Etablierung eines einfachen und effektiven Rattenmodells für die intraoperative Bildgebung der Nebenschilddrüse

Nebenschilddrüse ist ein kleines Organ mit sehr wichtigen Funktionen. Unser Protokoll kann für die Entwicklung neuer PG-Identifizierungstechnologien verwendet werden, die Chirurgen helfen können, sie während der Thyreoidektomie bei Schilddrüsenkrebs zu schützen. Der Hauptvorteil dieses Modells besteht darin, dass es durch die negative Bildgebung von IONP einen deutlichen Unterschied zwischen Schilddrüse und PGs beobachten kann.

Darüber hinaus sind die Kosten und die Betriebsschwierigkeiten bei diesem Rattenmodell erheblich geringer als bei großen Tiermodellen. Legen Sie zunächst ein vorgewärmtes Heizkissen auf den OP-Tisch, um die Körpertemperatur des Tieres während der Operation aufrechtzuerhalten, und übertragen Sie dann die anästhesierte Ratte auf einen chirurgischen Vorhang, der auf dem Operationstisch liegt. Befestigen Sie die Gliedmaßen der Ratte mit Gummibändern auf dem Operationstisch und legen Sie ein zylindrisches Kissen aus Tuch unter die Schulter der Ratte, um den Kopf nach hinten zu lehnen, den Nackenbereich vollständig freizulegen, und tragen Sie dann Enthaarungscreme auf den Halsbereich auf, bis zum Unterkieferraum, hinunter zum Xiphoidfortsatz und auf beiden Seiten auf die Außenseite des Musculus sternocleidomastoideus.

Wischen Sie nach drei Minuten die Haare und die Enthaarungscreme vorsichtig mit einem Taschentuch ab. Als nächstes sterilisieren Sie mit einem Iodophor-Wattebausch die Mitte des Halses und der Umgebung. von denen Haare entfernt werden.

Decken Sie das Tier mit einem chirurgischen Abtuch ab und halten Sie das Loch auf den desinfizierten Bereich ausgerichtet. Machen Sie mit dem Skalpell einen etwa fünf Zentimeter langen Schnitt in der vorderen Mittellinie des Halses der Ratte. Heben Sie die Haut auf beiden Seiten des Schnitts an und schneiden Sie sie mit einer Schere längs entlang der Linea alba cervicalis.

Verwenden Sie eine Pinzette, um den Musculus sternohyoideus und den Musculus sternothyroideus zu trennen. Klemmen Sie die abgetrennten Muskeln vor dem Hals mit einer Gefäßzange und ziehen Sie das eingeklemmte Gewebe nach außen. Führen Sie die Naht mit der Nadel durch das eingeklemmte Gewebe.

Machen Sie einen Knoten und befestigen Sie die Naht am chirurgischen Vorhang des Operationstisches. Lokalisieren Sie den Schildknorpel anhand seiner Schildform und den Ringknorpel anhand seiner Ringform als obere Grenze im Operationsgebiet, dann die Luftröhre anhand seiner röhrenförmigen Knorpelringform in der Vorder- und Mitte des Halses als untere Grenze im Operationsbereich. Suchen Sie die Schilddrüse, eine rote schmetterlingsförmige Drüse auf der gegenüberliegenden Seite der Luftröhre zwischen der oberen und unteren Grenze.

Als nächstes finden Sie zwei Nebenschilddrüsen in einer fusiformen Form, die rötlich sind, aber leichter als die umgebende Schilddrüse mit einer bestimmten Grenze an der Ober- und Außenseite der Schilddrüse. Machen Sie ein Frontalfoto der Nebenschilddrüsen mit der Luftröhre, der Schilddrüse und dem Kehlkopf. Sezieren Sie die Rückseite der Speiseröhre und legen Sie mit einem Retraktor die rechte Seite der Nebenschilddrüsen frei.

Machen Sie ein Foto der Nebenschilddrüse mit der Schilddrüse und der Luftröhre auf der rechten Seite und belichten und erfassen Sie die linke Seite der Drüsen auf ähnliche Weise. Verwenden Sie eine Insulinspritze, um lokal 10 Mikroliter schwarze Eisenoxid-Nanopartikel-Suspension in die Mitte der Schilddrüse zu injizieren, und drücken Sie die Injektionsstelle vorsichtig mit Gaze für fünf Sekunden, dann beobachten Sie die schnelle Diffusion der schwarzen Eisenoxid-Nanopartikel in den Schilddrüsen, aber nicht in den Nebenschilddrüsen, da es die Nebenschilddrüsen negativ färbt und sie von der umgebenden Schilddrüse unterscheidet. Nehmen Sie die vorderen, linken und rechten Fotos der negativ gefärbten Nebenschilddrüsen zusammen mit der Luftröhre, der Schilddrüse und dem Kehlkopf auf.

Nach der Injektion diffundieren die Kontrastmittel, schwarze Eisenoxid-Nanopartikel, leicht in der Schilddrüse und färben sie schwarz, können aber aufgrund ihrer hohen Gewebedichte nicht in die Nebenschilddrüse eindringen. Die histologische Analyse von schwarzen Eisenoxid-Nanopartikeln, die in die Schilddrüse injiziert wurden, ergab, dass die Nebenschilddrüsen mit eng aneinandergereihten Hauptzellen angereichert sind, während die Schilddrüse viele lose Lumen aufweist, was auf eine viel geringere Gewebedichte hinweist. Zwei wichtige Dinge sollten bei diesem Verfahren beachtet werden.

Erstens, die Haltung der Ratte. Wir empfahlen, die Ohren und den Kopf nach hinten zu lehnen und den Nackenbereich vollständig freizulegen. Zweitens, wenn wir die IONPs injizieren, sollten wir eine feinsichere Nadel verwenden, da die Schilddrüsenoberfläche voller Blutgefäße ist.

Dieses Verfahren kann auch durch Autofluoreszenzbildgebung des PG durchgeführt werden, die nicht-invasiv ist, Echtzeitinformationen liefert und keinen Farbstoff als Kontrastmittel verwendet, aber das Autofluoreszenzsignal ist schwach und die Bildgebungseffizienz ist ebenfalls schlecht. Andere Forscher können dieses einfache und effektive Rattenmodell verwenden, um neue PG-Identifizierungstechnologien und -produkte zu entwickeln und zu bewerten, anstatt kompliziertere und teurere Großtiere wie Hunde und Schweine zu verwenden.