Name: Ein Calciumphosphat-induziertes Maus-Bauchaortenaneurysma-Modell (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-11-18T13:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 14 s
Description: Erfahren Sie das calciumphosphat-induzierte Bauchaortenaneurysma-Modell bei Mäusen zur Untersuchung pathologischer Merkmale und molekularer Mechanismen. Diese schnelle, kostengünstige Methode nutzt C57BL6J-Mäuse.

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Diese Forschung wurde durch Mittel der National Natural Science Foundation of China (NSFC, 81730010, 91839302, 81921001, 31930056 und 91529203) und des National Key R&D Program of China (2019YFA 0801600) unterstützt.

Tierstudien wurden in Übereinstimmung mit den Richtlinien des Institutional Animal Care and Use Committee des Beijing University Health Science Center durchgeführt und vom Biomedical Ethics Committee der Peking University genehmigt (LA2015142). Alle Mäuse für die Operation wurden mit Isofluran (1,5% -2%) betäubt, und die Anästhesie wurde sorgfältig überwacht, um Schmerzen oder Beschwerden für die Mäuse zu vermeiden.
1. Vorbereitung
<ol><li>Schneiden Sie 0,3 cm breite Streifen aus puderfreien Gummihandschuhen und Gaze.</li>
	<li>Kaufen Sie 8-10 Wochen alte männliche C57BL / 6J-Mäuse. Unterbringung der Tiere in einer klimatisierten Umgebung mit einem 12-stündigen Hell-Dunkel-Zyklus und freiem Zugang zu Futter und Wasser.</li>
	<li>Autoklavieren Sie die Gaze, Wattestäbchen, Schere und Pinzette vor der Operation.</li>
	<li>Erhalten Sie Betadin, 70% Ethanol und antiseptische Handwäsche.</li>
	<li>Ziehen Sie eine Maske, ein Kleid und sterile Handschuhe an.</li>
</ol>2. Chirurgischer Eingriff
<ol><li>Füttern Sie kaubare Carprofen-Tabletten (5 mg/kg Dosis) 2-4 Stunden vor der Operation an eine 8-10 Wochen alte C57BL/6J-Maus. Dann legen Sie die Maus in eine Induktionskammer (206 mm x 210 mm x 140 mm) mit Isofluran bei einer Flussrate von 1,5% -2%.<ol><li>Überwachen Sie die Maus für ca. 5 Minuten, bis die Atmung sichtbar verlangsamt ist. Stellen Sie sicher, dass die Maus vor der Operation nicht auf Schmerzstimulation reagiert.</li>
	</ol></li>
	<li>Tragen Sie eine Augensalbe auf die Augen auf und unterstützen Sie die Wärme mit einem Heizkissen oder einer Decke. Bestätigen Sie die Tiefe der Anästhesie mit einer Zehenklemme alle 15 Minuten während des chirurgischen Eingriffs.</li>
	<li>Rasieren Sie die Bauchhaare der Maus mit einem elektrischen Haarschneider oder einer Haarentfernungscreme. Tupfen und wischen Sie den rasierten Bereich mit Betadin, gefolgt von 70% Ethanol, mehrmals in kreisenden Bewegungen ab. Wechseln Sie die Handschuhe, um die Sterilität zu erhalten.</li>
	<li>Verwenden Sie eine Schere, um einen ~ 1,5 cm langen Schnitt am Unterbauch entlang der Mittellinie des Bauches zu machen.</li>
	<li>Verwenden Sie ein steriles, mit normaler Kochsalzlösung angefeuchtetes Wattestäbchen, um den Darm vorsichtig zu entfernen, bis die infrarenale Aorta sichtbar ist.</li>
	<li>Sezieren Sie das Bindegewebe und das Fett aus der infrarenalen Aorta für einen etwa 0,5 cm langen Abschnitt. Beachten Sie die kleinen Gefäße auf der Rückenseite und vermeiden Sie es, sie zu reißen. Es besteht keine Notwendigkeit, die Bauchaorta von der Bauchhauptvene zu trennen.</li>
	<li>Packen Sie ein Stück des mit Kochsalzlösung getränkten Gummihandschuhstreifens unter die Bauchaorta und die Bauchhauptvene. Verwenden Sie ein Wattestäbchen, um überschüssige Flüssigkeit abzuwischen.</li>
	<li>Packen Sie ein mit 0,5 M CaCl2 getränktes Stück Gaze auf die Adventitia des infrarenalen Bauchgefäßsystems für 10 min. Für die Scheinmausgruppe ersetzen Sie die 0,5 M CaCl2 durch normale Kochsalzlösung.</li>
	<li>Entfernen Sie die Gaze und packen Sie ein weiteres mit PBS-Lösung getränktes Stück Gaze für 5 min ein, um CaPO4-Kristalle in situ in der Adventitia der Aorta zu erzeugen.</li>
	<li>Entfernen Sie vorsichtig den Gummihandschuhstreifen und die Gaze. Setzen Sie den Darmtrakt der Maus zurück.</li>
	<li>Nähen Sie den Bauchschnitt und die Haut mit einer 5-0-Naht.</li>
	<li>Legen Sie die Maus auf ein Heizkissen, bis die Maus wieder zu Bewusstsein kommt. Bereitstellung von postoperativen Schmerzerholungsunterkünften und Analgesie, so die lokale Tierethikkommission.</li>
	<li>Beherbergen Sie die Maus für weitere 14 Tage. Überwachen Sie die Maus nach der Operation genau und beobachten Sie danach mindestens 1x täglich. Führen Sie sofort eine Nekropsie durch, wenn während dieser Zeit Mäuse sterben.</li>
</ol>3. Harvesting für die Bildgebung von Aorten
<ol><li>14 Tage nach der Operation opfern Sie die Mäuse mit CO2.</li>
	<li>Schneiden Sie die Brust- und Bauchhöhlen der Maus ventral auf und schneiden Sie den rechten Vorhof auf.</li>
	<li>Perfusion der Mäuse mit PBS-Puffer durch den linken Ventrikel des Herzens, um Blut in der Aorta zu entfernen, und dann Perfusion mit 4% Paraformaldehyd, wie zuvor beschrieben8.</li>
	<li>Ernten Sie die Aorta unter dem Stereoskop.</li>
	<li>Die geernteten Aorten für 48 h in Röhrchen mit 5 ml 4% Paraformaldehyd geben.</li>
	<li>Entfernen Sie Adventivgewebe und Fett vorsichtig unter dem Stereoskop und stecken Sie die Aorta mit Insektennadeln auf eine schwarze Wachsplatte.</li>
	<li>Erfassen Sie Aortenbilder.</li>
</ol>4. Bewertung des Abbaus der elastischen Fasern
<ol><li>Schneiden Sie das Aortenaneurysmagewebe in serielle Kryosektionen (7 μm dick).</li>
	<li>Analysieren Sie die elastischen Fasern mit einem handelsüblichen elastischen van Gieson (EVG) Färbekit gemäß dem Protokoll des Herstellers.</li>
	<li>Gradieren Sie den Elastinabbau. Grad 1: <25% Abbau; Grad 2: 25% bis 50% Abbau; Grad 3: 50% bis 75% Abbau; oder Grad 4: >75% Abbau.</li>
</ol>

<ol><li>Kent, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abdominal+aortic+aneurysms%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Abdominal aortic aneurysms.</a> The New England Journal of Medicine. 371, 2101-2108 (2014).</li>
<li>Patelis, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+in+the+research+of+abdominal+aortic+aneurysms+development%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Research%22%5BJournal%5D)">Animal models in the research of abdominal aortic aneurysms development.</a> Physiological Research. 66 (6), 899-915 (2017).</li>
<li>Gertz, S. D., Kurgan, A., Eisenberg, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aneurysm+of+the+rabbit+common+carotid+artery+induced+by+periarterial+application+of+calcium-chloride+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Aneurysm of the rabbit common carotid artery induced by periarterial application of calcium-chloride in vivo.</a> Journal of Clinical Investigation. 81 (3), 649-656 (1988).</li>
<li>Yamanouchi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+aneurysmal+dilation+associated+with+apoptosis+and+inflammation+in+a+newly+developed+calcium+phosphate+rodent+abdominal+aortic+aneurysm+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Accelerated aneurysmal dilation associated with apoptosis and inflammation in a newly developed calcium phosphate rodent abdominal aortic aneurysm model.</a> Journal of Vascular Surgery. 56 (2), 455-461 (2012).</li>
<li>Wang, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+apolipoprotein+E%2C+age+and+aortic+site+on+calcium+phosphate+induced+abdominal+aortic+aneurysm+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Influence of apolipoprotein E, age and aortic site on calcium phosphate induced abdominal aortic aneurysm in mice.</a> Atherosclerosis. 235 (1), 204-212 (2014).</li>
<li>Zhao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unspliced+xbp1+confers+VSMC+homeostasis+and+prevents+aortic+aneurysm+formation+via+foxo4+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Unspliced xbp1 confers VSMC homeostasis and prevents aortic aneurysm formation via foxo4 interaction.</a> Circulation Research. 121 (12), 1331-1345 (2017).</li>
<li>Jia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+macrophage+TFEB-14-3-3+epsilon+interface+by+naringenin+inhibits+abdominal+aortic+aneurysm%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Discovery%22%5BJournal%5D)">Targeting macrophage TFEB-14-3-3 epsilon interface by naringenin inhibits abdominal aortic aneurysm.</a> Cell Discovery. 8 (1), 21(2022).</li>
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<li>Yu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CYLD+deubiquitinates+nicotinamide+adenine+dinucleotide+phosphate+oxidase+4+contributing+to+adventitial+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">CYLD deubiquitinates nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4 contributing to adventitial remodeling.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (8), 1698-1709 (2017).</li>
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<li>Tanaka, T., Takei, Y., Yamanouchi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperglycemia+suppresses+calcium+phosphate-induced+aneurysm+formation+through+inhibition+of+macrophage+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Hyperglycemia suppresses calcium phosphate-induced aneurysm formation through inhibition of macrophage activation.</a> Journal of the American Heart Association. 5 (3), 003062(2016).</li>
<li>Lu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subcutaneous+angiotensin+II+infusion+using+osmotic+pumps+induces+aortic+aneurysms+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Subcutaneous angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (103), e53191(2015).</li>
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<li>Li, Z. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Runx2+%28runt-related+transcription+factor+2%29-mediated+microcalcification+is+a+novel+pathological+characteristic+and+potential+mediator+of+abdominal+aortic+aneurysm%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">Runx2 (runt-related transcription factor 2)-mediated microcalcification is a novel pathological characteristic and potential mediator of abdominal aortic aneurysm.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 40 (5), 1352-1369 (2020).</li>
<li>Kelly, M. J., Igari, K., Yamanouchi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteoclast-like+cells+in+aneurysmal+disease+exhibit+an+enhanced+proteolytic+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Osteoclast-like cells in aneurysmal disease exhibit an enhanced proteolytic phenotype.</a> International Journal of Molecular Sciences. 20 (19), 4689(2019).</li>
</ol>

Die periaortische Anwendung von CaPO4 ist ein robuster Ansatz zur Induktion von AAA bei Mäusen. Mehrere Studien haben das CaPO4-Modell verwendet und übereinstimmend berichtet, dass dies eine schnelle und reproduzierbare Methode ist, um AAA bei Mäusen 7,9 zu untersuchen. Dieses Modell rekapituliert einen Teil der Merkmale des menschlichen Aortenaneurysmas und liefert mechanistische Einblicke in die AAA-Pathogenese, einschließlich Entzündung u...

Ein Bauchaortenaneurysma (AAA) ist eine tödliche kardiovaskuläre Erkrankung, die durch eine dauerhafte Erweiterung der Bauchaorta gekennzeichnet ist, mit hohen Sterblichkeitsraten nach einer Ruptur. AAA ist mit Alterung, Rauchen, männlichem Geschlecht, Bluthochdruck und Hyperlipidämieassoziiert 1. Es wurde gezeigt, dass mehrere pathologische Prozesse zur AAA-Bildung beitragen, einschließlich extrazellulärer Matrixfaserproteolyse, Immunzellinfiltration und Verlust von vaskulären glatten Muskelzellen. Derzeit sind die pathologischen Mechanismen von AAA schwer fassbar, und es gibt keine bewährten Medikamente zur Behandlung von AAA1. Die Erforschung der menschlichen AAA ist aufgrund der Existenz weniger menschlicher Aortenproben begrenzt; Daher wurden mehrere chemische Modifikationsinduzierte tierische AAA-Modelle etabliert und weit verbreitet, einschließlich subkutaner Angiotensin II (AngII) -Infusion, perivaskulärer oder intraluminaler Elastase-Inkubation und perivaskulärer Calciumphosphatanwendung2. Ein häufig verwendetes Mausmodell ist die Anwendung von Calciumphosphat (CaPO4) auf die Adventitia der infrarenalen Bauchaorta, die kostengünstig ist und keine genetische Veränderung erfordert.
Die direkte periaortale Applikation von CaCl2 auf die Halsschlagader von Kaninchen zur Induktion einer aneurysmatischen Veränderung wurde ursprünglich von Gertz et al.3 berichtet und später auf die Bauchaorten von Mäusen angewendet. Das Modell wurde von Yamanouchi et al. entwickelt, um die Aortendilatation unter Verwendung von CaPO 4-Kristallen in Mäusenzu beschleunigen4. Die Infiltration von CaPO4 in die Aorten von Mäusen rekapituliert viele pathologische Merkmale, die bei menschlichen AAAs beobachtet wurden, einschließlich tiefgreifender Makrophageninfiltration, extrazellulärem Matrixabbau und Kalziumablagerung. Die Risikofaktoren für menschliche AAA, wie Hyperlipidämie, erhöhen auch CaPO 4-induzierte AAA bei Mäusen5. Im Gegensatz zu AngII-perfusionsinduzierter AAA bei ApoE-/- oder LDLR-/- Mäusen tritt CaPO 4-induzierte AAA in der infrarenalen Aortenregion auf, die menschliche AAA nachahmt. Derzeit wird diese Methode häufig angewendet, um die Anfälligkeit für die Entwicklung von AAA bei genetisch veränderten Mäusen zu bewerten und die Anti-AAA-Wirkungen von Medikamentenzu bewerten 6,7.

<table><tbody><tr><td>CaCl2</td><td>MECKLIN</td><td>C805225</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Biomed</td><td>SH5001-01</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>HARVEYBIO</td><td>MB5051</td><td></td></tr><tr><td>Beatmungsgerät für Kleintiere</td><td>RWD</td><td>H1550501-012</td><td></td></tr></tbody></table>

ein calciumphosphat-induziertes maus-bauchaortenaneurysma-modell

A Calcium Phosphate-Induced Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model

Ein Bauchaortenaneurysma (AAA) ist eine lebensbedrohliche Herz-Kreislauf-Erkrankung, die weltweit auftritt und durch eine irreversible Erweiterung der Bauchaorta gekennzeichnet ist. Derzeit werden mehrere chemisch induzierte murine AAA-Modelle verwendet, die jeweils einen anderen Aspekt der Pathogenese von AAA simulieren. Das Calciumphosphat-induzierte AAA-Modell ist ein schnelles und kostengünstiges Modell im Vergleich zu den Angiotensin-II- und Elastase-induzierten AAA-Modellen. Die Anwendung von CaPO4-Kristallen auf die Aorta der Maus führt zu elastischem Faserabbau, Verlust glatter Muskelzellen, Entzündungen und Kalziumablagerungen im Zusammenhang mit Aortendilatation. In diesem Artikel wird ein Standardprotokoll für das CaPO 4-induzierte AAA-Modell vorgestellt. Das Protokoll umfasst die Materialvorbereitung, die chirurgische Anwendung des CaPO4 auf die Adventitia der infrarenalen Bauchaorta, die Entnahme von Aorten zur Visualisierung von Aortenaneurysmen und histologische Analysen an Mäusen.

14 Tage nach der Anwendung von CaPO4 wurden die männlichen C57BL/6J-Mäuse eingeschläfert und ihre Aorten geerntet und gereinigt. Die Morphologie der Aorten wurde abgebildet, um die AAA-Bildung zu visualisieren. Wie in Abbildung 1A-B gezeigt, führte die Anwendung von CaPO4 zu einer Erweiterung der infrarenalen Bauchaorta. Histologisch führte CaPO4 zu einem dramatischen Abbau elastischer Fasern, wie Elastinbrüche zeigen (<stron...

Dieses Protokoll beschreibt ein Calciumphosphat-induziertes Bauchaortenaneurysma (AAA) Mausmodell, um die pathologischen Merkmale und molekularen Mechanismen von AAAs zu untersuchen.

Ein Calciumphosphat-induziertes Maus-Bauchaortenaneurysma-Modell

An abdominal aortic aneurysm (AAA) is a life-threatening cardiovascular disease that occurs worldwide and is characterized by irreversible dilation of the ...

Dieses Protokoll beschreibt das Calciumphosphat-induzierte Bauchaortenaneurysma Triple-A-Mausmodell, um die pathologischen Merkmale in den molekularen Mechanismen des Bauchaortenaneurysmas zu untersuchen. Das Calciumphosphat-induzierte Bauchaortenaneurysma-Modell ist ein schnelles und kostengünstiges Modell im Vergleich zu den Modellen der Angiotensin-Röhre und der Elastase-induzierten Bauchaortenaneurysma. Zeyu Cai, Postdoktor hier, ein Mitarbeiter aus unserem Labor, demonstriert das Verfahren.Zu Beginn schneiden Sie 0,3 Zentimeter breite Streifen aus puderfreien Gummihandschuhen und Gaze. Dann kaufen Sie acht bis zehn Wochen alte C57BL6J Mayo-Mäuse und beherbergen die Tiere in einer klimatisierten Umgebung mit einem 12-stündigen hellen Dunkelzyklus und freiem Zugang zu Nahrung und Wasser. Als nächstes autoklavieren Sie die Gaze, Wattestäbchen, Schere und Pinzette vor der Operation und erhalten Betadin, 70% Ethanol und antiseptische Handwäsche.Rasieren Sie die Bauchhaare der betäubten Maus mit einem elektrischen Haarschneider oder einer Haarentfernungscreme. Dann tupfen und wischen Sie den rasierten Bereich mit Betadin ab, gefolgt von 70% Ethanol mehrmals in kreisenden Bewegungen. Machen Sie dann einen etwa 1,5 Zentimeter großen Schnitt am Unterbauch entlang der Mittellinie des Bauches mit einer Schere.Entfernen Sie den Darm vorsichtig mit einem sterilen Wattestäbchen, das mit normaler Kochsalzlösung angefeuchtet ist, bis die infrarenale Aorta sichtbar ist. Als nächstes sezieren Sie das Bindegewebe und das Fett aus der infrarenalen Aorta für einen etwa 0,5 Zentimeter großen Abschnitt und vermeiden Sie ein Reißen in den kleinen Gefäßen zur dorsalen Seite. Dann packen Sie ein Stück des salzgetränkten Gummihandschuhstreifens unter die Bauchaorta und die Bauchhauptvene, während Sie überschüssige Flüssigkeit mit einem Wattestäbchen abwischen.Danach packen Sie ein Stück Gaze, das mit 0,5 molärem Calciumchlorid getränkt ist, für 10 Minuten auf die Adventitia des infrarenalen Bauchgefäßsystems. Entfernen Sie die Gaze und packen Sie ein weiteres Stück Gaze, das mit PBS-Lösung getränkt ist, für fünf Minuten ein, um Kalziumorthophosphatkristalle in C2 in den Adventitien der Aorta zu erzeugen. Entfernen Sie dann vorsichtig den Gummihandschuhstreifen und die Gaze.Nach dem Zurücksetzen des Darmtraktes der Maus den Bauchschnitt und die Haut mit einer Fünf-Null-Naht nähen. Als nächstes legen Sie die Maus auf ein Heizkissen, bis die Maus wieder zu Bewusstsein kommt. Beherbergen Sie die Maus für weitere 14 Tage und überwachen Sie die Maus nach der Operation genau und beobachten Sie sie mindestens jeden Tag anschließend.Nach 14 Tagen der Operation schneiden Sie die eingeschläferten Brust- und Bauchhöhlen der Maus ventral auf und schneiden Sie den rechten Vorhof auf. Überladen Sie die Mäuse mit PBS-Puffer durch den linken Ventrikel des Herzens, um Blut in der Aorta zu entfernen, und perfusionieren Sie dann mit 4% Paraformaldehyd, wie im Manuskript beschrieben. Entfernen Sie Adventivgewebe und Fett vorsichtig unter einem Stereomikroskop.Dann ernten Sie die Aorta und legen Sie sie für 48 Stunden in ein Röhrchen mit fünf Milliliter 4% Paraformaldehyd. Dann stecken Sie die Aorta mit Insektennadeln auf eine schwarze Wachsplatte und machen Sie Aortenbilder. Nach 14 Tagen Calciumorthophosphat-Applikation wurde die Morphologie der Aorten abgebildet, um die Bildung eines Bauchaortenaneurysmas sichtbar zu machen.Es wurde beobachtet, dass Calciumorthophosphat zu einer Erweiterung der infrarenalen Bauchaorta führte und zu einem dramatischen Abbau elastischer Fasern führte, wie durch Elastinbrüche veranschaulicht. Mit einem sterilen, mit normaler Kochsalzlösung angefeuchteten Wattestäbchen den Darm entfernen, bis die infrarenale Aorta sichtbar ist, und dann das Bindegewebe und das Fett aus der infrarenalen Aorta extrahieren. Insgesamt ist das Calciumphosphorat-induzierte Maus-Bauchaortenaneurysma-Modell ein schneller und kostengünstiger Ansatz zur Erforschung molekularer Mechanismen und der therapeutischen Strategien des Bauchaortenaneurysmas und könnte parallel zu den anderen Modellen angewendet werden, um die Merkmale des menschlichen Bauchaortenaneurysmas vollständig zu imitieren.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Dieses Video zeigt, wie man abdominalen Aortenaneurysmen (AAA) in Mäusen über vorübergehende intraluminale Infusion von Schweine-Pankreas-Elastase in der infrarenalen Segment der abdominalen Aorta induzieren. Das Modell verfügt über die Fähigkeit zur umfassenden Einblick in die Pathobiologie von AAA durch die Entstehung zahlreicher transgenen und Knockout-Mäuse hinzu.

Erstellung von Murine Experimental Bauchaortenaneurysmen mit Elastase

Dieser Artikel beschreibt eine detaillierte Methode mit einem röntgendichten bleihaltigen Silikon-Kautschuk zu das murine Gefäßsystem zur Quantifizierung der Aorta Durchmesser in einem Mausmodell der Aortenaneurysma und Dissektion durchspülen.

Quantitative Micro-CT-Analyse der Aortopathy in einem Mausmodell der β-Aminopropionitrile-induzierte Aortenaneurysma und Dissektion

Dieses neuartige Modell erzeugt robuste infrarote abdominale Aortenaneurysmen bei Schweinen mit einer Kombination aus Ballonangioplastie, Elastase/Kollagennase-Perfusion, topischer Elastase-Anwendung und oraler Verbindung--Aminopropionitril-Verabreichung, die die Kollagenvernetzung stört.

Porcine Modell des Infrarot abdominalen Aortenaneurysmus

Das vorliegende Protokoll beschreibt eine standardisierte chirurgische Methode für das Elastase-induzierte AAA-Modell durch die direkte Anwendung von Elastase auf die Adventitia der infrarenalen abdominalen Aorta bei Mäusen.

Mausmodell für das abdominale Aortenaneurysma, das durch die perivaskuläre Anwendung der Elastase induziert wird

Dieses Manuskript stellt ein Protokoll zur Etablierung eines Modells für ein abdominales Aortenaneurysma der Maus unter Verwendung von Calciumchlorid und Elastase vor, das die Vorteile früherer Modellierungsmethoden kombiniert. Dieses Modell kann verwendet werden, um die pathophysiologischen Mechanismen zu untersuchen, die abdominalen Aortenaneurysmen zugrunde liegen.

Ein Modell eines abdominalen Aortenaneurysmas der Maus durch periadventielle Calciumchlorid- und Elastase-Infiltration

Dieses Protokoll beschreibt einen methodischen chirurgischen Ansatz zur Modellierung fortgeschrittener Bauchaortenaneurysmen bei Mäusen durch eine Kombination aus direkter Applikation von Elastase auf die infrarenale Aorta und Verabreichung von ß-Aminopropionitril über das Trinkwasser.

Fortgeschrittene Modellierung des abdominalen Aortenaneurysmas bei Mäusen durch Kombination von topischer Elastase und oralem ß-Aminopropionitril

Dieses Protokoll bietet eine wiederholbare und zuverlässige Methode zur Induzierung von abdominalen Aortenaneurysmen (AAAs) bei C57BL/6-Mäusen mittels Elastinsensibilisierung und perivaskulärer Elastase-Anwendung als AAA-Modell, das eine Immunsensibilisierungskomponente integriert.

Zuverlässige Erstellung eines murinalen abdominalen Aortenaneurysma-Modells unter Verwendung von Elastinsensibilisierung und perivaskulärer Elastase

Angiogenese ist die Sprossung der Blutgefäße aus bereits bestehenden Gefäßen, mit natürlichen und pathologischen Prozessen assoziiert. Hier zeigen eine Aorten-Ring-Test, dass angiogene Potentiatoren und Inhibitoren direkt an Aortenringen in Kultur hinzugefügt werden können. Sprouting und neovessel Auswuchs kann durch Einsicht in die Aortenringen über einen Zeitraum von 6-12 Tagen bestimmt werden.

Aorten-Ring-Test

Orthotopen Tiermodellen von Eierstockkrebs zu replizieren besser menschlicher Erkrankungen und damit zu unserem Verständnis der Tumorprogression und Ansprechen des Tumors auf die Therapie. Ein Maus-Modell erhält eine intrabursalen Injektion von Luciferase-exprimierenden Eierstock-Tumorzellen. Die Behandlung erfolgt über eine orale Sonde verabreicht. Das Tumorwachstum wird durch...

In-vivo-Imaging und therapeutische Behandlungen in einem orthotopen Mausmodell des Eierstockkrebs

Die vaskulären Endothelzellen spielen eine bedeutende Rolle bei vielen wichtigen Herz-Kreislauf-Erkrankungen. Dieser Artikel beschreibt eine einfache Methode, um Endothelzellen aus der Aorta der Maus zu isolieren und zu erweitern, ohne spezielle Geräte zu verwenden. Unser Protokoll bietet ein wirksames Mittel zur Identifizierung von Mechanismen in der Physiopathologie von Endothelzellen.

Isolation und Primärkultur von Maus Aortic Endothelial Cells

Erfahren Sie das calciumphosphat-induzierte Bauchaortenaneurysma-Modell bei Mäusen zur Untersuchung pathologischer Merkmale und molekularer Mechanismen. Diese schnelle, kostengünstige Methode nutzt C57BL6J-Mäuse.

Ein Calciumphosphat-induziertes Maus-Bauchaortenaneurysma-Modell

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