Name: Im lebenden Organismus Bildgebung zur Messung der spontanen Lungenmetastasierung von orthotopisch injizierten Brusttumorzellen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-06-23T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 36 s
Description: Lernen Sie die Bildgebung spontaner Lungenmetastasen orthotopisch injizierter Brusttumorzellen. Diese Methode ermöglicht Echtzeit-Monitoring mittels Biolumineszenz und die Evaluation therapeutischer Interventionen im neoadjuvanten Setting.

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<ol><li>Gupta, G. P., Massague, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+metastasis%3A+Building+a+framework%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Cancer metastasis: Building a framework.</a> Cell. 127 (4), 679-695 (2006).</li>
<li>Bos, P. D., Nguyen, D. X., Massagué, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+metastasis+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Modeling metastasis in the mouse.</a> Current Opinion in Pharmacology. 10 (5), 571-577 (2010).</li>
<li>Francia, G., Cruz-Munoz, W., Man, S., Xu, P., Kerbel, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+advanced+spontaneous+metastasis+for+experimental+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cancer%22%5BJournal%5D)">Mouse models of advanced spontaneous metastasis for experimental therapeutics.</a> Nature Reviews Cancer. 11 (2), 135-141 (2011).</li>
<li>Gómez-Cuadrado, L., Tracey, N., Ma, R., Qian, B., Brunton, V. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+metastasis%3A+Progress+and+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Mouse models of metastasis: Progress and prospects.</a> Disease Models & Mechanisms. 10 (9), 1061-1074 (2017).</li>
<li>Husemann, Y., Klein, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+analysis+of+metastasis+in+transgenic+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Transgenic+Research%22%5BJournal%5D)">The analysis of metastasis in transgenic mouse models.</a> Transgenic Research. 18 (1), 1-5 (2009).</li>
<li>Klein, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parallel+progression+of+primary+tumours+and+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cancer%22%5BJournal%5D)">Parallel progression of primary tumours and metastases.</a> Nature Reviews Cancer. 9 (4), 302-312 (2009).</li>
<li>Pantel, K., Brakenhoff, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+the+metastatic+cascade%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cancer%22%5BJournal%5D)">Dissecting the metastatic cascade.</a> Nature Reviews Cancer. 4 (6), 448-456 (2004).</li>
<li>Sosa, M. S., Bragado, P., Aguirre-Ghiso, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+disseminated+cancer+cell+dormancy%3A+An+awakening+field%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cancer%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of disseminated cancer cell dormancy: An awakening field.</a> Nature Reviews Cancer. 14 (9), 611-622 (2014).</li>
<li>Biswas, A. K., Acharyya, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+cachexia+in+the+context+of+metastatic+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cancer%22%5BJournal%5D)">Understanding cachexia in the context of metastatic progression.</a> Nature Reviews Cancer. 20 (5), 274-284 (2020).</li>
<li>Liu, Y., Cao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characteristics+and+significance+of+the+pre-metastatic+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Characteristics and significance of the pre-metastatic niche.</a> Cancer Cell. 30 (5), 668-681 (2016).</li>
<li>Peinado, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-metastatic+niches%3A+Organ-specific+homes+for+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cancer%22%5BJournal%5D)">Pre-metastatic niches: Organ-specific homes for metastases.</a> Nature Reviews Cancer. 17 (5), 302-317 (2017).</li>
<li>Psaila, B., Lyden, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+metastatic+niche%3A+Adapting+the+foreign+soil%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cancer%22%5BJournal%5D)">The metastatic niche: Adapting the foreign soil.</a> Nature Reviews Cancer. 9 (4), 285-293 (2009).</li>
<li>Clark, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulatory+T+cells+support+breast+cancer+progression+by+opposing+IFN-%CE%B3-dependent+functional+reprogramming+of+myeloid+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Regulatory T cells support breast cancer progression by opposing IFN-γ-dependent functional reprogramming of myeloid cells.</a> Cell Reports. 33 (10), 108482(2020).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+efficacy+of+neoadjuvant+compared+to+adjuvant+immunotherapy+to+eradicate+metastatic+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discovery%22%5BJournal%5D)">Improved efficacy of neoadjuvant compared to adjuvant immunotherapy to eradicate metastatic disease.</a> Cancer Discovery. 6 (12), 1382-1399 (2016).</li>
<li>Thompson, A. M., Moulder-Thompson, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neoadjuvant+treatment+of+breast+cancer.+Annals+of+Oncology%5BTitle%5D)+AND+%22Official+Journal+of+the+European+Society+for+Medical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Neoadjuvant treatment of breast cancer. Annals of Oncology.</a> Official Journal of the European Society for Medical Oncology. 23, Suppl10 231-236 (2012).</li>
<li>Serganova, I., Blasberg, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging+with+reporter+genes%3A+Has+its+promise+been+delivered%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nuclear+Medicine%3A+Official+Publication%2C+Society+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging with reporter genes: Has its promise been delivered.</a> Journal of Nuclear Medicine: Official Publication, Society of Nuclear Medicine. 60 (12), 1665-1681 (2019).</li>
<li>Grzelak, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elimination+of+fluorescent+protein+immunogenicity+permits+modeling+of+metastasis+in+immune-competent+settings%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Elimination of fluorescent protein immunogenicity permits modeling of metastasis in immune-competent settings.</a> Cancer Cell. 40 (1), 1-2 (2022).</li>
<li>Valiente, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+metastasis+cell+lines+panel%3A+A+public+resource+of+organotropic+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Brain metastasis cell lines panel: A public resource of organotropic cell lines.</a> Cancer Research. 80 (20), 4314-4323 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,25 % Trypsin/</td><td>EDTA-Hyklon</td><td>SH30042.01</td><td></td></tr><tr><td>1,5 ml Mikrozentrifugenröhrchen</td><td>USA Scientific</td><td>1615-5500</td><td></td></tr><tr><td>10 % Povidon-Jod-Lösung</td><td>Medline</td><td>MDS093906</td><td></td></tr><tr><td>15 ml Zentrifugenröhrchen</td><td>VWR</td><td>89039-666</td><td></td></tr><tr><td>1X PBS</td><td>Hyclone</td><td>SH30256.01</td><td></td></tr><tr><td>28 G 0,5 ml U-100 Insulinspritze</td><td>BD Biosciences</td><td>329461</td><td></td></tr><tr><td>Amphotericin B</td><td>Gemini Bio-products</td><td>400-104</td><td></td></tr><tr><td>Cautery Kit</td><td>Braintree</td><td>Scientific DEL2</td><td></td></tr><tr><td>D-Luciferin Kalium</td><td>SydLabs</td><td>MB102</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Koptec</td><td>V1001</td><td></td></tr><tr><td>Fötales Rinderserum</td><td>R& D Systems</td><td>S11150H</td><td></td></tr><tr><td>Pinzette</td><td>Fisherbrand</td><td>16-100-110</td><td></td></tr><tr><td>Wachstumsfaktor-reduziertes Matrigel</td><td>Corning</td><td>354230</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Covetus</td><td>29405</td><td></td></tr><tr><td>IVIS Spectrum 200</td><td>Perkin Elmer</td><td>124262</td><td></td></tr><tr><td>Meloxicam (2mg/ml)</td><td>Zoopharm LLC</td><td>N/A</td><td>Auf tierärztliche Verschreibung</td></tr><tr><td>Penicillin/Streptomycin</td><td>Gemini Bio-products</td><td>400-109</td><td></td></tr><tr><td>RPMI1640</td><td>Hyclone</td><td>SH30027.01</td><td></td></tr><tr><td>Schere</td><td>Miltex</td><td>5-300</td><td></td></tr><tr><td>Seidennähte</td><td>Braintree Scientific</td><td>SUT-S 103</td><td></td></tr><tr><td>Chirurgische Klammern</td><td>Reflex7</td><td>203-1000</td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blue</td><td>Gibco</td><td>15250-061</td><td></td></tr></tbody></table>

im lebenden organismus bildgebung zur messung der spontanen lungenmetastasierung von orthotopisch injizierten brusttumorzellen

In Vivo Imaging to Measure Spontaneous Lung Metastasis of Orthotopically-injected Breast Tumor Cells

Die orthotope Injektion von Maus-Krebszelllinien in das 4. Brustfettpolster von Mäusen ist ein reproduzierbares und zuverlässiges Verfahren zur Induktion von Maus-Primärtumoren. Unter Verwendung der EO771-Zelllinie, die unter den in diesem Protokoll beschriebenen Bedingungen mit Luciferase transduziert wurde, werden Primärtumoren tastbar und können etwa 7 Tage nach der Injektion mit Messschiebern gemessen werden und erreichen etwa 14 Tage nach der ersten Injektion ein Volumen von etwa 150mm3 (<strong class="xf...

Im lebenden Organismus Bildgebung zur Messung der spontanen Lungenmetastasierung von orthotopisch injizierten Brusttumorzellen

Metastasis remains the primary cause of cancer-related death. The succession of events that characterize the metastatic cascade presents multiple ...

in-vivo-imaging-to-measure-spontaneous-lung-metastasis-orthotopically

Research

Forschung

JoVE Journal

Cancer Research

Krebsforschung

Orthotopen Tiermodellen von Eierstockkrebs zu replizieren besser menschlicher Erkrankungen und damit zu unserem Verständnis der Tumorprogression und Ansprechen des Tumors auf die Therapie. Ein Maus-Modell erhält eine intrabursalen Injektion von Luciferase-exprimierenden Eierstock-Tumorzellen. Die Behandlung erfolgt über eine orale Sonde verabreicht. Das Tumorwachstum wird durch...

In-vivo-Imaging und therapeutische Behandlungen in einem orthotopen Mausmodell des Eierstockkrebs

Einem orthotopen Modell des seröse Ovarialkarzinom in immunkompetenten Mäusen für In vivo Tumor Imaging und Überwachung der Tumor Immunantworten

Biolumineszenz-Bildgebung des Hypoxie-induzierbaren Faktors-1α Aktivität wird angewandt, um intrakranielle Tumorhypoxie Entwicklung in einer Brustkrebs Hirnmetastasen Mausmodell zu überwachen.

In-vivo-Biolumineszenz-Bildgebung von Tumorhypoxie Dynamics of Breast Cancer Hirnmetastasen in einem Mausmodell

Das erfindungsgemäße Protokoll in der vorliegenden Studie berichtet ermöglicht selektiven Nachweis von Lungenmetastasen in einzelne Zelle Auflösung in Mäusen durch...

Verbesserte Visualisierung von Lungenmetastasen bei Single Cell Auflösung in Mäusen durch kombinierte<em&gt; In-situ</em&gt; Perfusion des Lungengewebes und X-Gal Färbung von<em&gt; LacZ</em&gt;-Tagged Tumor Cells

Wir beschreiben ein Verfahren zur Abbildung als Reaktion auf...

Live-Imaging of Drug Responses in der Tumor-Mikroumgebung in Mausmodellen von Brustkrebs

Krebs ist eine komplexe Erkrankung, die durch den den Tumor umgebenden Gewebes sowie lokale pro- und anti-inflammatorischen Mediatoren beeinflusst wird. Daher kann orthotrope Pritzer, anstatt subkutanen Modellen nützlich sein, um Krebsprogression in einer Weise, dass eine bessere ahmt menschlichen Pathologie studieren.

Orthotopische Injektion von Brustkrebszellen in das Brustfettpolster von Mäusen, das Tumorwachstum zu studieren.

Dieses Protokoll beschreibt die quantitative Echtzeit-PCR (QRT-PCR) verwenden, um Tumorzellen spezifische mRNA, die Metastasen in der Maus Lungengewebe zu erkennen.

Beurteilung von Lungenmetastasen in Maus-Mammatumormodelle durch quantitative Echtzeit-PCR

Wir beschreiben ein relativ einfaches Verfahren zur ex vivo Echtzeit-Bildgebung der Tumorzell Stroma Wechselwirkungen innerhalb Lungenmetastasen unter Verwendung fluoreszierenden Reportern in Mäusen. Verwendung von Spinnplatten konfokale Mikroskopie, ermöglicht diese Technik Visualisierung von lebenden Zellen für mindestens 4 h und angepasst werden könnten andere entzündliche Lungenerkrankungen zu untersuchen.

Ex-vivo-Live-Imaging von Lungenmetastasen und deren Mikromilieu

Hier präsentieren wir Ihnen ein Protokoll zur Brustkrebs-Zellen in der Mamma Fettpolster in einer einfachen, weniger invasiv und einfach zu handhabende Möglichkeit, einzupflanzen und dieses orthotopen Brust Krebs Mausmodell mit einer richtigen Mamma Fettlappen Umgebung kann verwendet werden, um verschiedene Aspekte zu untersuchen Krebs.

Orthotopen Injektion von Brustkrebs-Zellen in den Mäusen Mamma Fettlappen

Diese Arbeit setzt ein fortschrittliches Protokoll vor, um die Tumorbelastung durch den Nachweis von grünen Fluoreszenzprotein- und Biolumineszenzsignalen sowie die Integration quantitativer molekularer Detektionstechniken genau zu bewerten.

Studieren von dreifach negativem Brustkrebs mit orthotopischem Brustkrebsmodell

Der beschriebene Ansatz kombiniert experimentelle Schwanzvenenmetastasierungs-Assays mit in vivo Live-Tier-Imaging, um neben der Quantifizierung der Metastasenzahl und -größe in der Lunge auch die Echtzeit-Überwachung der Bildung und des Wachstums von Brustkrebsmetastasen zu ermöglichen.

Kombinierte Verwendung von Tail Vein Metastasis Assays und Real-Time In Vivo Imaging zur Quantifizierung der metastasierenden Kolonisation und Belastung von Brustkrebs in der Lunge

Lernen Sie die Bildgebung spontaner Lungenmetastasen orthotopisch injizierter Brusttumorzellen. Diese Methode ermöglicht Echtzeit-Monitoring mittels Biolumineszenz und die Evaluation therapeutischer Interventionen im neoadjuvanten Setting.

Im lebenden Organismus Bildgebung zur Messung der spontanen Lungenmetastasierung von orthotopisch injizierten Brusttumorzellen

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