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DOI: 10.3791/64871-v
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This article presents a simple and efficient protocol for dissociating pancreatic tissue to isolate viable single cells. The method is applicable to various stages of pancreatic malignancy, aiding in the study of pancreatic tumors and pre-malignant lesions.
Metaplastische Zellen der Bauchspeicheldrüse sind Vorläufer bösartiger Zellen, aus denen Pankreastumoren entstehen. Die Isolierung intakter, lebensfähiger Pankreaszellen ist jedoch eine Herausforderung. Hier stellen wir eine effiziente Methode zur Dissoziation von Pankreasgewebe vor. Die Zellen können dann für die Einzelzell-RNA-Sequenzierung (scRNA-seq) oder für die zwei- oder dreidimensionale Co-Kultivierung verwendet werden.
Das demonstrierte Dissoziationsprotokoll für Pankreasgewebe ist einfach und bietet ein Werkzeug zur Isolierung lebensfähiger Einzelzellen aus Pankreasgewebe in verschiedenen Stadien des Malignitätsprozesses, einschließlich solider Tumore. Die Wiederherstellung intakter und lebensfähiger Azinuszellen ist eine große Herausforderung. Das Protokoll kann lebensfähige Einzelzellen aus normaler Bauchspeicheldrüse, Bauchspeicheldrüse mit prämalignen Läsionen oder Bauchspeicheldrüsentumoren mit zahlreichen Stroma- und Immunzellen gewinnen.
Die Verwendung dieses Protokolls zur Untersuchung menschlicher Bauchspeicheldrüsentumore oder entzündeter Bauchspeicheldrüsen könnte bei der Untersuchung dieser Krankheiten helfen, um neue Biomarker und Behandlungen zu finden. Die Methode ist einfach anzuwenden und kann mit minimaler Übung die gewünschten Ergebnisse liefern. Dieses Video wird helfen, die kleinen Details des Protokolls zu sehen.
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