Name: Normothermische isolierte Leberperfusion bei Schweinen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-06-09T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: Erfahren Sie die normotherme maschinelle Perfusion zur Erhaltung hochrisikoreicher Lebertransplantate im Schweinemodell. Diese Methode ermöglicht die Beurteilung der Organfunktion vor der Transplantation und reduziert hepatozelluläre Schäden.

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<meta charset="utf8"></head><body>Entwicklung und Validierung eines ex situ isolierten Leberperfusionsmodells für Schweine

<ol><li>Dunson, J. R., Bakhtiyar, S. S., Joshi, M., Goss, J. A., Rana, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intent-to-treat+survival+in+liver+transplantation+has+not+improved+in+3+decades+due+to+donor+shortage+relative+to+waitlist+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Intent-to-treat survival in liver transplantation has not improved in 3 decades due to donor shortage relative to waitlist growth.</a> Clinical Transplantation. 35 (10), e14433(2021).</li>
<li>Monbaliu, D., Pirenne, J., Talbot, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+transplantation+using+donation+after+cardiac+death+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hepatology%22%5BJournal%5D)">Liver transplantation using donation after cardiac death donors.</a> Journal of Hepatology. 56 (2), 474-485 (2012).</li>
<li>Croome, K. P., Taner, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+changing+landscapes+in+DCD+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Transplantation+Reports%22%5BJournal%5D)">The changing landscapes in DCD liver transplantation.</a> Current Transplantation Reports. 7 (3), 194-204 (2020).</li>
<li>Coffey, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+functional+warm+ischemia+time+on+DCD+liver+transplant+recipients%27+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The influence of functional warm ischemia time on DCD liver transplant recipients' outcomes.</a> Clinical Transplantation. 31 (10), (2017).</li>
<li>Meurisse, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outcomes+of+liver+transplantations+using+donations+after+circulatory+death%3A+A+single-center+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Outcomes of liver transplantations using donations after circulatory death: A single-center experience.</a> Transplantation Proceedings. 44 (9), 2868-2873 (2012).</li>
<li>Ruck, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+trends+in+utilization+and+outcomes+of+DCD+livers+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Temporal trends in utilization and outcomes of DCD livers in the United States.</a> Transplantation. 106 (3), 543-551 (2022).</li>
<li>Nasralla, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+randomized+trial+of+normothermic+preservation+in+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A randomized trial of normothermic preservation in liver transplantation.</a> Nature. 557 (7703), 50-56 (2018).</li>
<li>Blondeel, J., Monbaliu, D., Gilbo, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+liver+preservation%3A+Are+we+still+missing+pieces+of+the+puzzle%5BTitle%5D)+AND+%22Artificial+Organs%22%5BJournal%5D)">Dynamic liver preservation: Are we still missing pieces of the puzzle.</a> Artificial Organs. 47 (2), 248-259 (2022).</li>
<li>Gilbo, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porcine+liver+normothermic+machine+perfusion%3A+Methodological+framework+and+potential+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Direct%22%5BJournal%5D)">Porcine liver normothermic machine perfusion: Methodological framework and potential pitfalls.</a> Transplantation Direct. 8 (1), e1276(2021).</li>
<li>Maione, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porcine+isolated+liver+perfusion+for+the+study+of+ischemia+reperfusion+injury%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Porcine isolated liver perfusion for the study of ischemia reperfusion injury: A systematic review.</a> Transplantation. 102 (7), 1039-1049 (2018).</li>
<li>Gilbo, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coagulation+factors+accumulate+during+normothermic+liver+machine+perfusion+regardless+of+donor+type+and+severity+of+ischemic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Coagulation factors accumulate during normothermic liver machine perfusion regardless of donor type and severity of ischemic injury.</a> Transplantation. 106 (3), 510-518 (2021).</li>
<li>Butler, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+extracorporeal+porcine+liver+perfusion+for+72+hr%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Successful extracorporeal porcine liver perfusion for 72 hr.</a> Transplantation. 73 (8), 1212-1218 (2002).</li>
<li>Eshmuminov, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+integrated+perfusion+machine+preserves+injured+human+livers+for+1+week%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">An integrated perfusion machine preserves injured human livers for 1 week.</a> Nature Biotechnology. 38 (2), 189-198 (2020).</li>
<li>Xu, J., Buchwald, J. E., Martins, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review+of+current+machine+perfusion+therapeutics+for+organ+preservation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Review of current machine perfusion therapeutics for organ preservation.</a> Transplantation. 104 (9), 1792-1803 (2020).</li>
<li>Martins, P. N., Turco, S. D., Gilbo, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organ+therapeutics+during+ex-situ+dynamic+preservation.+a+look+into+the+future%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Organ therapeutics during ex-situ dynamic preservation. a look into the future.</a> European Journal of Transplantation. 1, 63-78 (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Alaris GH Plus Spritzenpumpe</td><td>BD Care Fusion</td><td>80023 UN 01-G</td><td></td></tr><tr><td>Anästhesiegerät</td><td>Dr&auml; Ger</td><td>Titus</td><td></td></tr><tr><td>Arterienkatheter Cavafix Certo</td><td>Braun, Melsungen, Deutschland</td><td>BRAU4152557</td><td></td></tr><tr><td>Blutgasanalysator</td><td>Strahlungsmesser</td><td>ABL815</td><td></td></tr><tr><td>Calciumgluconat 10%</td><td>Braun, Melsungen, Deutschland</td><td>570/13596667/1214</td><td></td></tr><tr><td>Kapnograph</td><td>Dr&auml; Ger</td><td>Scio</td><td></td></tr><tr><td>Zell-Schoner</td><td>Medtronic</td><td>Automatisches Protokollieren</td><td></td></tr><tr><td>Kreiselpumpe Biomedicus</td><td>Medtronic</td><td>85315 REV 3.0</td><td></td></tr><tr><td>Zentrifuge Rotina 420R Hettich</td><td>VWR</td><td>521-1156</td><td></td></tr><tr><td>Maßgeschneiderter Perfusionskreislauf</td><td>Medtronic</td><td>M323901C</td><td></td></tr><tr><td>Einweg-Set Zellsparer</td><td>Medtronic</td><td>ATLS24</td><td></td></tr><tr><td>DLP Einstufige Venenkanüle, gerade 20F</td><td>Medtronic</td><td>66120</td><td></td></tr><tr><td>Epoprostenol</td><td>GlaxoSmithKline Belgium, Wavre, Belgien</td><td>Flolan</td><td></td></tr><tr><td>Fentanyl-Janssen 0,05 mg/ml</td><td>Janssen</td><td>Nr. HK-08700</td><td></td></tr><tr><td>Strömungssensor BioPro TT</td><td>Em-Tec</td><td>12271</td><td></td></tr><tr><td>Formaldehyd 4%</td><td>VWR</td><td>VWRK4078.9005</td><td></td></tr><tr><td>Gefrierschrank -80 &Grad; C</td><td>New Brunswick Scientific</td><td>U570-86</td><td></td></tr><tr><td>Kühlschrank</td><td>Liebherr</td><td>BECHER 3513</td><td></td></tr><tr><td>Geloplasma</td><td>Fresenius-Kabi, Bad Homburg, Deutschland</td><td>Freeflex</td><td></td></tr><tr><td>Kühler der Heizung</td><td>St&ouml; ckert-Shiley, Sorin-Gruppe</td><td>16-02-1950</td><td></td></tr><tr><td>Heparin 5000 IE/mL</td><td>Leo Pharma, Ballerup, Dänemark</td><td>HeparinLeo</td><td></td></tr><tr><td>Kanüle der Leberarterie</td><td>Medtronic</td><td>BIO-MEDICUS 12F</td><td></td></tr><tr><td>IGL-1 Lösung zur Organkonservierung</td><td>Institut Georges Lopez</td><td>IGL-1/1000/D</td><td></td></tr><tr><td>Inline-Blutgasanalysator</td><td>TERUMO</td><td>Kalibrator 3MCDI 540/CDI 500</td><td></td></tr><tr><td>Insulin 200 IE Actrapid</td><td>Novo Nordisk, Dagsvaerd, Dänemark</td><td>MEDI-00018</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran 1000 mg/g Inhalationsdampf</td><td>Chanelle Pharma</td><td>Iso-Vet</td><td></td></tr><tr><td>IV-Katheter BD Insyte-W 20 G</td><td>BD</td><td>381334</td><td></td></tr><tr><td>Behälter für flüssigen Stickstoff</td><td>KGW Isotherm</td><td>Nr. S22</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 250CM M3 USP2/0 ohne Nadel</td><td>JNJ Medizin</td><td>Nr. F4503</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 250CM M3.5 USP0 ohne Nadel</td><td>JNJ Medizin</td><td>Nr. F4504</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 5X70CM M3.5 USP0 unvernadelt</td><td>JNJ Medizin</td><td>EH6935H</td><td></td></tr><tr><td>Mersilene 6X45CM M3 USP2/0 unvernadelt</td><td>JNJ Medizin</td><td>EH6734H</td><td></td></tr><tr><td>Mikropipetten 1000 & Mikro; L</td><td>Socorex</td><td>82,51,000</td><td></td></tr><tr><td>Überwachung</td><td>Siemens</td><td>SC 8000</td><td></td></tr><tr><td>Plasmalyte Viaflo</td><td>Baxter</td><td>Plasmalyte Viaflo</td><td></td></tr><tr><td>Pfortader-Kanüle</td><td>BERUHIGTE LABORE</td><td>18F RV-40018</td><td></td></tr><tr><td>Druckfühler</td><td>St&ouml; ckert-Shiley, Sorin-Gruppe</td><td>22-06-2000</td><td></td></tr><tr><td>Druck-Servoregler</td><td>Medtronic</td><td>BM 9505-2</td><td></td></tr><tr><td>Prolene 4:0</td><td>JNJ Medizin</td><td>EH7151H</td><td></td></tr><tr><td>Rollenpumpe</td><td>Cobe Century USA</td><td>468048-000 REV C</td><td></td></tr><tr><td>Natriumbicarbonat 8,4 %</td><td>Braun, Melsungen, Deutschland</td><td>362 2339</td><td></td></tr><tr><td>Natriumtaurocholat</td><td>Sigma Aldrich, Burlington, Vereinigte Staaten von Amerika</td><td>86339</td><td></td></tr><tr><td>Chirurgisches Skalpell Nr. 24</td><td>Swann Morton</td><td>0211</td><td></td></tr><tr><td>Venenkatheter, 3 Lumen; 12FR</td><td>PFEIL</td><td>AK-12123-F</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl Vio 250CM M2 USP3/0 Gigapak ohne Nadel</td><td>JNJ Medizin</td><td>V1205G</td><td></td></tr><tr><td>Xylazin 2%</td><td>VMD Viehzucht Pharma</td><td>XYL-M 2%</td><td></td></tr><tr><td>Zinacef Cefuroxim 750 mg</td><td>GlaxoSmithKline Belgium, Wavre, Belgien</td><td>NDC 0173-0353-32</td><td></td></tr><tr><td>Zoletil 100</td><td>Virbac</td><td>Zoletil 100</td><td></td></tr></tbody></table>

normothermische isolierte leberperfusion bei schweinen

Porcine Normothermic Isolated Liver Perfusion

Das vorgestellte Perfusionsprotokoll nutzt die Selbstregulation des Blutflusses der Leber, um stabile hämodynamische Bedingungen für bis zu 24 h zu erreichen und die physiologische Verteilung des Blutflusses in der Pfortader und Leberarterie zu simulieren. Abbildung 1 zeigt einen schematischen Überblick über den Perfusionskreislauf. Abbildung 2A zeigt eine konsistente Verteilung des Blutflusses, wobei die Pfortader und die Leberarterie etwa 75 % bzw. 25 % des ge...

Normothermische isolierte Leberperfusion bei Schweinen

Porcine models of liver ex situ normothermic machine perfusion (NMP) are increasingly being used in transplant research. Contrary to rodents, porcine ...

porcine-normothermic-isolated-liver-perfusion

Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Eine Technik zur Isolierung Portal Fibroblasten aus Rattenleber beschrieben. Lebern werden perfundiert und...

Isolierung von Ratten-Portal Fibroblasten durch<em&gt; In-situ</em&gt; Leberperfusion

Die Untersuchung der Physiologie der tierischen Organe kann durch die Durchführung eines experimentellen ex vivo Perfusionssystems erreicht werden. Die Hinzufügung einer Schweineniere als homöostatisches Organ zu unserem zuvor entwickelten ex vivo Leberperfusionsmodell kann ein wichtiger Schritt sein, um ein besseres physiologisches Milieu zu erreichen.

Schritte für das autologe ex vivo perfundierte Leber-Nieren-Experiment an Schweinen

Rand Transplantate, wie Fettleber, Transplantate von älteren Spendern oder Lebern nach Herztod (DCD) abgerufen tolerieren herkömmlichen, Kälte statische Speicher nur schlecht. Wir entwickelten ein neuartiges Modell der subnormothermic ex vivo Perfusion der Leber für die Erhaltung, Bewertung und Instandsetzung von Randlebertransplantationen vor der Transplantation.

Technik der Subnormothermic<em&gt; Ex-vivo-</em&gt; Leberperfusion für die Lagerung, Bewertung, Reparatur von Marginal Lebertransplantate

Wir beschreiben ein Verfahren zur ex vivo-Maschine Perfusion von menschlichen Lebertransplantate in subnormothermic Temperatur (21 ° C).

Funktionale Menschliche Leber Erhaltung und Rückgewinnung mittels Subnormothermic Maschine Perfusion

Fehlt ein wichtiger Leber Geber, und Kriterien für die Leber Spender wurden erweitert. Normothermic ex Vivo Leber Perfusion (NEVLP) wurde entwickelt, um zu bewerten und Organfunktion zu ändern. Diese Studie zeigt einem Rattenmodell der NEVLP und testet, ob der pegylierten-Katalase, um Verletzungen der Leber Erhaltung zu mildern.

Ein kleines Tier Modell der Ex Vivo Normothermic Leber Perfusion

Dieses Protokoll beschreibt die Verwendung eines speziellen intravenösen Katalysators, eines standardisierten sterilen Einwegschlauchs, einer Temperaturregelung, die durch Echtzeitüberwachung ergänzt wird, und eines Alarmsystems für ein zweistufiges Kollagenase-Perfusionsverfahren, um die Konsistenz der Lebensfähigkeit, Ausbeute und Funktionalität isolierter primärer Rattenhepatozyten zu verbessern.

Isolierung primärer Rattenhepatozyten mit Multiparameter-Perfusionskontrolle

In diesem Protokoll wird ein Modell der porcinen orthotopen Lebertransplantation nach statischer Kältelagerung von Spenderorganen für 20 h ohne Verwendung eines veno-venösen Bypasses während der Anpflanzung beschrieben. Der Ansatz verwendet eine vereinfachte Operationstechnik mit Minimierung der anhepatischen Phase und ausgefeiltem Volumen- und Vasopressormanagement.

Schweinelebertransplantation ohne veno-venösen Bypass als erweitertes Kriterien-Spendermodell

Für die Leber von Mäusen wurde ein normothermisches ex vivo Leberperfusionssystem (NEVLP) entwickelt. Dieses System erfordert Erfahrung in der Mikrochirurgie, ermöglicht aber reproduzierbare Perfusionsergebnisse. Die Möglichkeit, Mäuselebern zu verwenden, erleichtert die Untersuchung molekularer Signalwege zur Identifizierung neuartiger Perfusat-Additive und ermöglicht die Durchführung von Experimenten, die sich auf die Reparatur von Organen konzentrieren.

Normotherme ex vivo Lebermaschinenperfusion bei Mäusen

Dieses Protokoll beschreibt die Methodik zur Etablierung eines Schweinemodells unter Verwendung einer variablen temperaturgesteuerten maschinellen Perfusion (MP) zur Erhaltung der Spenderleber, gefolgt von einer orthotopen Lebertransplantation (OLTx). Ziel ist es, die Erfolgsrate von OLTx mittels Spenderspende nach Kreislauftod (DCD) Leber zu fördern und ein stabiles Modell zu etablieren.

Erhalt der Schweinespendeleber nach zirkulatorischem Tod (DCD) durch Perfusion und orthotope Lebertransplantation

Hier stellen wir ein Protokoll für ein quelloffenes, modifizierbares normothermisches ex vivo-Perfusionssystem vor, das entwickelt wurde, um die hohen Kosten und die begrenzte Flexibilität bestehender Plattformen zu überwinden und einen zugänglicheren, kosteneffizienteren und iterativen Einsatz in der präklinischen biomedizinischen Forschung zu ermöglichen.

Ein Open-Source-Normotherm-Perfusionssystem, das für Forschungswissenschaftler entwickelt wurde

Erfahren Sie die normotherme maschinelle Perfusion zur Erhaltung hochrisikoreicher Lebertransplantate im Schweinemodell. Diese Methode ermöglicht die Beurteilung der Organfunktion vor der Transplantation und reduziert hepatozelluläre Schäden.

Normothermische isolierte Leberperfusion bei Schweinen

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