Name: Instandhaltung einer lateralen Fluid-Perkussions-Verletzungsvorrichtung (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-04-21T14:10:00.000+00:00
Duration: 5 min 16 s
Description: Lernen Sie die Wartung einer lateralen Fluid-Perkussions-Verletzungsvorrichtung für Traumatische-Hirnverletzungs-Forschung. Diese Methoden zeigen Reinigung, Befüllung und Luftblasenvermeidung für zuverlässige Ergebnisse.

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Die Autoren bedanken sich bei Custom Design &; Fabrication Inc. für die technische Hilfe und Unterstützung. Diese Arbeit wurde durch die National Institutes of Health Grants R01NS120099-01A1 und R37HD059288-19 finanziert.

1. Reinigen des LFPI-Zylinders
<ol><li>Trennen Sie vorsichtig die Spritzen, die am Gehäuse und an der Einfüllöffnung des Messumformers befestigt sind, sowie das Kabel, das mit dem Druckaufnehmer verbunden ist (siehe Abbildung 1 für eine schematische Darstellung der Komponenten der Verletzungsvorrichtung).</li>
	<li>Achten Sie darauf, den Zylinder nicht fallen zu lassen, und lösen Sie die Handknöpfe auf der Rückseite des Geräts von den Zylinderklemmen, um den Zylinder zu befreien.</li>
	<li>Entfernen Sie den Kolben am Ende des Zylinders, des Wandlers, des Wandlergehäuses und der O-Ringe des Kolbens.</li>
	<li>Flüssigkeit aus dem Zylinder ablassen.</li>
	<li>Geben Sie ein mildes Reinigungsmittel, z. B. Geschirrspülmittel, in den Zylinder und schrubben Sie leicht mit einer Spül- oder Flaschenbürste13.</li>
	<li>Um sicherzustellen, dass das gesamte Reinigungsmittel abgespült wird, füllen Sie den Zylinder vollständig mit Wasser und spülen Sie ihn gründlich aus.</li>
</ol>2. Entgasen der Flüssigkeit, die zum Befüllen des Zylinders verwendet wird
<ol><li>Verwenden Sie eine Vakuumpumpe, um die Flüssigkeit zu entgasen, bevor Sie den Zylinder wieder befüllen, um die Bildung neuer Blasen zu verhindern und vorhandene Blasen zu absorbieren. Anmerkungen: Zum Befüllen der Flasche werden ca. 1,5 l Flüssigkeit benötigt, obwohl beim Entgasen von ca. 2 l ein kleiner Vorrat verbleibt, um die während des Gebrauchs und der Tests verlorene Flüssigkeit zu ersetzen. Anmerkungen: Hausstaubsauger sind zu schwach, um die Flüssigkeit effektiv zu entgasen. Das Vakuum muss in der Lage sein, einen Druck von 25-28 inHg zu erzeugen.</li>
	<li>Geben Sie einen Rührstab in die Flüssigkeit und stellen Sie den Flüssigkeitsbehälter auf eine Rührplatte. Das Rühren der Flüssigkeit während des Entgasungsprozesses hilft, das Sprudeln und die Freisetzung von Gas anzuregen. Das Rühren verhindert auch eine große plötzliche Zunahme der Blasenbildung. Anmerkungen: Der Entgasungsprozess sollte beendet sein, wenn nur noch sehr wenige Blasen erzeugt werden. Dies geschieht nach ca. 45 min.</li>
</ol>3. Zusammenbau des LFPI-Gerätes
<ol><li>Tragen Sie eine dünne Schicht Vaseline auf den Kolbenkolben auf.</li>
	<li>Befestigen Sie den Kolbenkolben so, dass der Kolben ca. 32 mm aus dem Zylinder14 herausragt. Anmerkungen: Luft wird häufig am Kolben vor dem führenden O-Ring eingeschlossen. Um diese überschüssige Luft loszuwerden, drehen Sie den Kolben, während Sie ihn ein- und ausfahren, um die Luft aus diesem Spalt zu arbeiten.</li>
	<li>Tragen Sie auch auf die anderen O-Ringe eine dünne Schicht Vaseline auf und befestigen Sie sie am Zylinder, mit Ausnahme des O-Rings an der Einfüllöffnung.</li>
	<li>Wickeln Sie Teflonband zweimal um die Gewinde des Schallkopfs.</li>
</ol>4. LFPI-Gerät nachfüllen und an der Basis befestigen
<ol><li>Schließen Sie eine 10-ml-Spritze, die mit entgaster Flüssigkeit gefüllt und frei von Luftblasen ist, an die Luer-Lock-Nabe am Schallkopfgehäuse an.</li>
	<li>Halten Sie den Schallkopf mit dem Gewindeende nach oben und füllen Sie die Vertiefung im Gewindebereich des Schallkopfs mit einer 10-ml-Spritze vollständig mit der entgasten Flüssigkeit. Ziel ist es, den Wandler gut zu füllen, ohne Luftblasen einzubringen. Achten Sie darauf, die empfindliche Membran an der Unterseite des Schallkopfschachts nicht zu beschädigen.</li>
	<li>Wenn der Zylinder schräg angeordnet ist, um zu verhindern, dass Luft wieder in das Wandlergehäuse eintritt, befestigen Sie das Wandlergehäuse am Zylinder13 und ziehen Sie es mit einem Schraubenschlüssel fest an.</li>
	<li>Entfernen Sie die Kappe von der Einfüllöffnung und dem Zylinder, sobald die entgaste Flüssigkeit etwa 2/3 des Flaschenvolumens erreicht hat.</li>
	<li>Stellen Sie den Zylinder waagerecht auf und füllen Sie den Zylinder mit entgaster Flüssigkeit. Anmerkungen: Um die Bildung von Luftblasen zu vermeiden, wird empfohlen, die Flüssigkeit langsam einzufüllen14.</li>
	<li>Setzen Sie die Kappe an der Einfüllöffnung wieder auf und schließen Sie alle Absperrhähne.</li>
	<li>Manipulieren Sie den Zylinder, um Luftblasen an die Einfüllöffnung14 zu bringen.</li>
	<li>Öffnen Sie den Absperrhahn an der Einfüllöffnung und injizieren Sie Flüssigkeit mit der Spritze am Wandlergehäuse, um Luftblasen aus der Öffnung14 zu drücken.</li>
	<li>Überprüfen Sie das gesamte Gerät und stellen Sie sicher, dass keine Luftblasen vorhanden sind.</li>
	<li>Geben Sie eine 10-ml-Spritze, die mit entgaster Flüssigkeit gefüllt ist, in die Luer-Lock-Nabe am Fülldeckel.</li>
	<li>Befestigen Sie den Zylinder mit den Handschrauben wieder am Sockel.</li>
	<li>Achten Sie darauf, dass der Zylinder waagerecht steht und mit der Mitte des beschwerten Hammers auf dem Pendel ausgerichtet ist.</li>
</ol>

<ol><li>Centers for Disease Control and Prevention. Surveillance Report of Traumatic Brain Injury-related Emergency Department Visits, Hospitalizations, and Deaths. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Centers+for+Disease+Control+and+Prevention%2C+U.S.+Department+of+Health+and+Human+Services%22">Centers for Disease Control and Prevention, U.S. Department of Health and Human Services</a>. , https://www.cdc.gov/traumaticbraininjury/get_the_facts.html (2014).</li>
<li>Dewan, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimating+the+global+incidence+of+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Estimating the global incidence of traumatic brain injury.</a> Journal of Neurosurgery. 130 (4), 1080-1097 (2018).</li>
<li>National Center for Injury Prevention and Control; Division of Unintentional Injury Prevention. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Traumatic+Brain+Injury+in+the+United+States%3A+Epidemiology+and+Rehabilitation%22">Traumatic Brain Injury in the United States: Epidemiology and Rehabilitation</a>. , Centers for Disease Control and Prevention. Atlanta, GA. (2015).</li>
<li>Holm, L., Cassidy, J. D., Carroll, L. J., Borg, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Summary+of+the+WHO+Collaborating+Centre+for+neurotrauma+task+force+on+mild+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Rehabilitation+Medicine%22%5BJournal%5D)">Summary of the WHO Collaborating Centre for neurotrauma task force on mild traumatic brain injury.</a> Journal of Rehabilitation Medicine. 37 (3), 137-141 (2005).</li>
<li>Pavlovic, D., Pekic, S., Stojanovic, M., Popovic, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traumatic+brain+injury%3A+neuropathological%2C+neurocognitive+and+neurobehavioral+sequelae%5BTitle%5D)+AND+%22Pituitary%22%5BJournal%5D)">Traumatic brain injury: neuropathological, neurocognitive and neurobehavioral sequelae.</a> Pituitary. 22 (3), 270-282 (2019).</li>
<li>Dixon, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+fluid+percussion+model+of+experimental+brain+injury+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">A fluid percussion model of experimental brain injury in the rat.</a> Journal of Neurosurgery. 67 (1), 110-119 (1987).</li>
<li>McIntosh, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Traumatic+brain+injury+in+the+rat%3A+characterization+of+a+lateral+fluid-percussion+model%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Traumatic brain injury in the rat: characterization of a lateral fluid-percussion model.</a> Neuroscience. 28 (1), 233-244 (1989).</li>
<li>Ma, X., Aravind, A., Pfister, B. J., Chandra, N., Haorah, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+traumatic+brain+injury+and+assessment+of+injury+severity%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Animal models of traumatic brain injury and assessment of injury severity.</a> Molecular Neurobiology. 56 (8), 5332-5345 (2019).</li>
<li>Nwafor, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pediatric+traumatic+brain+injury%3A+an+update+on+preclinical+models%2C+clinical+biomarkers%2C+and+the+implications+of+cerebrovascular+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Central+Nervous+System+Disease%22%5BJournal%5D)">Pediatric traumatic brain injury: an update on preclinical models, clinical biomarkers, and the implications of cerebrovascular dysfunction.</a> Journal of Central Nervous System Disease. 14, (2022).</li>
<li>Turner, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+chronic+traumatic+encephalopathy%3A+the+way+forward+for+future+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neurology%22%5BJournal%5D)">Modeling chronic traumatic encephalopathy: the way forward for future discovery.</a> Frontiers in Neurology. 6, 223(2015).</li>
<li>Petersen, A., Soderstrom, M., Saha, B., Sharma, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+traumatic+brain+injury%3A+a+review+of+pathophysiology+to+biomarkers+and+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Animal models of traumatic brain injury: a review of pathophysiology to biomarkers and treatments.</a> Experimental Brain Research. 239 (10), 2939-2950 (2021).</li>
<li>Sullivan, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluid-percussion+model+of+mechanical+brain+injury+in+the+cat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Fluid-percussion model of mechanical brain injury in the cat.</a> Journal of Neurosurgery. 45 (5), 521-534 (1976).</li>
<li>Fluid Percussion Injury Model 01-B: General Operation. , Custom Design & Fabrication, Inc. Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.cdf-products.com/">http://www.cdf-products.com/</a> (2023).</li>
<li>Fluid Percussion Injury Model 01-B: Assembly Instructions. , Custom Design & Fabrication, Inc. Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.cdf-products.com/">http://www.cdf-products.com/</a> (2023).</li>
<li>Pernici, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+optical+imaging+technique+to+visualize+progressive+axonal+damage+after+brain+injury+in+mice+reveals+responses+to+different+minocycline+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Longitudinal optical imaging technique to visualize progressive axonal damage after brain injury in mice reveals responses to different minocycline treatments.</a> Scientific Reports. 10, 7815-78 (2020).</li>
</ol>

Es wurden keine Interessenkonflikte erklärt.

Die oben beschriebenen Techniken zeigen, wie ein LFPI-Gerät ordnungsgemäß gewartet wird. Eine routinemäßige Reinigung und Überwachung ist erforderlich, damit das LFPI-Gerät ordnungsgemäß und zuverlässig funktioniert. Darüber hinaus ist es aufgrund des invasiven Charakters des LFPI-Verfahrens zwingend erforderlich, dass das Gerät gründlich gereinigt wird, um eine Infektion von Labortieren zu verhindern. 
Die Vermeidung der Bildung von Luftblasen im Gerät ist entscheidend, um optimale Verletzung...

Ein Schädel-Hirn-Trauma (SHT) wird durch eine plötzliche Krafteinwirkung auf den Kopf verursacht. Nach primären Verletzungen, die auf den körperlichen Aufprall zurückzuführen sind, erleiden SHT-Überlebende häufig sekundäre Verletzungen, einschließlich kognitiver Defizite und neurologischer Dysfunktionen, die mit physiologischen Reaktionen auf die ursprüngliche Verletzung verbunden sind1. Es wird geschätzt, dass jährlich etwa 69 Millionen Menschen weltweit an SHT leiden2. Allein in den Vereinigten Staaten kommt es jedes Jahr zu etwa 2,5 Millionen SHT-bedingten Besuchen in der Notaufnahme und zu Krankenhauseinweisungen, was SHT zu einer der Hauptursachen für Behinderungen und Todesfälle bei Kindern und jungen Erwachsenen macht3. SHT kann als leicht, mittelschwer oder schwer eingestuft werden, wobei ein leichtes SHT (mSHT) etwa 70 % bis 90 % der SHT-Fälle ausmacht4. Eine histologische und kognitive SHT-Pathologie kann innerhalb von Minuten bis Stunden nach der Verletzung auftreten, und die Auswirkungen des SHT können Monate bis Jahre nach der ersten Schädigung anhalten5.
Die Entwicklung experimenteller Modelle hat maßgeblich dazu beigetragen, die Auswirkungen und zugrunde liegenden Mechanismen von SHT zu verstehen. Ein solches Modell, die laterale Flüssigkeitsperkussionsverletzung (LFPI), wird häufig zur Beurteilung von SHT in vivo verwendet. LFPI reproduziert Pathologien, die mit einem menschlichen SHT assoziiert sind, einschließlich Gefäßstörungen, Blutungen, neuronalem Verlust, Entzündungen, Gliose und molekularen Störungen 6,7,8. Die LFPI-Technik wird für eine Vielzahl von experimentellen Anwendungen eingesetzt, darunter die Modellierung von pädiatrischen SHT sowie chronischen neurodegenerativen Erkrankungen wie der chronischen traumatischen Enzephalopathie 9,10. LFPI ist eine gut definierte und reproduzierbare Methode des experimentellen SHT, mit der der Schweregrad der Verletzung angepasst werden kann11. Das LFPI-Gerät besteht aus mehreren wichtigen Komponenten, darunter: einem Pendel mit einem beschwerten Hammer, einem Kolben, einem flüssigkeitsgefüllten Zylinder, einem Druckwandler, einem digitalen Oszilloskop und einem kleinen Röhrchen am Ende des Zylinders mit einem Luer-Verschluss, der an einer Nabe am Schädel des Tieres befestigt wird (Abbildung 1). LFPI funktioniert, indem das Pendel in den Kolben geschwenkt wird, wodurch eine Druckwelle durch die Flüssigkeit (entgastes deionisiertes Wasser oder Kochsalzlösung) in das Gehirn des angehängten Tieres erzeugt wird. Dies erhöht den intrakraniellen Druck und repliziert so die mechanischen Merkmale und biologischen Veränderungen von SHT12. Darüber hinaus werden Tiere, die in LFPI-Experimenten verwendet werden, einer Kraniektomie unterzogen, um das Gehirn dem Einfluss des Flüssigkeitsdrucks des Geräts auszusetzen.
Routinemäßige Wartung und Überwachung sind erforderlich, um sicherzustellen, dass das LFPI-Gerät genau funktioniert. Die folgenden Methoden sind wichtig, um das Eindringen von kontaminierenden Luftblasen in das Gerät zu verhindern. Hier demonstrieren wir Methoden zum ordnungsgemäßen Reinigen, Befüllen und Zusammenbauen des LFPI-Geräts. Wir werden auch Oszilloskopausgänge und Mausaufrichtungszeiten diskutieren, um die Lebensfähigkeit des LFPI zu bestätigen.

<table><tbody><tr><td>2 - 10 mL Spritzen mit Luer-Lock-Funktion</td><td></td><td></td><td>Sorgt für einen sicheren Sitz der Nadel und reduziert mögliches Austreten von Flüssigkeit&nbsp;</td></tr><tr><td>Entgaste Flüssigkeit</td><td></td><td></td><td>Hilft, die Bildung von Luftblasen während des Verletzungseingriffs zu reduzieren</td></tr><tr><td>Fluid Percussion Injury (FPI) Gerät (Modell 01-B)</td><td>Sonderanfertigungen & Fabrications Inc.</td><td>N/A</td><td>Verletzungsvorrichtung zur Modellierung von TBI bei Nagetieren</td></tr><tr><td>Mildes Reinigungsmittel</td><td></td><td></td><td>Ermöglicht die gründliche Reinigung des LFPI-Zylinders&nbsp;</td></tr><tr><td>Vaseline</td><td></td><td></td><td>Wird als wasserabweisendes Mittel verwendet und schützt das LFPI-Gerät vor Rost</td></tr><tr><td>Teflonband</td><td></td><td></td><td>Hilft bei der dichten Abdichtung der Rohrverbindungen am LFPI-Gerät</td></tr> <tr><td>* Andere Materialien als das LFPI-Gerät können von jedem zuverlässigen Unternehmen erworben werden.</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

instandhaltung einer lateralen fluid-perkussions-verletzungsvorrichtung

Maintenance of a Lateral Fluid Percussion Injury Device

Schädel-Hirn-Trauma (SHT) ist jährlich für etwa 2,5 Millionen Besuche in der Notaufnahme und Krankenhausaufenthalte verantwortlich und eine der Hauptursachen für Tod und Behinderung bei Kindern und jungen Erwachsenen. SHT wird durch eine plötzliche Krafteinwirkung auf den Kopf verursacht, und um das menschliche SHT und die zugrunde liegenden Mechanismen besser zu verstehen, sind experimentelle Verletzungsmodelle erforderlich. Die laterale Flüssigkeitsperkussionsverletzung (LFPI) ist ein häufig verwendetes Verletzungsmodell, da die pathologischen Veränderungen beim menschlichen SHT im Vergleich zum LFPI ähnlich sind, einschließlich Blutungen, Gefäßstörungen, neurologischer Defizite und Neuronenverlust. LFPI verwendet ein Pendel und einen flüssigkeitsgefüllten Zylinder, wobei letzterer an einem Ende einen beweglichen Kolben und am anderen Ende eine Luer-Lock-Verbindung zu steifen, flüssigkeitsgefüllten Schläuchen hat. Die Vorbereitung des Tieres umfasst die Durchführung einer Kraniektomie und das Anbringen eines Luer-Hubs über der Stelle. Am nächsten Tag wird der Schlauch des Verletzungsgeräts mit dem Luer-Hub am Schädel des Tieres verbunden und das Pendel auf eine bestimmte Höhe angehoben und losgelassen. Durch den Aufprall des Pendels auf den Kolben wird ein Druckimpuls erzeugt, der über den Schlauch auf die intakte Dura mater des Tieres übertragen wird und das experimentelle SHT erzeugt. Die richtige Pflege und Wartung ist für die zuverlässige Funktion des LFPI-Geräts unerlässlich, da die Art und Schwere der Verletzung je nach Zustand des Geräts stark variieren kann. Hier zeigen wir, wie man das LFPI-Gerät richtig reinigt, füllt und zusammenbaut und sicherstellt, dass es für optimale Ergebnisse angemessen gewartet wird.

Wir haben die Auswirkungen einer Luftblasenkontamination in einem LFPI-Gerät auf die Wellenformbildung getestet. Wir injizierten Luftblasen in das Gerät und verglichen die Oszilloskopausgänge mit Oszilloskopdaten, die von einem nicht kontaminierten LFPI-Gerät gesammelt wurden. Die Bedingungen waren wie folgt: nicht kontaminiert, Injektion von 5 ml Luft, Injektion von 10 ml Luft und Injektion von 15 ml Luft. Wir haben das Pendel für alle Stöße unter allen Bedingungen auf einer konstanten Höhe gehalten und 15 Stöße pro Bed...

Die richtige Pflege und Wartung sind für die zuverlässige Funktion eines LFPI-Geräts (Lateral Fluid Percussion Injury) unerlässlich. Hier zeigen wir, wie man ein LFPI-Gerät richtig reinigt, füllt und zusammenbaut und sicherstellt, dass es für optimale Ergebnisse angemessen gewartet wird.

Instandhaltung einer lateralen Fluid-Perkussions-Verletzungsvorrichtung

Traumatic brain injury (TBI) accounts for roughly 2.5 million emergency room visits and hospitalizations annually and is a leading cause of death and ...

Unser Protokoll zeigt, wie das LFPI-Gerät ordnungsgemäß gewartet wird. Es unterstreicht die Bedeutung der routinemäßigen Reinigung und Überwachung, um Fehlfunktionen des Geräts bei inkonsistenten Verletzungen zu vermeiden. LFPI ist also ein Verletzungsmodell, das zur Beurteilung von SHT in vivo verwendet wird.Es reproduziert Pathologien, die mit menschlichem SHT in Verbindung gebracht werden, und ist damit eine der am besten definierten Methoden des experimentellen SHT. Da das LFPI zur Reproduktion menschlicher SHT-Symptome eingesetzt wird, können wir Experimente durchführen, die verschiedene Aspekte von Schädel-Hirn-Traumata untersuchen, in der Hoffnung, therapeutische Maßnahmen zu finden. Luftblasen in der Einfüllöffnung oder im Wandler sind aufgrund der eingeschränkten Sicht in diesen Bereichen besonders schwer zu entfernen.Seien Sie beim Füllen dieser Bereiche geduldig, langsam und achten Sie darauf, keine Luft einzubringen. Lösen Sie zunächst vorsichtig die Spritzen, die am Gehäuse und an der Einfüllöffnung des Messumformers befestigt sind, sowie das Kabel, das mit dem Druckaufnehmer verbunden ist. Schrauben Sie die Handknöpfe auf der Rückseite des Geräts von den Zylinderklemmen ab, um den Zylinder zu befreien.Entfernen Sie den Kolben am Ende des Zylinders, des Wandlers, des Wandlergehäuses und der O-Ringe des Kolbens. Lassen Sie Flüssigkeit aus dem Zylinder ab, geben Sie ein mildes Reinigungsmittel wie Geschirrspülmittel in den Zylinder und schrubben Sie leicht mit einer Spül- oder Flaschenbürste. Um sicherzustellen, dass das gesamte Reinigungsmittel vollständig abgespült ist, füllen Sie den Zylinder mit Wasser und spülen Sie ihn gründlich aus.Tragen Sie eine dünne Schicht Vaseline auf den Kolbenkolben auf und befestigen Sie den Kolbenkolben mit dem Kolben, der etwa 32 Millimeter aus dem Zylinder herausragt. Tragen Sie auch eine dünne Schicht Vaseline auf die anderen O-Ringe auf und befestigen Sie sie bis auf den O-Ring an der Einfüllöffnung am Zylinder. Wickeln Sie Teflonband zweimal um die Gewinde des Schallkopfs.Schließen Sie eine 10-Milliliter-Spritze, die mit entgaster Flüssigkeit gefüllt und frei von Luftblasen ist, an die Luer-Lock-Nabe am Schallkopfgehäuse an. Halten Sie den Wandler mit dem Gewindeende nach oben und füllen Sie die Vertiefung im Gewindebereich des Wandlers vollständig mit der entgasten Flüssigkeit. Ziel ist es, den Wandler gut zu füllen, ohne Luftblasen einzubringen.Achten Sie darauf, die empfindliche Membran am Boden der Vertiefung nicht zu beschädigen. Wenn der Zylinder schräg aufgestellt ist, um zu verhindern, dass Luft wieder in das Wandlergehäuse eindringt, befestigen Sie das Wandlergehäuse am Zylinder und ziehen Sie es mit einem Schraubenschlüssel fest an. Entfernen Sie die Kappe von der Einfüllöffnung und der Flasche, sobald die entgaste Flüssigkeit etwa zwei Drittel des Flaschenvolumens erreicht hat.Stellen Sie den Zylinder waagerecht auf und füllen Sie den Zylinder mit entgaster Flüssigkeit. Setzen Sie die Kappe an der Einfüllöffnung wieder auf und schließen Sie alle Absperrhähne. Manipulieren Sie den Zylinder, um Luftblasen an die Einfüllöffnung zu bringen.Öffnen Sie den Absperrhahn an der Einfüllöffnung und injizieren Sie Flüssigkeit mit der Spritze am Wandlergehäuse, um Luftblasen aus der Öffnung zu drücken. Überprüfen Sie das gesamte Gerät und stellen Sie sicher, dass keine Luftblasen vorhanden sind. Geben Sie eine 10-Milliliter-Spritze, die mit entgaster Flüssigkeit gefüllt ist, in die Luer-Lock-Nabe am Einfülldeckel und befestigen Sie den Zylinder mit den Handschrauben wieder am Boden.Achten Sie darauf, dass der Zylinder waagerecht steht und mit der Mitte des beschwerten Hammers auf dem Pendel ausgerichtet ist. Das Bild der Druckwellenform, die von einem ordnungsgemäß gereinigten und funktionierenden LFPI-Gerät erzeugt wird, ist in dieser Abbildung dargestellt. Wenn Sie eine Verletzung durchführen oder das LFPI-Gerät testen, sollte die Druckwellenform eine einzelne scharfe Spitze aufweisen.Das Vorhandensein von Luftblasen im Gerät führt zu einer Wellenform mit mehreren kurzen Spitzen. Hier sind die Oszilloskopausgänge für die nicht verunreinigte 5 Milliliter Lufteinblasung, 10 Milliliter Lufteinblasung und 15 Milliliter Lufteinblasung dargestellt. Die in diesem Video gezeigten Techniken verringern die Wahrscheinlichkeit, dass Gase in das Gerät gelangen, und helfen, kleine Gastaschen zu entfernen, die die Flüssigkeit verunreinigen könnten.Daher ist das Entfernen von Luftblasen der wichtigste Schritt, den Sie bei der Verwendung des LFPI-Geräts beachten sollten. Nach diesem Eingriff ist unser Labor in der Lage, Verletzungen bei Mäusen zu induzieren und lebende Hirnschnitte zu verwenden, um die neuronale Aktivität aufzuzeichnen. Eines unserer Videos dazu finden Sie auf der Website von JoVE.Dieses Gerät war ein Game Changer in der Welt des SHT. Es ist derzeit die am weitesten verbreitete Methode zur Induktion von Verletzungen in Tiermodellen und hat den Weg geebnet, um bessere Therapeutika für menschliches SHT zu finden.

maintenance-of-a-lateral-fluid-percussion-injury-device

Research

Forschung

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowissenschaften

Lateral Flüssigkeit Schlagzeug (LFP), einem etablierten Modell der Hirn-Trauma, bei Mäusen nachgewiesen ist. LFP erfüllt drei wesentliche Kriterien für die Tiermodelle: Validität, Zuverlässigkeit und klinische Relevanz. Das Verfahren, bestehend aus chirurgischen Kraniotomie, gefolgt Fixierung der Nabe durch die Induktion von Verletzungen, die sich in fokale und diffuse Verletzungen, beschrieben wird.

Lateral Fluid-Percussion: Modell Schädel-Hirn-Verletzungen in Mäuse

Das Video demonstriert eine Methode zur Erstellung eines Mausmodells für traumatische Hirnverletzungen (TBI) mit Hilfe eines lateralen Flüssigkeitsperkussionsgeräts (LFPI). Bei der Betäubung der Maus wird das Gehirn freigelegt, indem ein Fenster auf dem Schädel geschaffen wird. Eine mit Kochsalzlösung gefüllte Kanüle wird am Fenster befestigt und dann mit dem LFPI verbunden. Das Pendel des Geräts wird losgelassen, um einen Druckimpuls zu erzeugen, der ein Schädel-Hirn-Trauma zufügt.

Generierung eines Mausmodells für ein Schädel-Hirn-Trauma mit Hilfe eines lateralen Flüssigkeitsperkussionsgeräts

Dieses Video zeigt die Induktion eines Schädel-Hirn-Traumas (TBI) bei einer Ratte mit einem Gerät zur lateralen Flüssigkeitsperkussionsverletzung (FPI). Bei dem Verfahren wird ein Loch in den Schädel einer anästhesierten Ratte gebohrt, um die Dura mater freizulegen, an der eine Kanüle befestigt wird. Die Ratte wird dann mit dem Gerät verbunden, das eine Druckwelle erzeugt, die das Gehirn erreicht und ein Schädel-Hirn-Trauma nachahmt, indem es den Tod von Nervenzellen und Gefäßschäden...

Induktion eines Schädel-Hirn-Traumas in einem Rattenmodell mit Hilfe eines lateralen Flüssigkeitsperkussionsgeräts

Die Schließung von katastrophalen offenen Bauchwunden stellt eine Herausforderung für den Chirurgen dar. Wir präsentieren eine chirurgische Technik, die eine Kombination aus mechanischen und biologischen Xenograft-Verschlusssystemen verwendet, um komplexe offene Bauchwunden zu schließen. Diese Technik bietet dem Chirurgen eine weitere Möglichkeit für den endgültigen Faszienverschluss und die beschleunigte Wundheilung.

Eine Fallserie erfolgreicher Bauchverschlussmit einer neuartigen Technik, die ein mechanisches Verschlusssystem mit einem biologischen Xenograft kombiniert, das die Wundheilung beschleunigt

Ziel dieser Publikation ist es, die mögliche Anwendung eines neuartigen Geräts anhand simulierter feststoffhaltiger Organverletzungen in einem Schweinemodell aufzuzeigen.

A Saline/Bipolar Radiofrequency Energy Device As an Adjunct for Hemostasis in Solid Organ Injury/Trauma

Eine Methode zur Erfassung der Multimodalität Überwachungssignale bei Patienten mit schweren Hirnverletzungen mit einem Bett, wird einzelne Burr Loch Technik beschrieben.

Ein Nachttisch, einzelne Burr Loch Ansatz zur Multimodalität Überwachung in schwere Hirnschädigung

Hier stellen wir ein Protokoll vor, um schweres TBI mit dem lateralen Fluid Percussion Injury (FPI) Modell bei erwachsenen, männlichen Wistar Ratten zu induzieren. Wir zeigen auch den Einsatz eines drahtlosen Telemetriesystems, um kontinuierliche Video-EEG-Aufnahmen zu sammeln und epileptiforme Entladungen zu überwachen, die mit der posttraumatischen Epileptogenese übereinstimmen.

Einsatz eines drahtlosen Video-EEG-Systems zur Überwachung von epileptiforlen Entladungen nach lateraler Fluid-Percussion-induzierter traumatischer Hirnverletzung

Open-Globe-Augenverletzungen können in ländlichen oder militärrelevanten Szenarien mehrere Tage unbehandelt bleiben, was zu Blindheit führt. Therapeutika werden benötigt, um den Verlust des Sehvermögens zu minimieren. Hier beschreiben wir ein Organkultur-Open-Globe-Verletzungsmodell. Mit diesem Modell können mögliche Therapeutika zur Stabilisierung dieser Verletzungen richtig bewertet werden.

Anterior Segment Organ Culture Platform zur Verfolgung von Open Globe Verletzungen und therapeutischer Leistung

In dieser Arbeit wird gezeigt, wie ein waches geschlossenes Kopfverletzungsmodell verwendet werden kann, um die Auswirkungen eines wiederholten leichten Schädel-Hirn-Traumas (r-mSHT) auf die synaptische Plastizität im Hippocampus zu untersuchen. Das Modell repliziert wichtige Merkmale des r-mSHT bei Patienten und wird in Verbindung mit der in vitro Elektrophysiologie eingesetzt.

Beurteilung von Veränderungen in der synaptischen Plastizität unter Verwendung eines wachen geschlossenen Kopfverletzungsmodells für ein leichtes Schädel-Hirn-Trauma

Dieses Protokoll stellt ein modifiziertes Mausmodell für repetitive milde traumatische Hirnverletzungen (rmTBI) vor, die über eine geschlossene Kopfverletzungsmethode (CHI) induziert werden. Der Ansatz zeichnet sich durch ein verdünntes Schädelfenster und eine Flüssigkeitsperkussion aus, um die Entzündung zu reduzieren, die häufig durch die Exposition von Hirnhäuten verursacht wird, sowie eine verbesserte Reproduzierbarkeit und Genauigkeit bei der Modellierung von rmTBI bei Nagetieren.

Modifiziertes Mausmodell für repetitives leichtes Schädel-Hirn-Trauma mit verdünntem Schädelfenster und flüssiger Perkussion

Lernen Sie die Wartung einer lateralen Fluid-Perkussions-Verletzungsvorrichtung für Traumatische-Hirnverletzungs-Forschung. Diese Methoden zeigen Reinigung, Befüllung und Luftblasenvermeidung für zuverlässige Ergebnisse.

Instandhaltung einer lateralen Fluid-Perkussions-Verletzungsvorrichtung

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