Name: 小鼠下颌磨牙拔牙窝愈合模型的建立 (视频) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-01-13T13:40:00.000+00:00
Duration: 4 min 19 s
Description: 学习建立小鼠下颌第一磨牙拔牙模型，用于研究颌骨愈合与再生机制。该方法通过观察Sp7表达及新生骨小梁形成，揭示骨再生过程的细胞机制，为牙科骨再生研究提供可靠的动物模型。

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本工作由国家自然科学基金 81825005（L.Y.）、82201045（F.Y.）和 82100982（F.L.），以及四川省科技计划项目 2021JDRC0144（F.L.）、2022JDRC0130（F.Y.）资助。

本研究中的所有动物实验均经四川大学华西口腔医学院伦理委员会（WCHSIRB-D-2017-041）审查和批准。本研究使用的成年C57BL/6小鼠购自商业来源（见材料表）。
1. 术前准备
<ol>
	<li>仪器准备
	<ol>
		<li>准备若干一次性注射器针头（26G、25G、23G；参见材料表），用作骨膜剥离器。将针头头部弯曲约20°–40°，如图1所示。</li>
		<li>准备带齿眼科镊作为持针钳。确保其尺寸适合小鼠磨牙，并能牢固夹持磨牙。理想镊子尺寸如图1A、B3所示。</li>
		<li>准备一根橡胶带（可从医用乳胶手套上撕下）作为开口器，泡沫板或软木板作为手术平台，头灯用于照亮手术区域，加热垫用于术后复苏。若术中发生出血，可将干燥棉球撕成小块&#160;并应用于手术部位&#160;。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>麻醉准备
	<ol>
		<li>可采用任何合适的麻醉方案对小鼠实施麻醉，通过“夹趾法”确认达到全身麻醉状态。麻醉后，应在小鼠眼部涂抹兽用眼膏。 
		&#8203;注：推荐的全身麻醉方案可为：腹腔注射（IP）氯胺酮（100 mg/kg）与赛拉嗪（10 mg/kg）进行诱导和维持； 
		本研究中&#160;采用异氟烷及1%戊巴比妥钠（50 mg/kg，IP）进行麻醉诱导与维持，并根据需要追加剂量。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>消毒与灭菌准备
	<ol>
		<li>使用75%乙醇喷雾器对手术平台及开放空间上方进行消毒。每次对小鼠操作前，建议使用一套新的一次性针头。 
		注：带齿镊子可重复使用，可通过任何首选的&#160;方法（如高压蒸汽灭菌）进行灭菌。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. 手术过程
<ol>
	<li>小鼠及其下颌的固定
	<ol>
		<li>使用胶带将小鼠仰卧位固定于手术平台上。将两根26 G针沿眶耳平面固定，另两根26 G针轻松固定于下颌下方。</li>
		<li>将橡皮筋绕过针头并交叉穿过门齿，以保持口腔张开。轻轻将舌头拉出，并将其固定在手术侧对侧的橡皮筋下方，以防其遮挡视野（图1C）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>消除远中阻力
	<ol>
		<li>用镊子从近中夹住磨牙，将23 G针用力插入远中根的颊侧牙槽骨，形成间隙。 
		注意：此步骤必须格外谨慎，若针插入过深，可能导致牙根折断。</li>
		<li>随后更换为25 G针，继续扩大间隙，并在缓慢向前及舌向（按小鼠解剖位置）旋转针头的同时，轻柔推进至根尖周区域，以将牙根压出牙槽窝。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>消除近中阻力
	<ol>
		<li>当获得足够空间后，使用23 G针插入牙根分叉处，向咬合方向抬起磨牙。在牢固夹持磨牙后，取另一根23 G针，将其用力插入舌侧近中牙周膜，形成间隙。</li>
		<li>随后更换为25 G针，缓慢向前及颊向旋转。若存在阻碍磨牙松动的深层阻力，可使用26 G针穿刺牙根尖端，并重复上述操作。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>最终拔除
	<ol>
		<li>拔除牙齿时，应确保牙冠明显高于咬合平面，并能清晰观察到两个完整的牙根。 
		注意：牙齿的松动（脱位）被认为是该操作中最疼痛且最易引起应激的阶段。在牙齿脱位前，应通过脚趾夹捏试验重新评估麻醉深度，并根据需要给予适量麻醉剂。&#160;</li>
	</ol>
	</li>
	<li>术后护理
	<ol>
		<li>拔牙后，使用干棉球压迫止血，复位舌头，皮下注射卡洛芬（5 mg/kg），并将小鼠置于恒温加热垫上，直至其从麻醉中恢复。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
小鼠下颌骨及拔牙窝的成像
<ol>
	<li>样品制备
	<ol>
		<li>通过颈椎脱位法处死小鼠。使用眼科剪刀剪除附着于下颌骨和颧弓的骨骼肌。从 throat 沿下颌骨下缘剪至升支，再剪至髁突后侧，然后将下颌骨向下拉并沿下切牙中线剪开。由此可获得两个分离的下颌骨。</li>
		<li>按照标准程序进行固定、脱钙和脱水17。包埋时17，确保咬合面与包埋盒边缘平行（见 材料表）。将下颌骨固定在包埋盒底部，使其下缘倾斜（图2）。 
		注：本方案可获得下颌骨区域的矢状切面。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>将样品固定在切片机上
	<ol>
		<li>调节切片机的标本夹，使髁突和牙冠侧多突出 5°–20°，以同时获得包含牙冠牙髓和根部牙髓的完整图像（图2）。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>制备切片 
	注：髁突始终是首先被切到的解剖结构。当髁突消失后，即可对磨牙区域进行多层切片。
	<ol>
		<li>将切片机切片厚度设为 5 µm，每八片收集一次，并在最后一片中寻找牙本质。若首次出现的是牙冠牙本质而无根尖牙本质，则调整标本夹使根部区域突出；反之亦然。</li>
	</ol>
	</li>
	<li>收集切片 
	注：当牙本质在牙冠和根尖区域均等出现时，表明切片角度已合适。
	<ol>
		<li>沿此方向继续切片，并在显微镜下观察切片，直至牙冠和牙根中均可见牙髓。当石蜡样品表面出现磨牙轮廓模糊的影像时，开始收集切片17。</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Mamoun, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dry+socket+etiology%2C+diagnosis%2C+and+clinical+treatment+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Korean+Association+of+Oral+and+Maxillofacial+Surgeons%22%5BJournal%5D)">Dry socket etiology, diagnosis, and clinical treatment techniques.</a> Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons. 44 (2), 52-58 (2018).</li>
<li>Laraki, M., Chbicheb, S., El Wady, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolitis%3A+review+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22Odonto-Stomatologie+Tropicale+%3D+Tropical+Dental+Journal%22%5BJournal%5D)">Alveolitis: review of the literature.</a> Odonto-Stomatologie Tropicale = Tropical Dental Journal. 35 (139), 19-25 (2012).</li>
<li>Soundia, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteonecrosis+of+the+jaws+%28ONJ%29+in+mice+after+extraction+of+teeth+with+periradicular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Osteonecrosis of the jaws (ONJ) in mice after extraction of teeth with periradicular disease.</a> Bone. 90, 133-141 (2016).</li>
<li>Araújo, M. G., Silva, C. O., Misawa, M., Sukekava, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+socket+healing%3A+what+can+we+learn%5BTitle%5D)+AND+%22Periodontology+2000%22%5BJournal%5D)">Alveolar socket healing: what can we learn.</a> Periodontology 2000. 68 (1), 122-134 (2015).</li>
<li>Hojo, H., Ohba, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sp7+Action+in+the+skeleton%3A+its+mode+of+action%2C+functions%2C+and+relevance+to+skeletal+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Sp7 Action in the skeleton: its mode of action, functions, and relevance to skeletal diseases.</a> International Journal of Molecular Sciences. 23 (10), 5647(2022).</li>
<li>Zhou, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+functions+of+Osterix+are+required+for+bone+growth+and+homeostasis+in+postnatal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Multiple functions of Osterix are required for bone growth and homeostasis in postnatal mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 107 (29), 12919-12924 (2010).</li>
<li>Ito, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathological+differences+in+the+bone+healing+processes+between+tooth+extraction+socket+and+femoral+fracture%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+Reports%22%5BJournal%5D)">Pathological differences in the bone healing processes between tooth extraction socket and femoral fracture.</a> Bone Reports. 16, 101522(2022).</li>
<li>Vasak, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+bone+apposition+to+hydrophilic+and+hydrophobic+titanium+implant+surfaces%3A+a+histologic+and+histomorphometric+study+in+minipigs%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Oral+Implants+Research%22%5BJournal%5D)">Early bone apposition to hydrophilic and hydrophobic titanium implant surfaces: a histologic and histomorphometric study in minipigs.</a> Clinical Oral Implants Research. 25 (12), 1378-1385 (2014).</li>
<li>Araújo, M. G., Lindhe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dimensional+ridge+alterations+following+tooth+extraction.+An+experimental+study+in+the+dog%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Periodontology%22%5BJournal%5D)">Dimensional ridge alterations following tooth extraction. An experimental study in the dog.</a> Journal of Clinical Periodontology. 32 (2), 212-218 (2005).</li>
<li>Kim, I. -S., Ki, H. -C., Lee, W., Kim, H., Park, J. -B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+systemically+administered+bisphosphonates+on+bony+healing+after+tooth+extraction+and+osseointegration+of+dental+implants+in+the+rabbit+maxilla%5BTitle%5D)+AND+%22The+International+Journal+of+Oral+%26+Maxillofacial+Implants%22%5BJournal%5D)">The effect of systemically administered bisphosphonates on bony healing after tooth extraction and osseointegration of dental implants in the rabbit maxilla.</a> The International Journal of Oral & Maxillofacial Implants. 28 (5), 1194-1200 (2013).</li>
<li>Kanyama, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Connective+tissue+growth+factor+expressed+in+rat+alveolar+bone+regeneration+sites+after+tooth+extraction%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Oral+Biology%22%5BJournal%5D)">Connective tissue growth factor expressed in rat alveolar bone regeneration sites after tooth extraction.</a> Archives of Oral Biology. 48 (10), 723-730 (2003).</li>
<li>Zhou, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+IFT140+in+early+bone+healing+of+tooth+extraction+sockets%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+Diseases%22%5BJournal%5D)">The role of IFT140 in early bone healing of tooth extraction sockets.</a> Oral Diseases. 28 (4), 1188-1197 (2022).</li>
<li>Apaza Alccayhuaman, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FasL+is+required+for+osseous+healing+in+extraction+sockets+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">FasL is required for osseous healing in extraction sockets in mice.</a> Frontiers in Immunology. 12, 678873(2021).</li>
<li>Avivi-Arber, L., Avivi, D., Perez, M., Arber, N., Shapira, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+bone+healing+at+tooth+extraction+sites+in+CD24-deficient+mice%3A+A+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Impaired bone healing at tooth extraction sites in CD24-deficient mice: A pilot study.</a> PLoS One. 13 (2), 0191665(2018).</li>
<li>Vieira, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intramembranous+bone+healing+process+subsequent+to+tooth+extraction+in+mice%3A+micro-computed+tomography%2C+histomorphometric+and+molecular+characterization%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Intramembranous bone healing process subsequent to tooth extraction in mice: micro-computed tomography, histomorphometric and molecular characterization.</a> PLoS One. 10 (5), 0128021(2015).</li>
<li>Min, K. -K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+resveratrol+on+bone-healing+capacity+in+the+mouse+tooth+extraction+socket%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Periodontal+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of resveratrol on bone-healing capacity in the mouse tooth extraction socket.</a> Journal of Periodontal Research. 55 (2), 247-257 (2020).</li>
<li>Yu, F., Li, F., Zheng, L., Ye, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenetic+controls+of+Sonic+hedgehog+guarantee+fidelity+of+epithelial+adult+stem+cells+trajectory+in+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">Epigenetic controls of Sonic hedgehog guarantee fidelity of epithelial adult stem cells trajectory in regeneration.</a> Science Advances. 8 (29), (2022).</li>
<li>Kuroshima, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+noncultured+stromal+vascular+fraction+cells+of+adipose+tissue+ameliorates+osteonecrosis+of+the+jaw-like+lesions+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+bone+and+Mineral+Research%22%5BJournal%5D)">Transplantation of noncultured stromal vascular fraction cells of adipose tissue ameliorates osteonecrosis of the jaw-like lesions in mice.</a> Journal of bone and Mineral Research. 33 (1), 154-166 (2018).</li>
<li>Ahel, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Forces+that+fracture+teeth+during+extraction+with+mandibular+premolar+and+maxillary+incisor+forceps%5BTitle%5D)+AND+%22The+British+Journal+of+Oral+%26+Maxillofacial+Surgery%22%5BJournal%5D)">Forces that fracture teeth during extraction with mandibular premolar and maxillary incisor forceps.</a> The British Journal of Oral & Maxillofacial Surgery. 53 (10), 982-987 (2015).</li>
</ol>

本文包含了所有原始数据和图像。作者声明无利益冲突。

小鼠牙槽骨愈合模型是揭示骨愈合与再生潜在机制的重要方法，最终有助于解决临床难题。已有研究证实了切牙拔除模型和上颌磨牙拔除模型的可行性，但尚未见关于下颌第一磨牙拔除模型的应用报道13,17,18。然而，切牙对啮齿类动物的生存至关重要，其损伤可能致命。此外，由于上颌骨的骨小梁结构比下颌骨更为疏松，因此在愈合过程中其潜在机制可能存在一定差异。因此，建立一种可行的下颌第一磨牙拔除模型十分必要。
拔牙过程中最重要的考虑因素是避免牙根折断19。小鼠的磨牙体积小且脆弱，下颌中残留的牙根无法被完全拔除。然而，在本实验方案中，整个手术过程中均存在牙根折断的风险。因此，必须牢固夹持磨牙，并严格控制施加的力度。具体而言，在去除远中阻力时，需注意不要压碎牙冠；在去除近中阻力时，应小心避免针头从牙根分叉处突然滑脱；在使用针头制造间隙时，需明确间隙应位于牙根与牙槽突之间，因此不...

拔牙后牙槽窝愈合是一种常见的临床情况，可能因愈合不良导致不理想的并发症，如牙槽窝出血、干槽症，甚至颌骨骨髓炎1,2,3。这些合并症可能影响患者的生活质量，更严重的是，由于大量骨量丧失，可能严重影响后续的修复治疗4。尽管牙槽窝愈合的各个阶段已得到阐明，但在临床拔牙术后面对各种预后挑战时，现有知识仍不足以有效指导临床护理4。
已有许多基于动物模型的研究，旨在更深入地理解牙槽窝愈合过程中的潜在机制，并避免上述情况的发生。Sp7是成骨细胞分化的关键调控因子，在骨骼发育、骨稳态及骨再生过程中发挥重要作用5,6。合理的牙槽窝愈合模型能够揭示创伤后Sp7在骨再生中的冗余性。此外，与长骨骨折愈合不同，牙槽窝的愈合过程仅涉及一种成骨方式，即膜内成骨7。这使得动物拔牙模型成为研究种植体相关治疗的理想选择，因为种植体的骨整合遵循相同的成骨规律8。
几十年来，由于大鼠、兔子和狗的牙齿较大，便于操作，因此常被用于牙齿拔除模型的研究9,10,11。然而，随着基因修饰技术需求的增长，以及小鼠相较于其他动物更接近人类的遗传背景，小鼠正越来越多地被用于建立牙齿拔除模型。由此，研究人员可利用基因修饰小鼠揭示特定细胞群体在拔牙窝愈合过程中的作用，而不仅限于观察表型变化12。在小鼠拔牙窝模型中，既往研究已报道了上颌牙齿及切牙拔除窝的建立过程与愈合机制13,14,15,16。然而，不同研究中关于预后愈合模式以及检测和观察时间点的设定可能存在差异。因此，亟需建立统一的标准，以指导学者构建小鼠拔牙窝愈合模型。
本研究旨在针对上述问题建立一种可行的小鼠牙槽窝愈合模型。小鼠下颌磨牙在形态特征上与上颌磨牙及切牙存在显著差异，具有独特的优缺点。由于目前专注于小鼠下颌骨的研究模型尚属空白，本实验方案致力于提供一种完整的小鼠下颌第一磨牙拔除方法。我们希望本方案能为基础研究人员提供新思路，以揭示牙槽窝愈合的潜在机制，并为临床护理提供指导。

<table><tbody><tr><td>23/25/26 号针头</td><td>成都新津士峰医疗器械 &amp;安普&仪器有限公司</td><td>SB1-074(IV)</td><td></td></tr><tr><td>C57/B6J&amp;nbsp;</td><td>中国成都 gempharmatech 实验动物公司</td><td>C57/B6J</td><td></td></tr><tr><td>DAPI染色液&amp;nbsp;</td><td>Beyotime&amp;nbsp;</td><td>货号 C1005</td><td></td></tr><tr><td>包埋盒</td><td>CITOTEST 科学</td><td>80106-1100-16</td><td></td></tr><tr><td>苏木精和伊红染色试剂盒</td><td>Biosharp</td><td>BL700B</td><td></td></tr><tr><td>异氟烷</td><td>RWD生命科学有限公司</td><td>R510-22-10</td><td></td></tr><tr><td>马松&amp;rsquo;s Trichrome 染色试剂盒</td><td>Solarbio</td><td>G1340</td><td></td></tr><tr><td>切片机&amp;nbsp;</td><td>Leica</td><td>RM2235</td><td></td></tr><tr><td>戊巴比妥钠</td><td>华厦化学试剂有限公司</td><td>2018042001</td><td></td></tr><tr><td>兔多克隆&amp;nbsp;</td><td>抗Sp7&amp;nbsp;</td><td>Abcam 货号 ab22552</td><td></td></tr><tr><td>镊子</td><td>成都新津施丰医疗器械 &amp;安普&仪器有限公司</td><td>SB2-115</td><td></td></tr></tbody></table>

小鼠下颌磨牙拔牙窝愈合模型的建立

The Establishment of a Murine Mandibular Molar Extraction Socket Healing Model

本研究介绍了小鼠下颌磨牙拔除模型的建立，旨在为研究牙槽骨再生和膜内成骨提供一种可行的实验模型。采用C57/J6小鼠，拔除下颌第一磨牙以建立该模型。分别在术后1周和4周处死动物，并取双侧下颌骨进行后续分析。通过连续立体显微观察、组织学评估及免疫荧光染色验证手术成功。术后即刻的立体显微图像显示拔牙窝为空腔状态。术后1周的苏木精-伊红（H&amp;#38;E）染色及术后4周的Masson染色结果显示，原牙根所在区域分别被部分和完全新生骨小梁填充。免疫荧光染色显示，与稳态侧相比，术后1周Sp7表达升高，提示牙槽窝内成骨活动活跃。上述结果共同表明，该小鼠拔牙窝愈合模型具有可行性。未来研究颌骨缺损或拔牙窝愈合机制时可采用此方法。

为阐明此方法的实际应用，我们分别拔除两只健康 C57BL/6 小鼠（3 月龄，均为雌性）的右侧下颌第一磨牙，并分别追踪观察 1 周和 4 周。未受损的左侧下颌骨用作健康对照。 图 1A 展示了该手术器械的具体特征，包括26-23 G针头和带齿眼科镊。26 G针头尖端被去除并弯曲。25 G针头弯曲角度约为25度。&#176; 在穿刺点处。23 G 针是手术的关键，其针尖需弯折约 25 度。&#176; 及 35&#176;分别于该点处图 1B1B2）。镊子具有一个1毫米长的齿，其形状与小鼠臼齿相匹配。图 1B3). 图1C 显示小鼠术前状态。关键要点在于头部周围四个固定针的位置，以及将舌头固定在左侧橡皮带下方。
图3A 显示右侧下颌第一磨牙的位置与形态。 ...

本方案逐步演示了如何从小鼠中提取下颌第一磨牙，为专注于颌骨愈合与再生研究的研究人员提供了一种替代方法。

本研究介绍了小鼠下颌磨牙拔除模型的建立，旨在为研究牙槽骨提供一种可行的模型……

本方案提供了一种小鼠下颌磨牙拔除模型，该模型在现有的骨再生研究中鲜有报道。建立小鼠下颌磨牙拔除模型是必要的，因为下颌骨在不同干预组之间具有更高的可比性和一致性。该技术的意义并不涉及任何疾病的治疗应用。然而，通过帮助研究人员审视这一过程背后的机制，该技术可能在长期范围内促进临床愈合和下颌骨再生。该技术的开发旨在支持相关研究，揭示现有愈合与再生的机制。遗憾的是，该方法无法应用于其他系统。用镊子从内侧夹住磨牙，开始消除麻醉小鼠的远中阻力。然后将23号针头强行插入远中根的颊侧牙槽骨并形成间隙。接着更换为25号针头，继续扩大间隙。缓慢旋转针头并向根尖方向及舌侧推进，轻柔地接近根尖区，以将牙根从牙槽窝中推出。为消除近中阻力，将一支23号针头插入牙根分叉处，向上抬升磨牙。在牢固固定磨牙后，取另一支23号针头，将其用力插入舌侧近中牙周膜，以形成间隙。然后使用25号针头，缓慢向前方和颊侧旋转。如果存在某些深层阻碍导致磨牙脱位困难，可使用26号针头刺入牙根尖端，并重复操作。在最终拔除时，应确保牙冠上升至咬合平面以上，并能清晰看到两根完整的牙根被完整拔出。成功拔除下颌第一磨牙后，使用干棉球压迫止血，复位舌头，给予镇痛处理，并将小鼠置于恒温加热垫上，直至其从麻醉状态恢复。拔牙后，牙槽窝立即被血凝块充满。随后对牙槽窝的愈合过程进行为期一周的观察。 形成了一些类似海绵的松质骨，但血凝块仍然存在。在愈合过程中，两周后牙槽内被海绵状骨组织填充，表明再生过程已完成。成骨细胞分化的一个主调控因子 Sp7 在骨髓细胞中广泛表达，这些细胞位于骨形成前沿的边缘区域。在稳态条件下，骨小梁结构连续且致密，骨髓细胞团块如岛屿般散在分布。术后一周，大量表达 Sp7 的细胞填充拔牙创口，周围散布着新形成的骨小梁。术后四周，情况发生逆转，骨小梁大面积融合，形成以骨小梁为主的结构。表达 Sp7 的细胞活性下降至接近稳态水平。该技术还可用于演示新生再生过程。通过提供一种新的小鼠模型，该技术可帮助研究人员揭示现有愈合与再生过程的潜在机制。

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Biology

生物学

本文介绍了一种在兔子中进行的外科手术方案，旨在评估骨替代材料在骨再生能力方面的性能。通过将聚醚醚酮（PEEK）圆柱体固定在兔颅骨上，可在活体或安乐死动物中评估材料所诱导的成骨传导、成骨诱导、成骨生成以及血管生成作用。...

用于评估骨替代材料中骨生长与新生血管形成的兔颅骨骨增量模型

本文概述了建立具有口鼻瘘小鼠模型的逐步操作流程。通过使用加热的眼科烧灼器损伤硬腭中线部分，导致口腔与鼻腔之间形成开口，从而建立口鼻瘘。...

建立经口鼻瘘小鼠模型

本文介绍了一种利用创新性开口器在小鼠中建立牙髓炎模型的简化方案，并随后进行组织学分析。...

建立用于牙髓炎研究的新型开口器小鼠牙髓暴露模型

本文逐步演示了一种在小鼠上颌模型上可操作的正畸牙齿移动方案。通过每一步骤的详细说明和可视化展示，研究人员可掌握该模型，并稍作修改后应用于自身的实验需求。...

小鼠上颌正畸模型的建立

本报告介绍了一种小鼠结扎线诱导种植体周围炎的实验模型。我们详细描述了所有手术步骤，包括动物的术前和术后管理、拔牙、种植体植入以及结扎线诱导的种植体周围炎的建立过程。...

小鼠结扎诱导种植体周围炎的实验模型

本方案介绍了一种全面且高效的下颌骨修复分析方法。我们描述了一种在小鼠模型中建立非稳定型下颌骨骨折的可重复技术，可在组织损伤和骨量丢失最小化的情况下，用于分析软骨内成骨修复过程。...

小鼠模型中非固定性下颌骨骨折的微创技术

本研究的目的是建立一种安全且可重复的手术方法，用于对Ambystoma...

用于研究Ambystoma mexicanum模型中颅面组织再生的下颌损伤模型的设计与标准化

小鼠肾移植是一种技术上具有挑战性的手术，需要精细的术后护理和治疗才能成功。...

小鼠肾移植手术步骤

本视频演示了如何使用一种快速且可靠的模型来研究心肌缺血的病理生物学和病理生理学过程。...

LAD结扎：一种小鼠心肌梗死模型

本视频方案演示了一种通过将转基因导入精子细胞核，随后将其移植到未受精卵中，从而生成转基因Xenopus...

通过限制性内切酶介导的整合与核移植技术生产转基因Xenopus laevis

学习建立小鼠下颌第一磨牙拔牙模型，用于研究颌骨愈合与再生机制。该方法通过观察Sp7表达及新生骨小梁形成，揭示骨再生过程的细胞机制，为牙科骨再生研究提供可靠的动物模型。

小鼠下颌磨牙拔牙窝愈合模型的建立

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