Eine modifizierte Manschettentechnik für das zervikale heterotope Herztransplantationsmodell der Maus

Ein Maus-Herztransplantationsmodell hilft bei der Untersuchung von kardialen Allotransplantaten, immunologischen und parasagittalen Abstoßungsmechanismen. Dieses Verständnis würde dazu beitragen, einen einzigartigen Ansatz zur Verbesserung des langfristigen Überlebens der Patienten zu entwickeln. Diese zervikale Transplantation wird ohne Nähen mit einer Manschettenmethode durchgeführt.

Daher verringert es die Komplexität der Gefäßanastomose und vermeidet die Störung der Blutversorgung und den venösen Rückfluss des Unterkörpers. Das Verfahren wird von Dr. Xin Mao, einem Chirurgen aus unserem Labor, demonstriert. Legen Sie zunächst die Empfängermaus auf ein Heizkissen am Operationstisch und rasieren Sie die Haare über dem Operationsbereich.

Machen Sie nach der Desinfektion des Operationsbereichs einen 1,5 bis 2 Zentimeter langen Schnitt parallel zur zervikalen Mittellinie vom rechten Unterkieferwinkel bis zum Schwanzende. Präzieren Sie etwa einen Zentimeter der rechten Vena jugularis externa mit einem Elektrokoagulator und einer Mikrozange. Schneiden Sie die Vene am proximalen Ende mit einer atruamatischen mikrovaskulären Klemme ab und ligieren Sie sie am distalen Ende.

Führen Sie das distale Ende der Vene durch eine 22-Gauge-Polyurethan-Stachelmanschette mit einem abgeschrägten Ende und oberflächlichen Rillen. Fixieren Sie die Vene mit dem Griff der Manschette mit einer mikrovaskulären Klemme. Entfernen Sie das 8-0 Ligaturnaht am distalen Ende, drehen Sie das Lumen über die Manschette, die mit dem oberflächlichen Widerhaken versehen ist, auf links und fixieren Sie es mit einer 10-0-chirurgischen Naht in den Rillen der Oberfläche.

Sezieren Sie die rechte sublinguale Drüse, um eine Fossa für die Implantation des Herztransplantats zu bilden, und reservieren Sie den rechten Lappen der Unterkieferdrüse und den rechten Sternocleidomastoideus. Präzieren Sie die rechte Arteria carotis communis etwa einen Zentimeter lang mit einer Mikrozange und schneiden Sie die Arterie mit einer atraumatischen mikrovaskulären Klemme am proximalen Ende ab. Ligate und schneiden Sie die Arterie ab.

Führen Sie das distale Ende der Arterie durch eine 26-Gauge-Polyurethan-Stachelmanschette mit einem abgeschrägten Ende und Rillen auf der Oberfläche. Fixieren Sie die Arterie mit dem Griff der Manschette mit einer mikrovaskulären Klemme. Entfernen Sie die Ligaturnaht am distalen Ende, drehen Sie das Lumen über die Manschette und fixieren Sie es mit einem oberflächlichen Widerhaken und Rillen mit einer 10-0-Operationsnaht.

Nachdem Sie die Gefäße des Empfängers vorbereitet haben, lassen Sie 100 internationale Einheiten pro Milliliter Heparinkochsalzlösung auf die Gefäße fallen, um eine Thrombose zu verhindern. Decken Sie den Gebärmutterhalsschnitt für die anschließende Implantation mit feuchter Kochsalzlösung ab. Rasieren Sie die Bauchhaare mit einem Elektrorasierer.

Schneiden Sie nach der Desinfektion des Operationsbereichs den Bauch entlang der Mittellinie von der Symphyse pubis bis zum Subxiphoid ein und erweitern Sie den eingeschnittenen Bereich mit einem Retraktor. Sezieren Sie einen Zentimeter der Bauchaorta und der unteren Hohlvene mit einem Elektrokoagulator und einer Mikrozange und führen Sie eine Heparinisierung durch, indem Sie einen Milliliter physiologische Kochsalzlösung, ergänzt mit 250 internationalen Einheiten pro Milliliter Heparin, durch die untere Hohlvene injizieren. Entfernen Sie die Bauchaorta und die untere Hohlvene.

Entfernen Sie den Thorax entlang der vorderen Achsellinie auf beiden Seiten mit einer chirurgischen Schere, um die Brustwand zu trennen, und ligieren Sie dann die obere Hohlvene mit einem 8-0 chirurgische Naht. Führen Sie eine Kopfhautnadel in die suprahepatische Vena cava inferior ein. Dann injizieren Sie eiskalte physiologische Kochsalzlösung, die mit 100 Einheiten pro Milliliter Heparin ergänzt wird, durch die Kopfhautnadel aus der suprahepatischen unteren Hohlvene, um das Spenderherz zu bewässern, bis die Blutfarbe verblasst.

Reperfundieren Sie das Spenderherz mit zwei bis drei Millilitern eiskalter Histidin-Tryptophan-Ketoglutarat-Lösung aus dem Aortenbogen, um das Spendermyokard zu schützen. Ligate der oberen und unteren Venae cavae und der Lungenvene mit einer 5-0 chirurgischen Naht. Präzieren und schneiden Sie die Spenderaorta und die Lungenarterie ab, bevor Sie sich verzweigen.

Teilen Sie dann die oberen und unteren Hohlvenen und die Lungenvene, um das Herz des Spenders zu entfernen. Implantieren Sie das Spenderherz in umgekehrter Position in die Halstasche der Empfängermaus. Ziehen Sie die Manschette mit einer umgestülpten Empfängervene in das Lumen der Spenderpulmonalarterie, um eine End-to-End-Anastomose durchzuführen.

Ligate die Manschette mit den Rillen auf der Oberfläche durch eine 10-0 chirurgische Naht, um die Anastomose zu fixieren. Verwenden Sie ein ähnliches Verfahren für die End-to-End-Anastomose der Spenderaorta zur Empfänger-Halsschlagader. Lassen Sie die atraumatische mikrovaskuläre Klemme der Halsvene los, gefolgt von der Halsschlagader, um das Herz des Spenders zu reperfundieren.

Fixieren Sie das Herztransplantat und nähen Sie es richtig, um ein Verdrehen des Transplantats zu verhindern. Schließen Sie den zervikalen Schnitt mit durchgehenden Nähten mit einer 5-0-Polyamid-Monofilamentnaht. Unter Verwendung dieses zervikalen heterotopen Herztransplantationsmodells der Maus betrug die Überlebensrate der Empfängermäuse etwa 95,2%. Alle kardialen Allotransplantate gingen innerhalb von acht Tagen nach der Transplantation verloren.

Im Gegensatz dazu überlebten alle isogenen Herztransplantationen mehr als vier Wochen. Rillen und Manschette zur besseren Fixierung der umgestülpten Gefäße, wodurch eine wiederholte Betätigung der Gefäße vermieden wird. Die modifizierte Manschettenmethode für die Gefäßanastomose in dieser Operation ist auch für eine andere Anastomose in verschiedenen Organtransplantationstiermodellen anwendbar.