Name: Erforschung der Zwei-Kräuter-Kombinationsstrategie zur Behandlung verletzter PC12-Zellen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-11-18T14:40:00.000+00:00
Duration: 10 min 33 s
Description: Lernen Sie eine Zweikräuter-Kombinationsstrategie zur Behandlung hypoxiegeschädigter PC12-Zellen in der Neuroforschung. Diese Methode bietet ein effizientes in-vitro-Screening-Verfahren für traditionelle chinesische Medizin.

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Diese Forschung wurde durch wichtige Forschungs- und Entwicklungsprojekte des Ministeriums für Wissenschaft und Technologie der Provinz Sichuan finanziert (2020YFS0325).

<ol><li>Mendelevich, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+cerebral+ischemia%2C+and+dizziness%5BTitle%5D)+AND+%22Zhurnal+Nevrologii+i+Psikhiatrii+Imeni+SS+Korsakova%22%5BJournal%5D)">Chronic cerebral ischemia, and dizziness.</a> Zhurnal Nevrologii i Psikhiatrii Imeni SS Korsakova. 122 (3), 22-26 (2022).</li>
<li>Gao, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expert+consensus+on+the+diagnosis+and+treatment+of+chronic+cerebral+ischemia+with+integrated+traditional+Chinese+and+western+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Integrated+Traditional+and+Western+Medicine%22%5BJournal%5D)">Expert consensus on the diagnosis and treatment of chronic cerebral ischemia with integrated traditional Chinese and western medicine.</a> Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Medicine. 38 (10), 1161-1167 (2018).</li>
<li>Luyu, S., Heng, L., Dengke, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combined+treatment+of+45+cases+of+cerebral+infarction+with+Astragalus+and+Dengzhan+Xixin+injection%5BTitle%5D)+AND+%22Jilin+Journal+of+Traditional+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Combined treatment of 45 cases of cerebral infarction with Astragalus and Dengzhan Xixin injection.</a> Jilin Journal of Traditional Chinese Medicine. 27 (4), 23-24 (2007).</li>
<li>Bei, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+study+of+Dengzhanxixin+injection+combined+with+Astragalus+injection+in+the+treatment+of+acute+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Basic+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Clinical study of Dengzhanxixin injection combined with Astragalus injection in the treatment of acute ischemic stroke.</a> Journal of Basic Chinese Medicine. 21 (9), 1123-1127 (2015).</li>
<li>Tian, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimal+ratio+of+Astragalus+injection+combined+with+Dengzhan+Xixin+injection+against+cerebral+ischemia-reperfusion+injury+in+rats+by+baseline+equal-ratio+increase-decrease+design+method%5BTitle%5D)+AND+%22China+Pharmacy%22%5BJournal%5D)">Optimal ratio of Astragalus injection combined with Dengzhan Xixin injection against cerebral ischemia-reperfusion injury in rats by baseline equal-ratio increase-decrease design method.</a> China Pharmacy. 30 (14), 1885-1889 (2019).</li>
<li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+and+mechanism+of+Astragalus+combined+with+Erigeron+breviscapusin+the+best+proportion+on+cerebral+ischemia+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+and+Clinics+of+Chinese+Materia+Medica%22%5BJournal%5D)">Protective effect and mechanism of Astragalus combined with Erigeron breviscapusin the best proportion on cerebral ischemia rats.</a> Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica. 35 (2), 104-108 (2019).</li>
<li>Yan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+on+the+oxidative+damage+of+PC12+cells+with+hypoxia+and+hypoglycemia+based+on+the+combination+of+Astragalus+and+Dengzhan+Asarum+based+on+the+Nrf2%2FHO-1+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+and+Clinics+of+Chinese+Materia+Medica%22%5BJournal%5D)">Study on the oxidative damage of PC12 cells with hypoxia and hypoglycemia based on the combination of Astragalus and Dengzhan Asarum based on the Nrf2/HO-1 pathway.</a> Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica. 38 (2), 159-164 (2022).</li>
<li>Chinese Pharmacopoeia, Dengzhan Asarum Granules. Volume I. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://db.ouryao.com/yd2020/view.php?id=f27dcefa69">https://db.ouryao.com/yd2020/view.php?id=f27dcefa69</a> 924(2020).</li>
<li>Chinese Pharmacopoeia, Astragalus granules. Volume I. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://db.ouryao.com/yd2020/view.php?id=fbcd0a8bf8">https://db.ouryao.com/yd2020/view.php?id=fbcd0a8bf8</a> 1592(2020).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((N-linoleyltyrosine+protects+PC12+cells+against+oxidative+damage+via+autophagy%3A+Possible+involvement+of+CB1+receptor+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">N-linoleyltyrosine protects PC12 cells against oxidative damage via autophagy: Possible involvement of CB1 receptor regulation.</a> International Journal of Molecular Medicine. 46 (5), 1827-1837 (2020).</li>
<li>Fan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gab1+regulates+SDF-1-induced+progression+via+inhibition+of+apoptosis+pathway+induced+by+PI3K%2FAKT%2FBcl-2%2FBAX+pathway+in+human+chondrosarcoma%5BTitle%5D)+AND+%22Tumor+Biology%22%5BJournal%5D)">Gab1 regulates SDF-1-induced progression via inhibition of apoptosis pathway induced by PI3K/AKT/Bcl-2/BAX pathway in human chondrosarcoma.</a> Tumor Biology. 37 (1), 1141-1149 (2016).</li>
<li>Meng, M., Zhang, L., Ai, D., Wu, H., Peng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-Asarone+ameliorates+%CE%B2-Amyloid-induced+neurotoxicity+in+PC12+cells+by+activating+P13K%2FAkt%2FNrf2+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">β-Asarone ameliorates β-Amyloid-induced neurotoxicity in PC12 cells by activating P13K/Akt/Nrf2 signaling pathway.</a> Frontiers in Pharmacology. 12, 659955(2021).</li>
<li>Li, J., Chen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+treatment+of+chronic+cerebral+ischemia+with+traditional+Chinese+and+western+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Xinjiang+Journal+of+Traditional+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Advances in the treatment of chronic cerebral ischemia with traditional Chinese and western medicine.</a> Xinjiang Journal of Traditional Chinese Medicine. 39 (3), 115-118 (2021).</li>
<li>Yu, M., Zhan, Q., Xu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discussion+on+the+therapeutic+value+of+traditional+Chinese+medicine+on+cognitive+dysfunction+caused+by+chronic+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Medicine+Modern+Distance+Education+of+China%22%5BJournal%5D)">Discussion on the therapeutic value of traditional Chinese medicine on cognitive dysfunction caused by chronic cerebral ischemia.</a> Chinese Medicine Modern Distance Education of China. 11 (19), 155-157 (2013).</li>
<li>Wang, M., Liu, J., Yao, M., Ren, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+research+on+pharmacological+and+neuroprotective+effects+of+traditional+Chinese+medicine+after+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22China+Journal+of+Chinese+Materia+Medica%22%5BJournal%5D)">Advances in research on pharmacological and neuroprotective effects of traditional Chinese medicine after cerebral ischemia.</a> China Journal of Chinese Materia Medica. 45 (3), 513-517 (2020).</li>
<li>Wang, N., Sun, H., Ma, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+different+doses+of+astragalus+injection+on+neurological+rehabilitation+of+stroke+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Clinical+Rational+Drug+Use%22%5BJournal%5D)">Effects of different doses of astragalus injection on neurological rehabilitation of stroke patients.</a> Chinese Journal of Clinical Rational Drug Use. 9 (13), 67-69 (2016).</li>
<li>Sun, Y. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+astragalus+injection+on+apoptosis+after+cerebral+ischemia-reperfusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hebei+Medicine%22%5BJournal%5D)">Effects of astragalus injection on apoptosis after cerebral ischemia-reperfusion in rats.</a> Hebei Medicine. 22 (7), 1147-1149 (2016).</li>
<li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dengzhan+Xixin+injection+derived+from+a+traditional+Chinese+herb+Erigeron+breviscapusameliorates+cerebral+ischemia%2Freperfusion+injury+in+rats+via+modulation+of+mitophagy+and+mitochondrial+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Dengzhan Xixin injection derived from a traditional Chinese herb Erigeron breviscapusameliorates cerebral ischemia/reperfusion injury in rats via modulation of mitophagy and mitochondrial apoptosis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 288, 114988(2022).</li>
<li>Liao, Y., Ni, X., Zhan, C., Cai, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+research+progress+of+Dengzhanhua+preparation+in+prevention+and+treatment+of+ischemic+stroke+and+transient+ischemic+attack%5BTitle%5D)+AND+%22Guangdong+Medical+Journal%22%5BJournal%5D)">Clinical research progress of Dengzhanhua preparation in prevention and treatment of ischemic stroke and transient ischemic attack.</a> Guangdong Medical Journal. 41 (9), 963-967 (2020).</li>
<li>Li, C., Li, J., Xu, G., Sun, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+chronic+ethanol+consumption+on+apoptosis+and+autophagy+following+transient+focal+cerebral+ischemia+in+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Influence of chronic ethanol consumption on apoptosis and autophagy following transient focal cerebral ischemia in male mice.</a> Scientific Reports. 10 (1), 6164(2020).</li>
<li>El Khashab, I. H., Abdelsalam, R. M., Elbrairy, A. I., Attia, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chrysin+attenuates+global+cerebral+ischemic+reperfusion+injury+via+suppression+of+oxidative+stress%2C+inflammation+and+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedicine+Pharmacotherapy%22%5BJournal%5D)">Chrysin attenuates global cerebral ischemic reperfusion injury via suppression of oxidative stress, inflammation and apoptosis.</a> Biomedicine Pharmacotherapy. 112, 108619(2019).</li>
<li>Su, X., He, S., Chen, Z., Xie, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+breviscapine+aglycone+on+PI+3+K%2FAkt+conduction+pathway+in+neonatal+rats+with+hypoxic-ischemic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Armed+Police+Logistics+College+%28Medical+Edition%29%22%5BJournal%5D)">Effect of breviscapine aglycone on PI 3 K/Akt conduction pathway in neonatal rats with hypoxic-ischemic brain injury.</a> Journal of Armed Police Logistics College (Medical Edition). 27 (2), 93-96 (2018).</li>
<li>Wang, X., Shi, C., Pan, H., Meng, X., Ji, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA-22+exerts+its+neuroprotective+and+angiogenic+functions+via+regulating+PI3K%2FAkt+signaling+pathway+in+cerebral+ischemia-reperfusion+rats%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neural+Transmission%22%5BJournal%5D)">MicroRNA-22 exerts its neuroprotective and angiogenic functions via regulating PI3K/Akt signaling pathway in cerebral ischemia-reperfusion rats).</a> Journal of Neural Transmission. 127 (1), 35-44 (2020).</li>
<li>Luca, M., Luca, A., Calandra, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+oxidative+damage+in+the+pathogenesis+and+progression+of+alzheimer%27s+disease+and+vascular+dementia%5BTitle%5D)+AND+%22Oxidative+Medicine+and+Cellular+Longevity%22%5BJournal%5D)">The role of oxidative damage in the pathogenesis and progression of alzheimer's disease and vascular dementia.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2015, 504678(2015).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lupeol+alleviates+cerebral+ischemia-reperfusion+injury+in+correlation+with+modulation+of+PI3K%2FAkt+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychiatric+Disease+and+Treatment%22%5BJournal%5D)">Lupeol alleviates cerebral ischemia-reperfusion injury in correlation with modulation of PI3K/Akt pathway.</a> Neuropsychiatric Disease and Treatment. 16 (8), 1381-1390 (2020).</li>
<li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effect+of+phosphocreatine+on+oxidative+stress+and+mitochondrial+dysfunction+induced+apoptosis+in+vitro+and+in+vivo%3A+Involvement+of+dual+PI3K%2FAkt+and+Nrf2%2FHO-1+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radical+Biology+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effect of phosphocreatine on oxidative stress and mitochondrial dysfunction induced apoptosis in vitro and in vivo: Involvement of dual PI3K/Akt and Nrf2/HO-1 pathways.</a> Free Radical Biology and Medicine. 120, 228-238 (2018).</li>
<li>Muñoz-Sánchez, J., Chánez-Cárdenas, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+cobalt+chloride+as+a+chemical+hypoxia+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Toxicology%22%5BJournal%5D)">The use of cobalt chloride as a chemical hypoxia model.</a> Journal of Applied Toxicology. 39 (4), 556-570 (2019).</li>
<li>Tang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salidroside+attenuates+CoCl2-simulated+hypoxia+injury+in+PC12+cells+partly+by+mitochondrial+protection%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Salidroside attenuates CoCl2-simulated hypoxia injury in PC12 cells partly by mitochondrial protection.</a> European Journal of Pharmacology. 912 (10), 174617(2021).</li>
<li>Yin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+potency+of+Tofu+bio-processed+using+Actinomucor+elegans+against+hypoxic+injury+induced+by+cobalt+chloride+in+PC12+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective potency of Tofu bio-processed using Actinomucor elegans against hypoxic injury induced by cobalt chloride in PC12 cells.</a> Molecules. 26 (10), 2983(2021).</li>
</ol>

Die Autoren erklären, dass keine Interessenkonflikte bestehen.

In der modernen klinischen Praxis mangelt es immer noch an idealen Medikamenten zur Behandlung der zerebralen Ischämie2. Unter der Leitung der Ergänzung des Qi und der Aktivierung der Durchblutungsmethode wurden Ast, Eri und andere Präparate in Kombination in der klinischen Praxis der TCM verwendet und haben gute umfassende Vorteile erzielt13,14,15. Eine große Anzahl von Studien hat gezeigt, dass Ast die ...

Chronische zerebrale Ischämie, verursacht durch zerebrale Hypoperfusion, ist eine häufige Erkrankung bei Menschen mittleren Alters und älteren Menschen1. Als langfristige okkulte Ischämie kann es zu einer fortschreitenden oder anhaltenden neurologischen Dysfunktion kommen. Zu den wichtigsten pathologischen Mechanismen gehören Zellapoptose und oxidative Schäden, die zu einer fortschreitenden oder anhaltenden neurologischen Dysfunktion führen. Dies ist die pathologische Grundlage der Alzheimer-Krankheit, der vaskulären Demenz und anderer Krankheiten und beeinträchtigt die Lebensqualität der Patienten erheblich. In der modernen Medizin mangelt es jedoch immer noch an idealen Medikamenten zur Behandlung der chronischen zerebralen Ischämie2. Gleichzeitig ist die Kombination von Astragalus mongholicus (Ast) und Erigeron breviscapus (Eri ) in der klinischen Praxis der Traditionellen Chinesischen Medizin (TCM) weit verbreitet4. Die Kombinationsstrategie hat sich bemerkenswert verbessert, um die Wiederherstellung der Nervenfunktion nach zerebraler Ischämie zu fördern, die besser ist als die eines einzelnen Medikaments. Es gibt jedoch große Unterschiede im Dosierungsverhältnis in der Kombination der beiden Medikamente4. Die wirksamen Komponenten und der Wirkmechanismus sind nicht genau definiert, was das Hauptproblem ist, das die klinische Anwendung einschränkt.
Frühere Studien haben die synergistische Wirkung der Präparationskombination aus Ast-Injektion und Eri-Injektion bei der Behandlung von zerebraler Ischämie bei Ratten gezeigt. Es kann die Expression des p-Akt-Proteins hochregulieren und die Expression des Bcl-2-assoziierten Todespromotors (BAD)-Proteins5,6 herunterregulieren, das zu den Proteinen der B-Lymphoblastom-2-Familie (Bcl-2) gehört und die Apoptose fördert. Die materielle Grundlage und der Mechanismus seiner synergistischen Wirkung sind jedoch nicht klar. Darüber hinaus wurde das Verletzungsmodell von PC12-Zellen mit CoCl2-kombiniertem glukosefreiem Medium erstellt, und die optimale Komponentenkombination in Ast und Eri wurde gescreent und definiert7.
In dieser Studie werden die wirksamen Dosen von Ast und Eri unter Verwendung des verletzten PC12-Zellmodells untersucht. Die optimale Kombination der beiden Wirkstoffe wird mit diesem Modell in Kombination mit der homogenen Designmethode gescreent. Das Zellmodell wird verwendet, um den Unterschied in den Wirkungen und Mechanismen der Präparationskombination und der Komponentenkombination in verletzten PC12-Zellen weiter zu bewerten. Diese Strategie zielt darauf ab, die Schutzwirkung und den Regulationsmechanismus der beiden Arten von Kombinationen auf verletzte PC12-Zellen durch den PI3K/Akt/Nrf2-Signalweg zu untersuchen, um den besten Kombinationsmodus zu bestimmen. Diese Studie liefert eine Referenz für die Optimierung der besten Applikationsweise der TCM.

<table><tbody><tr><td>Biosicherheitswerkbank der Serie 1300 Klasse II</td><td>Thermo Fisher Scientific Instruments Company</td><td>1374</td><td></td></tr><tr><td>3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromid</td><td>Guangzhou saiguo biotech Company</td><td>1334GR001</td><td>MTT</td></tr><tr><td>ACEA NovoExpress 1.4.0</td><td>ACEA Biosciences,</td> <td>Inc-Akt</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>10176-2-AP</td><td></td></tr><tr><td>Analytische Durchflusszytometrie</td><td>Thermo Fisher Scientific Instruments Company</td><td>62-2-1810-1027-0</td><td></td></tr><tr><td>Annexin V-FITC Apoptose-Nachweiskit</td><td>Beyotime Biotechnology Company</td><td>C1062L</td><td></td></tr><tr><td>Astragalus-Injektion</td><td>Heilongjiang Zhenbao Island Pharmaceutical Company</td><td>A03190612144</td><td>Ast Injektion</td></tr><tr><td>Astragalosid A</td><td>Chongqing Gao Ren Biotechnology Company</td><td>84687-43-4</td><td></td></tr><tr><td>Bax</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>60267-1-Ig BCA-Proteinquantifizierungskit</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Beyotime Biotechnology Company</td><td>P0012</td><td></td></tr><tr><td>Bcl-2</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>26593-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Kohlendioxid-Inkubatoren</td><td>Thermo Fisher Scientific Instruments Company</td><td>0816-2014</td><td></td></tr><tr><td>Caspase-3</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>19677-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>Chlorogensäure</td><td>Chongqing Gao Ren Biotechnology Company</td><td>327-97-9</td><td></td></tr><tr><td>Kobaltchlorid-Hexahydrat</td><td>Merck Biotechnology, Inc.</td><td>7791-13-1</td><td>CoCl2</td></tr><tr><td>Dimethylsulfoxid</td><td>Guangzhou Saiguo Biotech Company</td><td>2020112701</td><td>DMSO</td></tr><tr><td>Dinatriumhydrogenphosphat Dodecahydrat</td><td>Chengdu Kolon Chemical Company</td><td>2020090101</td><td></td></tr><tr><td>DMEM High Sugar</td> Medium <td>Thermowissenschaftliches Hyclone</td><td>2110050</td><td></td></tr><tr><td>DMEM zuckerfreies Medium</td><td>Beijing Solarbio Life Sciences Company</td><td></td><td></td>2029548</tr><tr><td>ECL Leuchtflüssigkeit</td><td>Lianshuo Biological Company</td><td>WBKLS0500</td><td></td></tr><tr><td>Elektronische Waage</td><td>Haozhuang Hengping Scientific Instrument Co., Ltd., Shanghai, China</td><td>FA1204</td><td></td></tr><tr><td>Elektrophorese-Instrument</td><td>Bio-Rad Laboratories (Shanghai) Co., Ltd</td><td>1658026</td><td></td></tr><tr><td>Erigeron breviscapus Kapsel</td><td>Yunnan Biogu Pharmaceutical Company</td><td>Z53021671 Eri-Kapsel</td><td></td></tr><tr><td>Fötales Rinderserum</td><td>Four Seasons Institute of Biological Engineering</td><td>20210402</td><td>FBS</td></tr><tr><td>Fluoreszenzmikroskop</td><td>Olympms Corporation</td><td>IX71-F32PH</td><td></td></tr><tr><td>Gel</td><td>Imager Bio-Rad Laboratories (Shanghai) Co., Ltd</td><td>1708265</td><td></td></tr><tr><td>Ziegen-Anti-Maus-Sekundärantikörper</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>SA00001-1</td><td></td></tr><tr><td>Ziegen-Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>SA00001- 2</td><td></td></tr><tr><td>IBM SPSS Statistics Version 26.0</td><td>International Business Machines Corporation, USA-ImageJ</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>1.8.0</td><td>National Institutes of Health, USA-Bildgebungssoftware</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Immunol&nbsp; Fluoreszenz&nbsp; Färbekit</td><td>Beyotime Biotechnology Company</td><td>P0196</td><td></td></tr><tr><td>KCl</td><td>Chengdu Kolon Chemical Company</td><td>2021070901</td><td></td></tr><tr><td>Marker</td><td>Thermo Fisher Scientific Instruments Company</td><td>26616</td><td></td></tr><tr><td>Mikroplatten-Reader</td><td>Perkin Elmer Corporate Management (Shanghai) Co.</td><td></td><td></td>HH35L2018296</tr><tr><td>Motic Inverses Mikroskop</td><td>Nanda Scientific Instruments Co.</td><td></td><td></td>AE2000LED</tr><tr><td>NaCl</td><td>Chengdu Kolon Chemical Company</td><td>2014081301</td><td></td></tr><tr><td>Fettfreie Milch</td><td>Beyotime Biotechnology Company</td><td>P0216</td><td></td></tr><tr><td>Nrf2</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>16396-1-AP</td><td></td></tr><tr><td>P-Akt</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>66444-1-Ig PC12-Zellen</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Chinesische Akademie der Wissenschaften</td><td></td><td></td>CBP60430</tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin-Lösung</td><td>Thermowissenschaftliche Hyclone</td>- <td>SV30010</td><td></td></tr><tr><td>Phosphatase-Protease-Inhibitor-Mischung</td><td>Beyotime Biotechnology Company</td><td>P1045</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumdihydrogenphosphat</td><td>Chengdu Kolon Chemical Company</td><td>2015082901</td><td></td></tr><tr><td>Assay-Kit für reaktive Sauerstoffspezies</td><td>Beyotime Biotechnology Company</td><td>S0033S</td><td></td></tr><tr><td>RI-PA Lyselösung</td><td>Beyotime Biotechnology Company</td><td>P0013B</td><td></td></tr><tr><td>Scutellarin</td><td>Chongqing Gao Ren Biotechnology Company</td><td>27740-01-8</td><td></td></tr><tr><td>SDS-PAGE Probenladepuffer, 5x</td><td>Beyotime Biotechnology Company</td><td>P0015L</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Filterspitzen (0,22 & Mikro; m)</td><td>Merck Biotechnology, Inc.</td><td></td><td></td>SLGP033RB</tr><tr><td>Tris-base</td><td>Guangzhou saiguo Biotech Company</td><td>1115GR500&nbsp;</td><td>Tbs</td></tr><tr><td>Trypsin</td><td>Thermo wissenschaftlicher Hyclone</td><td>J190013</td><td></td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Chengdu Kolon Chemical Company</td><td>2021051301</td><td></td></tr><tr><td>Vortex-Oszillator</td><td>OHAUS International Co., Ltd., Shanghai, China</td><td>VXMNAL</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-Aktin</td><td>Wuhan Three Eagles Proteintech Group, Inc</td><td>66009-1-Ig</td><td></td></tr></tbody></table>

erforschung der zwei-kräuter-kombinationsstrategie zur behandlung verletzter pc12-zellen

Exploring the Two Herb Combination Strategy to Treat Injured PC12 Cells

Im Hinblick auf die Vorteile der Kombination der Traditionellen Chinesischen Medizin (TCM) bei der Behandlung der zerebralen Ischämie untersuchten wir die Unterschiede in der Wirksamkeit und dem Mechanismus zwischen der Präparatkombination und der Komponentenkombination, um die Zwei-Kräuter-Kombinationsstrategie zur Behandlung verletzter PC12-Zellen zu untersuchen. Kobaltchlorid (CoCl2) in Kombination mit einem glukosefreien Medium wurde verwendet, um eine oxidative Schädigung von PC12-Zellen zu induzieren. Anschließend wurde die optimale Kombination aus Astragalus mongholicus (Ast) und Erigeron breviscapus (Eri ) ausgewählt und nach einheitlichen Designmethoden kombiniert, nachdem ihre sichere und wirksame Konzentration auf PC12-Zellen überprüft worden war. Ferner umfasst die gescreente Komponentenkombination 10 μM Astragalosid A, 40 μM Scutellarin und 75 μM Chlorogensäure in zwei Kräutern. Dann wurden MTT, Annexin V-FITC/PI, Immunfluoreszenz und Western-Blot-Analyse verwendet, um die Wirksamkeit und den Mechanismus der Präparatekombination und der Komponentenkombination auf verletzten PC12-Zellen zu bewerten. Die Ergebnisse zeigten, dass die optimale Präparationskombination für das Zellüberleben eine Ast-Injektion und eine Eri-Kapsel mit einer Konzentration von 6:1,8 (μM) war. Die Komponentenkombination (10 μM Astragalosid A, 40 μM Scutellarin und 75 μM Chlorogensäure) war wirksamer als die Zubereitungskombination. Beide Kombinationen reduzierten die apoptotische Rate, die Fluoreszenzintensität von Caspase-3 und den Gehalt an intrazellulären reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) erheblich. In der Zwischenzeit regulierten sie die Expressionsniveaus von p-Akt/Akt, Bcl-2/Bax und Nrf2 hoch. Diese Effekte waren in der Komponentenkombination deutlicher. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass beide Kombinationen die durch CoCl2 in Kombination mit einem glukosefreien Medium auf PC12-Zellen induzierte Schädigung hemmen und so das Zellüberleben fördern können. Die Effizienz der Komponentenkombination gegenüber der Präparationskombination kann jedoch auf eine stärkere Regulation des PI3K/Akt/Nrf2-Signalwegs zurückzuführen sein, der mit oxidativem Stress und Apoptose zusammenhängt.

Das Screening der optimalen Kombination von Ast-Injektion und Eri-Kapsel ist in Abbildung 1 dargestellt. Die Zellüberlebensrate von Ast-Injektion und Eri-Kapsel auf den normalen PC12-Zellen ist in Abbildung 1A dargestellt. Die Zelllebensfähigkeit lag unter 95 % bei Ast-Injektion bei Konzentrationen von mehr als 12 μM (Abbildung 1A) und Eri-Kapsel bei Konzentrationen von mehr als 5 μM (Abbildung 1A), was darauf hindeutet, dass die ma...

Dieses Protokoll bietet eine Kombinationsstrategie von zwei Kräutern zur Behandlung verletzter PC12-Zellen. Das Protokoll bietet eine Referenz für die Optimierung der besten Applikationsweise der Traditionellen Chinesischen Medizin (TCM).

Erforschung der Zwei-Kräuter-Kombinationsstrategie zur Behandlung verletzter PC12-Zellen

In view of the advantages of the combination of traditional Chinese medicine (TCM) in the treatment of cerebral ischemia, we studied the differences in ...

Das Protokoll in dieser Studie bietet eine Kombinationsstrategie von zwei Kräutern zur Behandlung von Hypoxie-geschädigten PC12-Zellen und eine Referenz für die Optimierung des besten Kombinationsmodus von Kräutern. Diese Technik kann eine einfache, zuverlässige und effiziente In-vitro-Versuchsmethode zum Screening der wirksamen Wirkstoffkombination aus Kräutern gegen hypoxiale Zellen bieten. Diese Strategie kann auch angewendet werden, um die Komponentenkombinationen gegen hypoxiale Zellen aus anderen Kräuterzubereitungskombinationen zu screenen und ihren Schutzmechanismus zu veranschaulichen.Zunächst werden die PC12-Zellen alle zwei bis drei Tage bei 37 Grad Celsius in einem mit 5% Kohlendioxid angereicherten Inkubator subkultiviert, um eine Passage von 4 bis 8 für alle nachfolgenden Experimente zu erhalten. Behandeln Sie 70 bis 80% konfluente PC12-Zellen mit einem Milliliter 0,25% Trypsin und beobachten Sie die Zellen unter einem Mikroskop auf Zellablösung. Dann stoppen Sie die Trypsin-Verdauung, indem Sie drei Milliliter des gesamten Mediums hinzufügen.Schleudern Sie die übertragenen Zellen in einem 15-Milliliter-Zentrifugenröhrchen bei 840 x g für fünf Minuten. Nach dem Verwer

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JoVE Journal

Medicine

Medizin

Traumatische Verletzungen des Rückenmarks stört die Kommunikation mit dem Gehirn. Zur Wiederherstellung verloren Konnektivität nutzen wir ein peripherer Nerv Transplantat zu einem Substrat zur Regeneration von Fasern in Kombination bieten mit neurotrophen Faktoren und Matrix-modulierenden Enzyme hemmenden Moleküle zu entfernen, um Langstrecken-Wachstum zu fördern.

Die Kombination Peripheral Nerve Grafting und Matrix Modulation der Verletzte Rat Spinal Cord Repair

Neuronale Plastizität ist eine zunehmend erkannt, aber unzureichend verstanden Funktion des Magen-Darm (GI-Trakt). Hier im Beispiel der menschlichen Bauchspeicheldrüse, stellen wir einen in vitro-Assay Neuroplastizität für die Untersuchung der neuronalen Plastizität im GI-Trakt sowohl morphologischen und funktionellen Niveau.

Simulation von Bauchspeicheldrüsenneuroplastizität:<em&gt; In-vitro-</em&gt; Zwei-Neuron-Plastizität Assay

Verletzungen des Rückenmarks ist eine traumatische Erkrankung, die schwere Morbidität und hoher Sterblichkeit führt. In dieser Arbeit beschreiben wir im Detail eine Quetschung Modell der Verletzung des Rückenmarks in Mäusen, gefolgt von einer Transplantation von neuralen Stammzellen.

Neural Stem Cell Transplantation in Experimental Gequetscht Modell von Rückenmarksverletzungen

In mehrzelligen Organismen lösen sekretierte lösliche Faktoren Reaktionen von verschiedenen Zelltypen als Ergebnis der parakrinen Signalübertragung aus. Insert-Co-Kultursysteme bieten eine einfache Möglichkeit, die Veränderungen zu beurteilen, die durch sekretierte lösliche Faktoren in Abwesenheit von Zell-Zell-Kontakt vermittelt werden.

Entwicklung eines Insert Co-Kultursystem von zwei Cellular Typen in der Abwesenheit von Zell-Zell-Kontakt

Wir bieten Protokolle zur Evaluation von mesenchymalen Stammzellen isoliert von Zahnpulpa und Prostata-Krebs-Zell-Interaktionen basierend auf direkten und indirekten Co Kulturmethoden. Zustand Medium und Trans-gut Membranen eignen sich zur indirekten parakrine Aktivität zu analysieren. Seeding differentiell ist gefärbten Zellen zusammen ein geeignetes Modell für direkten Zell-Zell-Interaktion.

Mesenchymale Stammzellen isoliert von Pulpagewebe und Kokultur mit Krebszellen ihre Interaktionen zu untersuchen

In diesem Protokoll zeigen wir und erläutern, wie man humaninduzierte pluripotente Stammzellen zur Kardiomyozytendifferenzierung und -reinigung verwendet und weiter, wie die Transplantationseffizienz mit dem Rho-assoziierten Proteinkinase-Inhibitor verbessert werden kann. Vorbehandlung in einem Maus-Myokardinfarktmodell.

Verbesserung der Transplantation von humaninduzierten pluripotenten Stammzellen abgeleiteten Kardiomyozyten über eine transiente Hemmung der Rho Kinase Aktivität

Dieses Protokoll zeigt Methoden für ein Mausmodell der traumatischen Hirnverletzung mit offenem Schädel und die Transplantation kultivierter, humaninduzierter pluripotenter Stammzellen-abgeleiteter Zellen in die Verletzungsstelle. Verhaltens- und histologische Tests der Ergebnisse dieser Verfahren werden ebenfalls kurz beschrieben.

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Hier stellen wir ein Protokoll für die Anwendung eines elektrischen Nanosekunden-Pulsfeldes (nsPEF) zur Stimulation von Schwann-Zellen in vitro vor. Die Synthese- und Sekretionsfähigkeit relevanter Faktoren und Veränderungen des Zellverhaltens bestätigten die erfolgreiche Stimulation mit nsPEF. Die Studie gibt ein positives Bild von der Methode der peripheren Nervenregeneration.

Regulierung des Schwann-Zellwachstums durch ein gepulstes elektrisches Feld im Nanosekundenbereich für die periphere Nervenregeneration in vitro

In dieser Studie wurden nervenmimetische Komposit-Hydrogele entwickelt und charakterisiert, die zur Untersuchung und Nutzung des pro-regenerativen Verhaltens von aus Fettgewebe gewonnenen Stammzellen für die Reparatur von Rückenmarksverletzungen verwendet werden können.

Entwicklung kombinatorischer Therapeutika für Rückenmarksverletzungen mittels Stammzelltransfer

Molekulargenetische Strategie für die Suche nach de novo Mutationen häufigsten Erkrankungen wie Autismus und Schizophrenie.

Eine Strategie, um de novo Mutationen in Common Störungen wie Autismus und Schizophrenie Identifizieren

Lernen Sie eine Zweikräuter-Kombinationsstrategie zur Behandlung hypoxiegeschädigter PC12-Zellen in der Neuroforschung. Diese Methode bietet ein effizientes in-vitro-Screening-Verfahren für traditionelle chinesische Medizin.

Erforschung der Zwei-Kräuter-Kombinationsstrategie zur Behandlung verletzter PC12-Zellen

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