinical+Development%22%5BJournal%5D)">Experimental variables that affect human hepatocyte AAV transduction in liver chimeric mice.</a> Molecular Therapy Methods and Clinical Development. 18, 189-198 (2020).</li>
<li>Kleffman, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melanoma-secreted+Amyloid+Beta+Suppresses+Neuroinflammation+and+Promotes+Brain+Metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Melanoma-secreted Amyloid Beta Suppresses Neuroinflammation and Promotes Brain Metastasis.</a> bioRxiv. , 854885(2019).</li>
<li>Curtis, A., Calabro, K., Galarneau, J. R., Bigio, I. J., Krucker, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+variations+of+skin+pigmentation+in+C57BL%2F6+mice+affect+optical+bioluminescence+quantitation%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Temporal variations of skin pigmentation in C57BL/6 mice affect optical bioluminescence quantitation.</a> Molecular Imaging and Biology. 13 (6), 1114-1123 (2011).</li>
<li>Sil, P., Wong, S. W., Martinez, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((More+than+skin+deep%3A+autophagy+is+vital+for+skin+barrier+function%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">More than skin deep: autophagy is vital for skin barrier function.</a> Frontiers in Immunology. 9, 1376(2018).</li>
<li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-wide+CRISPR+screen+in+a+mouse+model+of+tumor+growth+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Genome-wide CRISPR screen in a mouse model of tumor growth and metastasis.</a> Cell. 160 (6), 1246-1260 (2015).</li>
<li>Hart, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+CRISPR+screens+reveal+fitness+genes+and+genotype-specific+cancer+liabilities%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">High-resolution CRISPR screens reveal fitness genes and genotype-specific cancer liabilities.</a> Cell. 163 (6), 1515-1526 (2015).</li>
<li>Wang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+characterization+of+essential+genes+in+the+human+genome%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Identification and characterization of essential genes in the human genome.</a> Science. 350 (6264), 1096-1101 (2015).</li>
<li>Edgar, R., Domrachev, M., Lash, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+Expression+Omnibus%3A+NCBI+gene+expression+and+hybridization+array+data+repository%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Research%22%5BJournal%5D)">Gene Expression Omnibus: NCBI gene expression and hybridization array data repository.</a> Nucleic Acids Research. 30 (1), 207-210 (2002).</li>
<li>Lappalainen, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+European+Genome-phenome+Archive+of+human+data+consented+for+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Genetics%22%5BJournal%5D)">The European Genome-phenome Archive of human data consented for biomedical research.</a> Nature Genetics. 47 (7), 692-695 (2015).</li>
<li>Cerami, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cBio+cancer+genomics+portal%3A+an+open+platform+for+exploring+multidimensional+cancer+genomics+data%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discovery%22%5BJournal%5D)">The cBio cancer genomics portal: an open platform for exploring multidimensional cancer genomics data.</a> Cancer Discovery. 2 (5), 401-404 (2012).</li>
<li>Grossman, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toward+a+shared+vision+for+cancer+genomic+data%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Toward a shared vision for cancer genomic data.</a> New England Journal of Medicine. 375 (12), 1109-1112 (2016).</li>
</ol>

Die Autoren haben keine Interessenkonflikte zu erklären.

Ziel dieses technischen Berichts ist es, einen standardisierten, von oben nach unten gerichteten Workflow für die Untersuchung potenzieller Akteure bei Melanommetastasen anzubieten. Da In-vivo-Experimente kostspielig und zeitaufwendig sein können, sind Strategien zur Maximierung der Effizienz und zur Steigerung des Wertes der erhaltenen Informationen von größter Bedeutung.
Es ist unerlässlich, komplementäre Ansätze zu verwenden, um die Ergebnisse innerhalb desselben Experiments zu übe...

Die hohe Mortalität im Zusammenhang mit metastasierendem Melanom in Kombination mit einer zunehmenden Inzidenz von Melanomen weltweit 1 (geschätzter Anstieg von 7,86% bis2025) erfordert neue Behandlungsansätze. Fortschritte in der Zielentdeckung hängen von reproduzierbaren Metastasenmodellen ab, einem hochkomplexen Prozess. Während der Schritte der metastasierenden Kaskade müssen Melanomzellen unzählige Barrieren überwinden, um eine Umgehung des Immunsystems und die Besiedlung entfernter Gewebe zu erreichen2. Die Widerstandsfähigkeit und Anpassungsfähigkeit von Melanomzellen ergibt sich aus einer Vielzahl von Faktoren, darunter ihre hohe genetische Mutationslast 3 und ihr Neuralkammursprung, die eine entscheidende phänotypische Plastizitätverleihen 3,4,5. Bei jedem Schritt ermöglichen Transkriptionsprogramme es metastasierenden Melanomzellen, von einem Zustand in einen anderen zu wechseln, basierend auf Hinweisen aus dem Übersprechen mit der Mikroumgebung, bestehend aus dem Immunsystem6, dem extrazellulären Milieu7,8 und der zellulären Architektur der physischen Barrieren9, mit denen sie in Kontakt kommen. Zum Beispiel entziehen sich Melanomzellen der Immunüberwachung, indem sie die Expression wichtiger immunprimierender tumorsezernierter Faktoren herunterregulieren6.
Studien beschreiben eine "prämetastasierende Nische", in der Melanomzellen Chemokine und Zytokine absondern, um das entfernte "Zielorgan" für Metastasen10 vorzubereiten. Diese Ergebnisse werfen wichtige Fragen über den Organtropismus metastasierender Melanomzellen und den anatomischen Weg auf, den sie nehmen, um auf entferntes Gewebe zuzugreifen. Nach der Intravasation ist bekannt, dass Melanomzellen durch Lymphatika (lymphatische Ausbreitung) und Blutgefäße (hämatogene Ausbreitung) metastasieren2,11. Während die meisten Patienten eine lokalisierte Erkrankung aufweisen, weist eine kleine Untergruppe von Fällen eine ferne metastasierende Erkrankung und keine lymphatische Verbreitung (negative Lymphknotenbeteiligung) auf11, was auf die Existenz alternativer metastasierender Wege für Melanome hindeutet.
Wenn sie eine metastasierende Stelle besiedeln, durchlaufen Melanomzellen epigenetische und metabolische Anpassungen12,13. Um auf neue Kompartimente zuzugreifen und in sie einzudringen, verwenden Melanomzellen Proteasen 14 und zytoskelettale Modifikationen 11,15, die es ihnen ermöglichen, zu ihrem neuen Standort zu gelangen und dort zu wachsen. Die Schwierigkeit bei der Bekämpfung von Melanomzellen liegt in der Komplexität und Anzahl solcher Anpassungen; Daher sollte sich das Feld bemühen, so viele Schritte und Anpassungen wie möglich experimentell nachzubilden. Trotz zahlreicher Fortschritte in in vitro Assays wie Organoiden und 3D-Kulturen16,17 rekapitulieren diese Modelle die in vivo metastatische Kaskade nur unvollständig.
Murine-Modelle haben sich als wertvoll erwiesen, indem sie ein Gleichgewicht zwischen Reproduzierbarkeit, technischer Machbarkeit und Simulation menschlicher Krankheiten gefunden haben. Intravaskuläre, orthotopisch und heterotopisch implantierte Melanomzellen aus patientenabgeleiteten Xenotransplantaten oder Kurzzeitkulturen in immungeschwächte oder humanisierte Mäuse stellen das Rückgrat der Zielentdeckung bei metastasierendem Melanom dar. Diesen Systemen fehlt jedoch oft eine entscheidende biologische Einschränkung der Metastasierung: das Immunsystem. Syngene Melanommetastasenmodelle, die diese Einschränkung besitzen, sind auf dem Gebiet relativ selten. Diese Systeme, die in immunkompetenten Mäusen entwickelt wurden, einschließlich B16-F1018, der YUMM-Familie der Zelllinien19, SM1 20, D4M3 21, RIM3 22 oder neuer, der RMS 23 und M1 (Mel114433), M3 (HCmel1274), M4 (B2905) 24 Melanom-Zelllinien, erleichtern die Untersuchung der komplexen Rolle der Immunantwort des Wirts bei der Melanomprogression.
Hier wird eine Pipeline zur Identifizierung von Melanommetastasenzielen vorgestellt. Mit zunehmenden und größeren "Omics" -Datensätzen, die aus Melanom-Patientenkohorten generiert werden, postulieren wir, dass Studien, die das klinischste Versprechen haben, diejenigen sind, die aus der Big-Data-Integration stammen, was zu einer akribischen funktionellen und mechanistischen Befragung führt25,26,27,28. Durch die Verwendung von Mausmodellen zur Untersuchung potenzieller Ziele im metastatischen Prozess können in vivo-spezifische Ereignisse und Gewebeinteraktionen berücksichtigt werden, wodurch die Wahrscheinlichkeit einer klinischen Translation erhöht wird. Mehrere Methoden zur Quantifizierung der metastatischen Belastung werden skizziert und liefern ergänzende Daten zu den Ergebnissen eines bestimmten Experiments. Ein Protokoll für die Einzelzellisolierung von Tumoren in verschiedenen Organen wird beschrieben, um die unvoreingenommene Charakterisierung der Genexpression in metastasierenden Zellen zu unterstützen, die der Einzelzell- oder Massen-RNA-Sequenzierung vorausgehen kann.

<table><tbody><tr><td>#15 Scapel-Klinge&nbsp;</td><td>WPI</td><td>500242</td><td>Für chirurgische</td></tr> <tr><td>Eingriffe#3 Scapel Griff</td><td>WPI</td><td>500236</td><td>Für chirurgische Eingriffe</td></tr><tr><td>1 ml Tuberkulin-Spritze, Stülpspitze&nbsp;</td><td>BD</td><td>309626</td><td>Injektionen</td></tr><tr><td>10 mL Spritze, Slipspitze&nbsp;</td><td>BD</td><td>301029</td><td>Perfusion</td></tr><tr><td>10% Formalin Natrium gepuffert</td><td>EK Industries</td><td>4499-20L</td><td>Für Perfusions-/Gewebefixiermittel</td></tr><tr><td>15 mL Conical</td><td>Corning&nbsp;</td><td>430052</td><td>Zellkultur</td></tr><tr><td>15 mL Konische Polypropylen-Zentrifugenröhrchen</td><td>Falcon</td><td>352196</td><td>Zellkultur</td></tr><tr><td>200 Proof Ethanol</td><td>Deacon Labs</td><td>04-355-223</td><td>Histology</td></tr><tr><td>22G &ndash; 22mm Nadel</td><td>BD</td><td>305156</td><td>Perfusion</td></tr><tr><td>4-0 Vicryl Naht</td><td>Ethicon</td><td>J464G</td><td>Naht</td></tr><tr><td>4% Carson's Phosphat gepuffert Paraformaldehyd&nbsp;</td><td>EMS</td><td>15733-10</td><td>Für Perfusions-/Gewebefixiermittel</td></tr><tr><td>40&micro; m</td><td>Corning</td><td>431750</td><td>Gewebeaufbereitung</td></tr><tr><td>5-0 Resorbierbares Nahtmaterial</td><td>Ethicon</td><td>6542000</td><td>Verschluss</td></tr><tr><td>50 mL konisch</td><td>Corning&nbsp;</td><td>430828</td><td>Zellkultur</td></tr><tr><td>50 ml konische Zentrifugenröhrchen aus Polypropylen</td><td>Falcon</td><td>352070</td><td>Zellkultur</td></tr><tr><td>7-0 Seidennaht&nbsp;</td><td>FST</td><td>18020-70</td><td>Ligatur</td></tr><tr><td>70&micro; m</td><td>Corning</td><td>431751</td><td>Tissue-Verarbeitung</td></tr><tr><td>Anti-Fade-Eindeckmedien&nbsp; &nbsp;</td><td>Vector Labs</td><td>H-1000-10</td><td>Immunfluoreszenz-Approximator</td></tr><tr><td>mit Pinzette, 10cm&nbsp;</td><td>WPI</td><td>14189</td><td>Für mikrochirurgische Eingriffe</td></tr><tr><td>Avance</td><td>Bruker</td><td>3 HD</td><td>NMR-Konsole&nbsp;</td></tr><tr><td>Biospec 7030&nbsp;</td><td>Bruker</td><td>7030</td><td>Micro MRT</td></tr><tr><td>BSA</td><td>Bioreg</td><td>A941</td><td>NuMA</td>Färbe-Castroviejo-Nahzange</tr><tr><td>, gerade Spitzen 5,5 mm Bindeplattform, 11 cm</td><td>WPI</td><td>WP5025501</td><td>Für mikrochirurgische Eingriffe</td></tr><tr><td>Coplin Färbeglas</td><td>Bel-Art&nbsp;</td><td>F44208-1000</td><td>Histologie</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D9542-1MG</td><td>Immunfluoreszenz</td></tr><tr><td>dCas9-KRAB</td><td>Addgene</td><td>110820</td><td>Genmanipulation</td></tr><tr><td>DNase I</td><td>NEB</td><td>M0303L</td><td>Gewebeaufbereitung</td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Corning</td><td>21-030-CM</td><td>Gewebeaufbereitung</td></tr><tr><td>Extra scharfe unbeschichtete Einkantklinge</td><td>GEM</td><td>62-0167</td><td>Verarbeitung von Gewebe</td></tr><tr><td>Extrazelluläres Matrixsubstrat&nbsp;</td><td>Corning</td><td>354234</td><td>den Wachstumsfaktor als reduziert betrachten (als Alternative&nbsp;</td></tr><tr><td>FBS</td><td>Cytiva</td><td>SH30910.03</td><td>Zellkultur</td></tr><tr><td>Fidschi Image J</td><td>Fidschi Image J</td><td>Software</td><td>Immunfluoreszenz</td></tr><tr><td>Ziege Anti-Kaninchen HRP konjugiertes Multimer&nbsp;</td><td>Thermo Fisher</td><td>A16104</td><td>NuMA</td></tr><tr><td>Färbendes Ziegenserum</td><td>Gibco</td><td>PCN5000</td><td>Immunfluoreszenz</td></tr><tr><td>HBSS</td><td>Corning</td><td>21-020-CV</td><td></td></tr><tr><td>Hämatoxylin</td> für die Gewebeaufbereitung<td>Richard-Allan Wissenschaftlicher Verein</td><td>7231</td><td>Histologie</td></tr><tr><td>Illumina III&nbsp;</td><td>PerkinElmer</td><td>CLS136334</td><td>BLI Instrument</td></tr><tr><td>Insulinspritze 28G - 8mm Nadel</td><td>BD</td><td>329424</td><td>Injektionen</td></tr><tr><td>Insulinspritze 31G - 6mm Nadel&nbsp;</td><td>BD</td><td>326730</td><td>Injektionen</td></tr><tr><td>Iriszange, 10,2 cm, Full Curve, gezackt</td><td>WPI</td><td>504478</td><td>Für Perfusionen und chirurgische Eingriffe</td></tr><tr><td>Isofluran USP</td><td>Covetrus</td><td>11695067772</td><td>Anästhesie</td></tr><tr><td>Jewelers #7 Pinzette Titan 11 cm 0,07 x 0,01 mm Spitze</td><td></td><td>WPI WP6570</td><td>Für mikrochirurgische Eingriffe</td></tr><tr><td>Ketamin HCl 100mg/mL</td><td>Mylan Ind.</td><td>1049007</td><td>Anästhesie</td></tr><tr><td>lentiCRISPRv2</td><td>Addgene</td><td>98290</td><td>Genmanipulation</td></tr><tr><td>Lycopersicon Esculentum (Tomate) Lektin, DyLight 649</td><td>Invitrogen</td><td>L32472</td><td>Marker für vaskuläre Endothelzellen</td></tr><tr><td>MEM nicht-essentielle Aminosäuren X 100</td><td>Corning</td><td>25-025-CI</td><td>Zellkultur</td></tr><tr><td>Metzenbaum Schere</td><td>WPI</td><td>503269</td><td>Für chirurgische Eingriffe Verfahren</td></tr><tr><td>Mikroinjektionseinheit</td><td>KOPF</td><td>5000</td><td>Intrakardiale Injektionen</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Fisher</td><td>S25877&nbsp;</td><td>NuMA Färbung</td></tr><tr><td>Nadel 30G x 25mm</td><td>BD</td><td>305128</td><td>Intrakardiale</td></tr><tr><td>Injektionsnadel 33G x 15mm</td><td>Hamilton</td><td>7747-01</td><td>Intrakarotis-Injektionsnadelhalter</td></tr><tr><td>, Castroviejo, 14cm, mit Lock, 1,2mm gezackte Backen</td><td>WPI</td><td>14137-G</td><td>Für mikrochirurgische Eingriffe</td></tr><tr><td>NOD. Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ Mäuse</td><td>Das Jackson Laboratory</td><td>005557</td><td>Mausmodell</td></tr><tr><td>NU/J Mäuse</td><td>Das Jackson Laboratory</td><td>002019</td><td>Mausmodell</td></tr><tr><td>Nuklearer Mitotic Apparat Protein polyklonales Kaninchen anti-human&nbsp;</td><td>Abcam</td><td>97585</td><td>NuMA Färbung</td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin 10000U/mL</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td>Zellkultur</td></tr><tr><td>Percoll</td><td>GE</td><td>0891-01</td><td>Dichtetrennlösung&nbsp;</td></tr><tr><td>PI Classic Chirurgische Handschuhe</td><td>Cardinal Health</td><td>2D72PT75X</td><td>Chirurgie</td></tr><tr><td>pLKO Tet-On</td><td>Addgene</td><td>21915</td><td>Genetische Manipulation</td></tr><tr><td>Povidon-Jod 10% Lösung</td><td>Medline</td><td>MDS093943</td><td>Chirurgie</td></tr><tr><td>Proparacain Tropfen 0,5%</td><td>Akorn Pharma</td><td>AX0501</td><td>Opthalmisches Lokalanästhetikum</td></tr><tr><td>Puralube Petrolatum Augensalbe</td><td>Dechra</td><td>83592</td><td>Anästhesie-Rasierklinge</td></tr><tr><td>Doppelschneidige Klingen&nbsp;</td><td>EMS</td><td>72000</td><td>Rasieren und Vibrotome Brain Slicing&nbsp;</td></tr><tr><td>Reflex 9mm EZ Clip&nbsp;</td><td>Braintree</td><td>EZC-&nbsp; KIT</td><td>Wundverschluss</td></tr><tr><td>RPMI 1640&nbsp;</td><td>Corning</td><td>10-040-CM</td><td>Zellkulturschere</td></tr><tr><td>, Feder 10,5 cm Str, 8 mm Klingen</td><td>WPI</td><td>501235</td><td>Für mikrochirurgische Eingriffe</td></tr><tr><td>Halbautomatische vibrierende Klinge Mikrotom</td><td>Leica</td><td>VT1200</td><td>Brain Slice Immunfluoreszenz</td></tr><tr><td>Einkanal Anästhesie Verdampfer</td><td>System Kent Scientific</td><td>VetFlo-1210S&nbsp;</td><td>Anästhesie</td></tr><tr><td>Smartbox Tischkammersystem und Abluftgebläse</td><td>EZ Systems</td><td>TT4000</td><td>CO2 Euthanasie</td></tr><tr><td>Steriles gefenstertes Einwegtuch</td><td>Medline</td><td>NON21002</td><td>Chirurgie</td></tr><tr><td>Sterile unverstärkte Aurora OP-Mäntel mit eingesetzten Ärmeln</td><td>Medline</td><td>DYNJP2715</td><td>Chirurgie</td></tr><tr><td>T25</td><td>Flask Corning&nbsp;</td><td>430639</td><td>Zellkultur</td></tr><tr><td>Tris</td><td>Corning</td><td>46-031-CM</td><td>NuMA Färbung</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X100-500ML</td><td>Immunfluoreszenz</td></tr><tr><td>Troutman Bindezange, 10cm, gebogenes G-Muster, 0,52mm Spitze mit Bindeplattform</td><td>WPI</td><td>WP505210</td><td>Für mikrochirurgische</td></tr><tr><td>Eingriffe Gefäßclips 10G Druck 5x 0,8mm Backen, 5/Packung</td><td>WPI</td><td>15911</td><td>Für Mikrochirurgische Eingriffe</td></tr><tr><td>Visiopharm</td><td>Visiopharm</td><td>Visiopharm</td><td>NuMA Quantifizierungssoftware für Färbemittel</td></tr><tr><td>Xylasin 100mg/mL</td><td>Akorn Pharma</td><td>59399-111-50</td><td>Anästhesie</td></tr><tr><td>Xylol</td><td>Fisher</td><td>X3P-1GAL</td><td>Histologie</td></tr></tbody></table>

eine robuste entdeckungsplattform zur identifizierung neuartiger mediatoren der melanommetastasierung

A Robust Discovery Platform for the Identification of Novel Mediators of Melanoma Metastasis

Metastasierung ist ein komplexer Prozess, bei dem Zellen Barrieren überwinden müssen, die nur unvollständig durch In-vitro-Assays modelliert werden. Ein systematischer Workflow wurde unter Verwendung robuster, reproduzierbarer In-vivo-Modelle und standardisierter Methoden etabliert, um neue Akteure in der Melanommetastasierung zu identifizieren. Dieser Ansatz ermöglicht Datenrückschlüsse in bestimmten experimentellen Stadien, um die Rolle eines Gens bei Metastasen genau zu charakterisieren. Modelle werden erstellt, indem genetisch veränderte Melanomzellen über intrakardiale, intradermale oder subkutane Injektionen in Mäuse eingeführt werden, gefolgt von einer Überwachung mit serieller In-vivo-Bildgebung . Sobald vordefinierte Endpunkte erreicht sind, werden Primärtumoren und/oder metastasentragende Organe entnommen und für verschiedene Analysen verarbeitet. Tumorzellen können sortiert und einer von mehreren "Omics"-Plattformen unterzogen werden, einschließlich der Einzelzell-RNA-Sequenzierung. Organe werden bildgebenden und immunhistopathologischen Analysen unterzogen, um die Gesamtbelastung durch Metastasen zu quantifizieren und ihren spezifischen anatomischen Standort abzubilden. Diese optimierte Pipeline, einschließlich standardisierter Protokolle für Transplantation, Überwachung, Gewebeernte, -verarbeitung und -analyse, kann für patientenabgeleitete, kurzfristige Kulturen und etablierte menschliche und murine Zelllinien verschiedener solider Krebsarten übernommen werden.

Die folgenden Abbildungen veranschaulichen, wie der beschriebene Workflow zur Identifizierung neuartiger Treiber der Melanommetastasierung angewendet wurde. Abbildung 2 fasst die Ergebnisse einer veröffentlichten Studie zusammen, in der die Auswirkungen der Stilllegung der Fucosyltransferase FUT8 in vivo Melanommetastasen untersucht wurden26. Kurz gesagt, die Analyse der glykomischen Daten des menschlichen Patienten (erhalten durch Lektin-Arrays) und die tran...

Dieser Artikel beschreibt einen Workflow von Techniken, die zum Testen neuartiger Kandidatenmediatoren von Melanommetastasen und deren Wirkmechanismus eingesetzt werden.

Eine robuste Entdeckungsplattform zur Identifizierung neuartiger Mediatoren der Melanommetastasierung

Metastasis is a complex process, requiring cells to overcome barriers that are only incompletely modeled by in vitro assays. A systematic workflow was ...

Dieses Protokoll beschreibt eine Reihe von Techniken innerhalb eines kontinuierlichen Workflows, die zur Beurteilung der In-vivo-Effekte von Kandidatenregulatoren der Melanommetastasierung, aber auch der Metastasierung anderer solider Malignome verwendet werden können. Der Hauptvorteil unseres systematischen Workflows ist die erhöhte Reproduzierbarkeit der Daten durch robuste und standardisierte In-vivo-Modelle und -Techniken. Diese Pipeline bietet einen Weg für die Entdeckung von Zielen und die Entwicklung von Therapien, indem Kandidaten getestet werden, die aus Omics-Daten oder In-vitro-Assays in einem In-vivo-Umfeld abgeleitet wurden.Die Lernkurve, die mit den in diesem Protokoll vorgestellten Techniken verbunden ist, wird verkürzt, indem die bereitgestellten Materialien verwendet werden und die detaillierte Beschreibung beim Üben der Schritte befolgt wird. Orlando Aristizabal, ein Forscher im Preclinical Imaging Core, und Ran Moubarak, ein Ausbilder in meinem Labor, werden helfen, das Verfahren zu demonstrieren. Für intradermale Injektionen anästhesieren und rasieren Sie eine acht bis 10 Wochen alte Maus in einer Biosicherheitskabine unter Beibehaltung aseptischer Bedingungen.D

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Research

Forschung

JoVE Journal

Cancer Research

Krebsforschung

Dieser Artikel beschreibt die Verfahren der experimentellen Metastasierung Assay, mit denen die metastatische Potential von humanen Krebszelllinien zu bestimmen.

Experimentelle Metastase Assay

Dieses Video beschreibt das Protokoll zur Etablierung eines spontanen Metastasen-Mausmodells von Xenotransplantaten oder PDXs von Darmkrebspatienten. Diese Xenotransplantatmodelle ahmen teilweise die Merkmale menschlicher Karzinome nach und verstehen die kritischen Aspekte menschlicher Malignome, einschließlich Invasion und Metastasierung.

Mausmodelle für spontane Metastasen: Eine Plattform zur Untersuchung des Metastasierungspotenzials von orthotopisch injizierten kolorektalen Krebszellen

In diesem Video werden Melanomzellen im Mausmodell intravenös durch die Schwanzvene injiziert. Die Melanomzellen wandern weiter durch das Kreislaufsystem, passen sich an die entfernte Mikroumgebung an und verursachen Metastasen in Organen wie der Lunge.

Experimentelles Mausmodell für metastasiertes Melanom: Eine Plattform zur Untersuchung des metastasierenden Potenzials von Melanomzellen in der Lunge

Dieses Protokoll beschreibt eine Technik zur Probenvorbereitung durch Co-Kultivierung von Eierstockexplantaten mit den Eileiterkrebszellen. Diese Proben werden mit Hilfe der bildgebenden Massenspektroskopie (IMS) visualisiert, um den Austausch kleiner Moleküle zwischen den Zellen und Geweben zu erkennen, der zur Tumorentwicklung führt.

Modellierung der Kommunikation von Eierstockkrebs für die bildgebende Massenspektrometrie-Analyse: Eine Methode zur Identifizierung niedermolekularer chemischer Kommunikatoren bei der Entwicklung metastasierender Eierstocktumoren

Metastasierung spielt eine tiefgreifende Rolle bei der Virulenz von Krebs und ist schätzungsweise für 90% der Todesfälle verantwortlich.  Wir berichten über ein Protokoll für ein metastasiertes Melanommodell in Mäusen, das nützlich ist, um die Wirksamkeit von Therapeutika gegen dieses klinische Phänomen zu bestimmen.

Die Injektion von syngenen murinen Melanomzellen ihre metastatische Potential in der Lunge zu bestimmen

Hier präsentieren wir ein Protokoll, um eine 3D organotypischen Melanom Sphäroid Hautmodell zu generieren, die sowohl die Architektur rekapituliert und mehrzelligen Komplexität einer Orgel/Tumor in Vivo aber gleichzeitig bietet Platz für systematische experimentelle Intervention.

Ein 3D organotypischen Melanom Sphäroid Hautmodell

Wir präsentieren ein Protokoll, um den Ausdruck-Niveau der zirkulierenden MicroRNA (MiRNAs) bewerten in Plasma-Proben von Krebspatienten. Insbesondere haben wir einen im Handel erhältlichen Bausatz für zirkulierende MiRNA Extraktion und reversen Transkription verwendet. Zu guter Letzt haben wir eine Gruppe von 24 ausgewählten MiRNAs, die unter Verwendung der benutzerdefinierten Platten in Echtzeit vorab gefleckte Sonde analysiert.

Erkennung eines zirkulierenden MicroRNA Custom Panels bei Patienten mit metastasiertem kolorektalen Karzinom

Im Zeitalter der Immuntherapie und des genomischen Profilings von Einzelzellen erfordert die Krebsbiologie neuartige In-vitro- und Computerwerkzeuge, um die Tumor-Immun-Schnittstelle in einem geeigneten raumzeitlichen Kontext zu untersuchen. Wir beschreiben Protokolle zur Nutzung von mikrofluidischen Kokulturen des Tumor-Immunsystems in 2D- und 3D-Umgebungen, die mit einer dynamischen, multiparametrischen Überwachung zellulärer Funktionen kompatibel sind.

Mikrofluidische Co-Kulturmodelle zur Analyse der Immunantwort in in vitro Tumormikroumgebungen

Dies ist eine effektive Methode, um nach Suppressoren oder Treibern von Krebsmetastasen zu suchen. Zellen, die mit einer Expressionsbibliothek transduziert werden, werden in das Gefäßsystem der Chorioallanto-Membran des Huhns injiziert, um metastatische Kolonien zu bilden. Kolonien mit verminderter oder erhöhter Invasivität werden herausgeschnitten, erweitert, neu injektiert, um ihren Phänotyp zu bestätigen, und schließlich mit Hochdurchsatzsequenzierung analysiert.

Entdeckung metastasierender Regulatoren mit einem schnellen und quantitativen intravitalen Chick Chorioallantoic Membrane Model

Melanom ist eine sehr aggressive Krankheit, die sich schnell auf andere Organe ausbreitet. Dieses Protokoll beschreibt die Anwendung der Ultrahochfrequenz-Ultraschallbildgebung in Verbindung mit 3D-Rendering zur Überwachung des Volumens der Leistenlymphknoten im Braf/Pten-Mausmodell des metastasierenden Melanoms.

Analyse des Lymphknotenvolumens mittels Ultrahochfrequenz-Ultraschallbildgebung im gentechnisch veränderten Mausmodell des Melanoms von Braf/Pten

Hier stellen wir ein Protokoll zur Erzeugung von Organoiden von Melanompatienten vor, indem disassoziierte Zellsuspensionen aus frischem Melanomgewebe kultiviert werden. Diese Organoide rekapitulieren patientenspezifische Tumore in vitro originalgetreu und bieten einen innovativen Ansatz zur Erforschung immunsuppressiver Mechanismen von Tumoren, des Wirkstoffscreenings, der Arzneimittelresistenzmechanismen und der Krebsüberwachungsansätze.

Aufdeckung therapeutischer Möglichkeiten mit Organoidmodellen von Melanom-Patienten

Erfahren Sie eine standardisierte Arbeitsablauf-Technik zur Bewertung von Melanom-Metastasenregulatoren in vivo. Diese Methode verbessert die Reproduzierbarkeit durch robuste Tiermodelle und unterstützt die Zielentdeckung für Therapien.

Eine robuste Entdeckungsplattform zur Identifizierung neuartiger Mediatoren der Melanommetastasierung

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