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DOI: 10.3791/65326-v
Rafeeh Dinani1,2, Emmy Manders1,2,3, Michiel Helmes1,2,3, Lili Wang4, Bjorn C. Knollmann4, Diederik W. D. Kuster1,2, Jolanda van der Velden1,2
1Division of Physiology, Amsterdam UMC,Vrije University, 2Heart Failure & Arrhythmias,Amsterdam Cardiovascular Sciences, 3CytoCypher BV, 4Division of Clinical Pharmacology,Vanderbilt School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study introduces a user-friendly method to measure the contractility and calcium handling of human-induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes (hiPSC-CMs). The approach allows researchers to rapidly assess the effects of genetic mutations and pharmacological interventions, demonstrating its utility in drug screening and understanding cellular mechanisms.
Hier wird eine etablierte Methode beschrieben, um Kontraktilitäts- und Kalziummessungen in humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten Kardiomyozyten unter Verwendung einer optischen Plattform durchzuführen. Diese Plattform ermöglicht es den Forschern, die Auswirkungen von Mutationen und die Reaktion auf verschiedene Reize schnell und reproduzierbar zu untersuchen.
Humane induzierte pluripotente Stammzellen aus Kardiomyozyten stellen ein leistungsfähiges Werkzeug dar, um mutationsvermittelte Veränderungen der Kardiomyozytenfunktion zu untersuchen und die Auswirkungen von Stressoren und medikamentösen Interventionen zu definieren. Es besteht ein Bedarf an einer Plattform, in der die Kontraktilität und die Kalziumhandhabung von humanen induzierten pluripotenten Stammzellen aus Kardiomyozyten auf benutzerfreundliche und reproduzierbare Weise gemessen werden können. Diese Methode ermöglicht es den Forschern, die Kontraktilität von humanen induzierten pluripotenten Stammzellen durch Pixelkorrelation zu untersuchen und intrazelluläre Kalziumtransienten gleichzeitig zu messen, indem die Zellen mit kalziumsensitivem Fluorophor beladen werden.
Durch die Verwendung dieser Plattform ist es möglich, paarweise Messungen in einer gut erhaltenen Temperaturumgebung und verschiedenen Plattenformaten durchzuführen und sofort auf die Daten zuzugreifen. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung zellulärer Pathomechanismen und bewertet die Wirkung von Verbindungen und die Funktionalität von humanen iPSC-abgeleiteten Kardiomyozyten, die im präklinischen Wirkstoff-Screening-Prozess hilfreich sein können.
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