<em>In Vivo</em> Vascular Permeability Detection in Mouse Submandibular Gland

Xiangdi Mao; Sainan Min; Qihua He; Xin Cong

doi:10.3791/64167

Im lebenden Organismus Nachweis der vaskulären Permeabilität in der submandibulären Drüs...

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Biology

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In Vivo Vascular Permeability Detection in Mouse Submandibular Gland

Im lebenden Organismus Nachweis der vaskulären Permeabilität in der submandibulären Drüse der Maus

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07:10 min

August 4, 2022

DOI: 10.3791/64167-v

Xiangdi Mao¹, Sainan Min², Qihua He³, Xin Cong¹

¹Department of Physiology and Pathophysiology, Peking University School of Basic Medical Sciences, Key Laboratory of Molecular Cardiovascular Sciences,Ministry of Education, and Beijing Key Laboratory of Cardiovascular Receptors Research, ²Department of Oral and Maxillofacial Surgery,Peking University School and Hospital of Stomatology & National Center of Stomatology & National Clinical Reseah Center for Oral Diseases & National Engineering Research Center of Oral Biomaterials and Digital Medical Devices, ³State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs,Peking University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study evaluates the endothelial barrier function of the submandibular gland (SMG) using in vivo imaging techniques. Fluorescent tracers of varying molecular weights were injected into test animal models, demonstrating how molecular permeability can be assessed using two-photon laser scanning microscopy.

Key Study Components

Research Area

Endothelial barrier function
Vascular permeability studies
Fluorescent tracer application

Background

Importance of tight junctions in endothelial cells
Non-invasive imaging methods for tissue analysis
The role of submandibular glands in vascular studies

Methods Used

In vivo paracellular permeability detection
Mouse submandibular glands
Two-photon laser scanning microscopy

Main Results

Demonstrated varying leakage of fluorescent tracers based on molecular weight
Identified disruptions in endothelial barrier integrity due to duct ligation
Validated findings through fluorescence intensity quantification

Conclusions

The method provides insights into endothelial barrier function in tissues
Enhances understanding of vascular permeability related to physiological and pathological conditions

Frequently Asked Questions

What is the purpose of using different molecular weight tracers?

Using tracers of different molecular weights allows for assessing the permeability of tight junctions in endothelial cells.

How does two-photon laser scanning microscopy improve imaging?

This method enables deeper tissue imaging with less scattering compared to conventional techniques, providing clearer images.

What effects were observed when duct ligation was performed?

Duct ligation increased permeability, allowing larger molecular tracers to leak out, indicating a disruption in the endothelial barrier.

Why is proper SMG isolation critical in this protocol?

Careful isolation is essential to minimize artifacts and ensure accurate imaging and permeability assessments.

What are the applications of this imaging technique?

This technique can be applied to study vascular diseases, drug delivery systems, and tissue engineering.

What does the study reveal about vascular permeability in the SMG?

The findings provide a new understanding of how the SMG's endothelial barrier behaves under physiological challenges.

Im vorliegenden Protokoll wurde die endotheliale Barrierefunktion der submandibulären Drüse (SMG) durch Injektion verschiedener molekulargewichteter Fluoreszenztracer in die Winkelvenen von Versuchstiermodellen in vivo unter einem Zwei-Photonen-Laser-Scanning-Mikroskop bewertet.

Das vorliegende Protokoll beschreibt ein in vivo parazelluläres Permeabilitätsnachweismaß zur Bewertung der Funktion enger endothelialer Verbindungen in submandibulären Drüsen der Maus. Die Zwei-Photonen-Laser-Scanning-Mikroskopie hat jedoch nicht nur den Vorteil der konventionellen konfokalen Mikroskopie, sondern kann auch verwendet werden, um tieferes Gewebe zu erkennen und klarer abzubilden. Dieses Experiment bietet ein gutes methodisches Maß zur Beurteilung der vaskulären Permeabilität verschiedener Gewebe, insbesondere der Oberflächengewebe und Organe von Tieren.

Beginnen Sie mit der Auswahl geeigneter Tracer wie Fluorescein, Isothiocyanat, markiertem Dextran und Rhodamin B, markiertem Dextran mit ausgeprägten Anregungsemissionsspektren, um die Interferenz zwischen Fluoreszenzsignalen für den Permeabilitätstest zu minimieren. Verdünnen Sie die Spuren zu steriler phosphatgepufferter Kochsalzlösung in 100 Milligramm pro Milliliter und lagern Sie die vor Licht geschützten Aliquots bei minus 20 Grad Celsius. Nach der Betäubung der 8 bis 10 Wochen alten männlichen Wildtyp-Maus halten Sie vorsichtig Kopf und Hals der Maus, damit eine Seite des Augapfels leicht hervorsteht.

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