Einzelmoleküldiffusion und Assemblierung auf polymerüberfüllten Lipidmembranen

Zellmembranen sind aufgrund des Vorhandenseins eingebetteter Proteine und Zucker stark überfüllt. Wir demonstrieren Einzelmolekül-Bildgebung an synthetischen überfüllten Lipiddoppelschichten. Diese Plattform ist nützlich, um die Auswirkungen von Crowding auf biomolekulare Reaktionen der Membran auf molekularer Ebene zu untersuchen.

Das Protokoll erklärt die Analyse der Bindung, Diffusion und Assemblierung von Membranbiomolekülen. Der Erfolg des Experiments hängt von der rigorosen Reinigung des Substrats, der Vermeidung von Schäden an der Doppelschicht und der Aufrechterhaltung eines hohen Signal-Rausch-Verhältnisses bei der Einzelmolekülbildgebung ab. Das Verfahren demonstrieren mir Aditya Upasani und Vishwesh Haricharan Rai, Doktoranden aus dem Labor.