Hochauflösende Sonographie zur Analyse orthotoper ATC-Tumoren in einem gentechnisch veränderten Mausmodell

Das vorliegende Protokoll beschreibt die Hochfrequenz-Sonographie zur Darstellung der gesamten Schilddrüse der Maus und zur Überwachung des Wachstums des anaplastischen Schilddrüsenkarzinoms.

Dieses Protokoll hilft Anwendern, hochauflösende Ultraschalluntersuchungen zu nutzen, um Tumore im Mausmodell des anaplastischen Schilddrüsenkarzinoms zu scannen, zu überwachen und zu messen. Die Ultraschalluntersuchung hat sich bei Mäusen als zuverlässig erwiesen, um Gewebe abzubilden, die ähnliche Körperpositionen wie menschliches Gewebe einnehmen, einschließlich Leber, Schilddrüse und Fötus. Schalten Sie zunächst das Ultraschallsystem ein und erstellen Sie einen neuen Ordner zum Erfassen der Bilder und zum Sammeln von Daten.

Wählen Sie dann die 40-Megahertz-Liniensonde aus, klicken Sie auf das oberflächliche Gewebemuster, um den oberflächlichen Gewebeschallkopf zu aktivieren, und verwenden Sie den resultierenden B-Modus für die Bildgebung der Schilddrüse. Reinigen Sie die Tierbildplattform und schalten Sie den Heizknopf ein, damit die Plattformtemperatur 38 bis 40 Grad Celsius erreicht, bevor Sie das Tier darauf legen. Betäuben Sie die Maus und legen Sie sie auf die beheizte Plattform.

Bedecken Sie die Schnauze mit einem Nasenkegel, der mit dem Anästhesieausgang verbunden ist. Befestigen Sie dann die Maus in Rückenlage mit Klebeband an der beheizten Plattform. Passen Sie für die Tumorbildgebung das Bildgebungssystem an, um die Auflösung zu optimieren.

Stellen Sie die zweidimensionale Verstärkung auf 25 bis 30 Dezibel, die Bildtiefe auf 10 Millimeter und die Mitte auf drei bis sechs Millimeter ein. Tragen Sie nach dem Einstellen der Parameter großzügig Ultraschallgel auf den Bereich der nackten Haut auf, der mit einer Enthaarungscreme erreicht wurde. Halten Sie die Sonde fest und bringen Sie sie mit dem Ultraschallgel auf der Brust in Kontakt.

Scannen Sie dann von der Brust in Richtung Hals, um die Schilddrüse zu lokalisieren. Identifizieren Sie die anaplastischen Schilddrüsenkarzinomtumoren anhand der Luftröhre und der Gurtmuskulatur in Abhängigkeit von der anatomischen Lokalisation und dem Ultraschallecho. Bestätigen Sie anhand des Abdrucks des Gesamttumors den Bildausschnitt mit dem größten Tumordurchmesser von links nach rechts.

Drücken Sie dann die Freeze-Taste und messen Sie den anteroposterioren und den Tumordurchmesser von links nach rechts mit dem Ultraschallmessschieber. Wischen Sie nach Abschluss der Scans das Ultraschallgel ab und entfernen Sie das Rückhalteband von den Gliedmaßen des Tieres. Die ATC-Tumorgröße des rechten und linken Lappens wurde über vier Zeitintervalle gemessen.

Bei der vierten Messung war die durchschnittliche rechte ATC-Größe auf 11,844 Quadratmillimeter angewachsen, während die Tumorgröße des linken Lappens auf 9,280 Quadratmillimeter angewachsen war, was eine durchschnittliche Größenzunahme auf 15,843 Quadratmillimeter bedeutete. Interessanterweise war die Tumorgröße bei der mit P92 markierten Maus auf fast viermal so groß angewachsen wie bei der ersten Messung. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass Ultraschall flexibel ist und in Echtzeit ohne Strahlung durchgeführt werden kann.