Eine minimal-invasive, schnelle laterale Hemisektionstechnik des Rückenmarks zur Modellierung offener Rückenmarksverletzungen bei Ratten

Dieses Protokoll ist von Bedeutung, da Rückenmarksverletzungen auch heute noch weit verbreitet sind und Forschung erforderlich ist, um das Verständnis dieser Verletzungen zu verbessern und mögliche Therapien zu entwickeln. Diese Technik ist genauer und reproduzierbarer als Kompressions- und Prellungsverletzungen und weniger invasiv als Verletzungen mit vollständiger Laminektomie. Es könnte also eine bessere Option für eine Simulation von Rückenmarksverletzungen sein als zuvor beschriebene Verfahren.

Verwenden Sie zunächst eine Skalpellklinge 20, um das Operationsgebiet zu öffnen, indem Sie einen zwei bis 2,5 Zentimeter langen Schnitt durch alle Hautschichten entlang der Wirbelsäule setzen. Positionieren Sie diesen Schnitt parallel zur Wirbelsäule mit dem L1-Wirbel als Mittelpunkt und verlängern Sie ihn um etwa einen Zentimeter sowohl in Schädel- als auch in Kuschelrichtung entlang der Wirbelsäule. Mobilisieren Sie die Seiten der Wunde, indem Sie das Bindegewebe durchschneiden, das die Muskeln umgibt.

Platzieren Sie dann zwei parallele Schnitte entlang der Wirbelsäule, die in die Knochenhaut eindringen. Platzieren Sie die Schnitte direkt neben den Wirbelsäulenfortsätzen auf beiden Seiten und überbrücken Sie den Abstand zwischen den Brustwirbeln 13 und L1. Sezieren Sie die an den Wirbeln befestigten Muskeln mit der Acht eines Beatmungsgeräts, bis alle Wirbelsäulenbänder sichtbar sind.

Platzieren Sie einen Retraktor. Entfernen Sie dann die Wirbelsäulenfortsätze des 13. Brustwirbels und des ersten Lendenwirbels, um mit einer Zahnknochenzange das gesamte Operationsgebiet zu visualisieren. Verwenden Sie bei Bedarf sterile Gaze, um Blutungen während des gesamten Eingriffs zu kontrollieren.

Heben Sie vorsichtig den Rest der L1-Wirbelsäulenfortsätze an und heben Sie den L1-Wirbelbogen an. Entfernen Sie das Ligamentum flavum, um Zugang zum Rückenmark zu erhalten. Heben Sie die verhätschelten Wirbelsäulenfortsätze weiter an, um den Zugang zur durchtrennten Dura mater der Wirbelsäule zu ermöglichen.

Kippen Sie die verhätschelten Wirbelsäulenfortsätze in kraniale Richtung, um die Pia Mater zu visualisieren. Suchen Sie durch die Pia mater nach der hinteren Medianvene, die die Mittellinie der Wirbelsäule zeigt. Verwenden Sie die Vene als gerichtete Winkelhalbierende, und setzen Sie einen Schnitt mit einem mikrochirurgischen Skalpell, während Sie die Vene schonen.

Platzieren Sie den Schnitt unter der Vene in der Transversalebene durch den vorderen hinteren Durchmesser des Rückenmarks. Führen Sie die Hemisektion durch, indem Sie die Klinge seitlich von der Mittellinie wegbewegen. Platzieren Sie den Schnitt, um eine Durchtrennung der vorderen Spinalarterie zu vermeiden.

Achten Sie darauf, dass beim Durchtrennen des Rückenmarks kein übermäßiger Druck auf den Wirbelkörper ausgeübt wird, um die vordere Rückenmarksarterie auf der ventralen Seite des Rückenmarks zu schonen. Verschließen Sie die Dura mater nicht direkt während des Wundverschlusses. Vernähen Sie die Muskeln und Wirbelsäulenfortsätze fest und verschließen Sie indirekt die kleine Wunde an der Dura mater.

Verschließen Sie die dorsale Bindegewebsschicht mit Nähten. Diese neue minimalinvasive Methode der Rückenmarksverletzung wird viel schneller durchgeführt als der traditionelle chirurgische Ansatz mittels Laminektomie und erfordert keine zusätzlichen Spezialinstrumente. Hämatoxylin- und Eosin-Färbung wurden verwendet, um die Verletzungsstelle sichtbar zu machen.

Andere Abschnitte können entlang des Rückenmarks durchgeführt werden, um bestimmte neuronale Verletzungen nachzuahmen. Auch die Regeneration kann untersucht werden, da mit dieser Methode Elektroden oder Stammzellen platziert werden können. Die meisten Techniken, bei denen offene Wundmodelle für Rückenmarksverletzungen verwendet werden, die entweder eine Hemisektion oder eine Transaktion beinhalten, können mit dieser Technik vereinfacht und beschleunigt werden.