Name: Ultrastrukturelle Expansionsmikroskopie in drei in vitro Lebenszyklusstadien von Trypanosoma cruzi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-05-12T14:50:00.000+00:00
Duration: 9 min 45 s
Description: Erfahren Sie die ultrastrukturelle Expansionsmikroskopie für Trypanosoma cruzi in drei Lebenszyklusstadien. Diese Methode ermöglicht hochauflösende 3D-Rekonstruktionen zellulärer Strukturen mit konventionellen Mikroskopen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Ultrastrukturelle Expansionsmikroskopie im In-vitro-Lebenszyklus von Trypanosoma cruzi

<ol><li>Chen, F., Tillberg, P. W., Boyden, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy.</a> Science. 347 (6221), 543-548 (2015).</li>
<li>Chozinski, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy+with+conventional+antibodies+and+fluorescent+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy with conventional antibodies and fluorescent proteins.</a> Nature Methods. 13 (6), 485-488 (2016).</li>
<li>Ku, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplexed+and+scalable+super-resolution+imaging+of+three-dimensional+protein+localization+in+size-adjustable+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Multiplexed and scalable super-resolution imaging of three-dimensional protein localization in size-adjustable tissues.</a> Nature Biotechnology. 34 (9), 973-981 (2016).</li>
<li>Gambarotto, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+cellular+ultrastructures+using+expansion+microscopy+%28U-ExM%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Imaging cellular ultrastructures using expansion microscopy (U-ExM).</a> Nature Methods. 16 (1), 71-74 (2018).</li>
<li>Tillberg, P. W., Chen, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy%3A+Scalable+and+convenient+super-resolution+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Cell+and+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy: Scalable and convenient super-resolution microscopy.</a> Annual Review of Cell and Developmental Biology. 35, 683-701 (2019).</li>
<li>Jurriens, D., van Batenburg, V., Katrukha, E. A., Kapitein, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+the+neuronal+cytoskeleton+using+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Mapping the neuronal cytoskeleton using expansion microscopy.</a> Methods in Cell Biology. 161, 105-124 (2021).</li>
<li>Alonso, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructure+expansion+microscopy+%28U-ExM%29+in+Trypanosoma+cruzi%3A+localization+of+tubulin+isoforms+and+isotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Parasitology+Research%22%5BJournal%5D)">Ultrastructure expansion microscopy (U-ExM) in Trypanosoma cruzi: localization of tubulin isoforms and isotypes.</a> Parasitology Research. 121 (10), 3019-3024 (2022).</li>
<li>Kalichava, A., Ochsenreiter, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructure+expansion+microscopy+in+Trypanosoma+brucei%5BTitle%5D)+AND+%22Open+Biology%22%5BJournal%5D)">Ultrastructure expansion microscopy in Trypanosoma brucei.</a> Open Biology. 11 (10), 210132(2021).</li>
<li>Amodeo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+novel+mitochondrial+genome+segregation+factor+TAP110+in+Trypanosoma+brucei%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cell+Science%22%5BJournal%5D)">Characterization of the novel mitochondrial genome segregation factor TAP110 in Trypanosoma brucei.</a> Journal of Cell Science. 134 (5), (2021).</li>
<li>Liffner, B., Absalon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy+reveals+plasmodium+falciparum+blood-stage+parasites+undergo+anaphase+with+a+chromatin+bridge+in+the+absence+of+mini-chromosome+maintenance+complex+binding+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Microorganisms%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy reveals plasmodium falciparum blood-stage parasites undergo anaphase with a chromatin bridge in the absence of mini-chromosome maintenance complex binding protein.</a> Microorganisms. 9 (11), 2306(2021).</li>
<li>Dos Santos Pacheco, N., Soldati-Favre, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coupling+auxin-inducible+degron+system+with+ultrastructure+expansion+microscopy+to+accelerate+the+discovery+of+gene+function+in+Toxoplasma+gondii%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Coupling auxin-inducible degron system with ultrastructure expansion microscopy to accelerate the discovery of gene function in Toxoplasma gondii.</a> Methods in Molecular Biology. 2369, 121-137 (2021).</li>
<li>Lidani, K. C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chagas+disease%3A+From+discovery+to+a+worldwide+health+problem%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Chagas disease: From discovery to a worldwide health problem.</a> Frontiers in Public Health. 7, 166(2019).</li>
<li>Carrea, A., Diambra, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systems+biology+approach+to+model+the+life+cycle+of+Trypanosoma+cruzi%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Systems biology approach to model the life cycle of Trypanosoma cruzi.</a> PloS One. 11 (1), e0146947(2016).</li>
<li>Vidal, J. C., De Souza, W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aVidal%2C+JC+%22Morphological+and+Functional+Aspects+of+Cytoskeleton+of+Trypanosomatids.+Cytoskeleton+-+Structure%2C+Dynamics%2C+Function+and+Disease%22">Morphological and Functional Aspects of Cytoskeleton of Trypanosomatids. Cytoskeleton - Structure, Dynamics, Function and Disease</a>. , InTech. (2017).</li>
<li>Kunz, T. C., Götz, R., Gao, S., Sauer, M., Kozjak-Pavlovic, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+expansion+microscopy+to+visualize+and+characterize+the+morphology+of+mitochondrial+cristae%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Cell+and+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Using expansion microscopy to visualize and characterize the morphology of mitochondrial cristae.</a> Frontiers in Cell and Developmental Biology. 8, 617(2020).</li>
<li>Laporte, M. H., Klena, N., Hamel, V., Guichard, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+the+native+cellular+organization+by+coupling+cryofixation+with+expansion+microscopy+%28Cryo-ExM%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Visualizing the native cellular organization by coupling cryofixation with expansion microscopy (Cryo-ExM).</a> Nature Methods. 19 (2), 216-222 (2022).</li>
<li>Sahabandu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+microscopy+for+the+analysis+of+centrioles+and+cilia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Microscopy%22%5BJournal%5D)">Expansion microscopy for the analysis of centrioles and cilia.</a> Journal of Microscopy. 276 (3), 145-159 (2019).</li>
<li>Wen, G., Leen, V., Rohand, T., Sauer, M., Hofkens, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+progress+in+expansion+microscopy%3A+chemical+strategies+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Reviews%22%5BJournal%5D)">Current progress in expansion microscopy: chemical strategies and applications.</a> Chemical Reviews. 123 (6), 3299-3323 (2023).</li>
<li>Trinks, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subdiffraction-resolution+fluorescence+imaging+of+immunological+synapse+formation+between+NK+cells+and+A.+fumigatus+by+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Communications+Biology%22%5BJournal%5D)">Subdiffraction-resolution fluorescence imaging of immunological synapse formation between NK cells and A. fumigatus by expansion microscopy.</a> Communications Biology. 4 (1), 1151(2021).</li>
<li>White, B. M., Kumar, P., Conwell, A. N., Wu, K., Baskin, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Chemical+Society%22%5BJournal%5D)">Lipid expansion microscopy.</a> Journal of the American Chemical Society. 144 (40), 18212-18217 (2022).</li>
<li>Steib, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TissUExM+enables+quantitative+ultrastructural+analysis+in+whole+vertebrate+embryos+by+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports+Methods%22%5BJournal%5D)">TissUExM enables quantitative ultrastructural analysis in whole vertebrate embryos by expansion microscopy.</a> Cell Reports Methods. 2 (10), 100311(2022).</li>
<li>Shaib, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+proteins+by+expansion+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Visualizing proteins by expansion microscopy.</a> bioRxiv. , (2023).</li>
<li>M'Saad, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((All-optical+visualization+of+specific+molecules+in+the+ultrastructural+context+of+brain+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">All-optical visualization of specific molecules in the ultrastructural context of brain tissue.</a> bioRxiv. , (2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,22 Mikrometer sterile Spritzenvorsatzfilter PES</td><td>Membranlösungen</td><td>SFPES030022S</td><td></td></tr><tr><td>1 l Becherglas</td><td>Schott Duran</td><td>10005227</td><td></td></tr><tr><td>1,5 mL SPINWIN Mikrozentrifugenröhrchen</td><td>Tarson</td><td>T38-500010</td><td></td></tr><tr><td>10 mL steriler Einweg-Serynge</td><td>NP</td><td>66-32</td><td></td></tr><tr><td>10 mL serologische Pipette steril</td><td>Jet Biofil</td><td>GSP211010</td><td></td></tr><tr><td>12-mm-Deckgläser</td><td>Merienfeld GmbH</td><td>01 115 20</td><td>Runde Deckgläser</td></tr><tr><td>12-Well-Platten</td><td>Jet Biofil</td><td>TCP011012</td><td></td></tr><tr><td>22-mm-Deckgläser</td><td>Corning</td><td>2845-22</td><td>Quadratische Deckgläser</td></tr><tr><td>24-Well-Platten</td><td>Jet Biofil</td><td>TCP-011-024</td><td></td></tr><tr><td>250 mL Becherglas</td><td>Schott Duran</td><td>C108.1</td><td></td></tr><tr><td>3 mL Pasteur Pipette</td><td>Deltalab</td><td>200037</td><td></td></tr><tr><td>35-mm-Glasbodenschalen</td><td>Matsunami Glas ind</td><td>D11130H</td><td></td></tr><tr><td>4&prime;,6-Diamidin-2&prime;-phenylindol-dihydrochlorid</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D9542</td><td>DAPI</td></tr><tr><td>5 ml serologische Pipette steril</td><td>Jet Biofil</td><td>GSP010005</td><td></td></tr><tr><td>6-Well-Platten</td><td>Sarstedt</td><td>83.3920</td><td></td></tr><tr><td>Acrilamid</td><td>BioRad</td><td>1610101</td><td></td></tr><tr><td>Ammoniumpersulfat</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A3678-25G</td><td>APS</td></tr><tr><td>ATTO 647 NHS Ester</td><td>BOC Sciences</td><td>F10-0107</td><td>Für die Pan-Proteom-Markierung</td></tr><tr><td>Biosafty Cabinet</td><td>Telstar</td><td>Bio II A/P</td><td></td></tr><tr><td>Rindernatriumalbumin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A7906</td><td>BSA</td></tr><tr><td>CO2 Inkubator</td><td>Sanyo</td><td>MCO-15A</td><td></td></tr><tr><td>Konfokales Mikroskop</td><td>Zeiss</td><td>LSM 880</td><td></td></tr><tr><td>Einweg-Petridish-Tarsons</td><td></td><td>460095</td><td>90 mm</td></tr><tr><td>Durchmesser DMEM, High Glucose</td><td>Thermo Fisher Cientific</td><td>12100046</td><td>Pulver</td></tr><tr><td>Elektronischer digitaler Messschieber</td><td>Radar</td><td>RADAR-SLIDE-CALIPER</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol Absolute</td><td>Supelco</td><td>1,00,98,31,000</td><td></td></tr><tr><td>Fötales Kälberserum</td><td>Internegocios SA</td><td>FCS FRA 500</td><td>Steriles und hitzeinaktiviertes</td></tr><tr><td>Fidschi-Bildverarbeitungspaket</td><td>ImageJ</td><td></td><td>doi:10.1038/nmeth.2019</td></tr><tr><td>Formaldehyd 37%</td><td>Sigma Aldrich</td><td>F8775</td><td>FA</td></tr><tr><td>Glas Petrischale</td><td>Marienfeld Superior</td><td>PM-3400300</td><td>60 mm</td></tr><tr><td>Durchmesser Glucosa D(+)</td><td>Cicarelli</td><td></td><td></td>716214</tr><tr><td>Glutaraldehyd 70%</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G7776</td><td></td></tr><tr><td>Ziege Anti-Maus IgG Sekundärer Antikörper Alexa Fluor 555</td><td>Invitrogen</td><td>A-21422</td><td></td></tr><tr><td>Ziege Anti-Kaninchen IgG Sekundärer Antikörper FICT</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>115-095-003</td><td></td></tr><tr><td>Messzylinder</td><td>Nalgene</td><td>3663-1000</td><td></td></tr><tr><td>Graduierter Glaskolben</td><td>Glassco</td><td>GL-274.202.01</td><td>100 mL</td></tr><tr><td>Heizblock</td><td>IBR</td><td></td><td>Made in house</td></tr><tr><td>Hemin</td><td>Frontier Scientific</td><td>H651-9</td><td></td></tr><tr><td>Salzsäure 36,8-38,0%</td> <td>Ciccarelli</td><td>918110</td><td></td></tr><tr><td>Eiskübel</td><td>Corning</td><td>1167U68</td><td></td></tr><tr><td>Inkubator</td><td>Tecno Dalvo</td><td>TOC130</td><td></td></tr><tr><td>Leberinfusion</td><td>Difco</td><td>226920</td><td></td></tr><tr><td>Magnetrührer und Heizung</td><td>Laborbegleiter</td><td>HP-3000</td><td></td></tr><tr><td>Metallspatel</td><td>SALTTECH</td><td>200MM</td><td></td></tr><tr><td>Metallpinzette</td><td>Marienfeld Superior</td><td>PM-6633002</td><td></td></tr><tr><td>Methanol absolut</td><td>Cicarelli</td><td>897110</td><td></td></tr><tr><td>Mikrozentrifugenröhrchen 1,5 mL</td><td>Tarson</td><td>500010-N</td><td></td></tr><tr><td>Papier in Mikroskopiequalität KimWipes</td><td>Kimtech Science</td><td>B0013HT2QW</td><td></td></tr><tr><td>Milli-Q Wassersystem</td><td>Merk Millipore</td><td>IQ-7003</td><td></td></tr><tr><td>Maus Anti-Alpha-Tubulin-Klon DM1A</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T9026</td><td></td></tr><tr><td>Maus Anti-PFR</td><td>Aufgereinigte Antikörper</td><td></td><td>Gespendet von Dr. Ariel Silber (USP)</td></tr><tr><td>N,N&acute;-Methylenbisacrilamid</td><td>ICN</td><td>193997</td><td>BIS</td></tr><tr><td>Na2HPO4</td><td>Cicarelli</td><td>834214</td><td></td></tr><tr><td>Neubauer Kammer</td><td>Boeco</td><td>BOE 01</td><td></td></tr><tr><td>p1000 Pipette</td><td>Gilson</td><td>PIPETMAN P1000</td><td></td></tr><tr><td>p1000 Pipettenspitzen</td><td>Tarson</td><td>TAR-521020B</td> p20 Pipette <td></td></tr><tr><td></td><td>Gilson</td><td>PIPETMAN P20</td><td></td></tr><tr><td>p20 Pipettenspitzen</td><td>Tarson</td><td>TAR-527108</td><td></td></tr><tr><td>p200 Pipette</td><td>Gilson</td><td>PIPETMAN P200</td><td></td></tr><tr><td>p200 Pipettenspitzen</td><td>Tarson</td><td>TAR-521010Y</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyd</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P6148</td><td>PFA</td></tr><tr><td>pH / Redox / &deg; C-Meter</td><td>HANNA Instruments</td><td>HI 2211</td><td></td></tr><tr><td>Poly-D-Lysin 0,1%</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P8920</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumchlorid</td><td>Cicarelli</td><td>867212</td><td>KCl</td></tr><tr><td>Rasierklinge</td><td>Printex</td><td>BS 2982:1992</td><td></td></tr><tr><td>Dichtungsfaser "Parafilm M"</td><td>Bemis</td><td>PM996</td><td></td></tr><tr><td>Natriumacrilat</td><td>Sigma Aldrich</td><td>408220-25G</td><td>SA</td></tr><tr><td>Natriumbicarbonat</td><td>Cicarelli</td><td>929211</td><td>NaHCO3</td></tr><tr><td>Natriumchlorid</td><td>Cicarelli</td><td>750214</td><td>NaCl</td></tr><tr><td>Natriumdodecylsulfat</td><td>BioRad</td><td>1610302</td><td>SDS</td></tr><tr><td>Natriumhiboxid</td><td>Merk</td><td>1-06498</td><td>NaOH</td></tr><tr><td>Sorvall ST 16 Zentrifuge</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>75004380</td><td></td></tr><tr><td>T-25 Kolben</td><td>Corning</td><td>430639</td><td></td></tr><tr><td>TEMED</td><td>Invitrogen</td><td>15524-010</td><td></td></tr><tr><td>Seidenpapier</td><td>Elite</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Triptose</td><td>Merck</td><td>1106760500</td><td></td></tr><tr><td>Tris</td><td>BioRad</td><td>1610719</td><td></td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Biopack</td><td>2003-07</td><td>Polysorbat 20</td></tr><tr><td>Vakuumpumpe</td><td>Silfab</td><td>N33-A</td><td></td></tr><tr><td>Vero Zellen</td><td>ATCC</td><td>CRL-1587</td><td></td></tr><tr><td>Vortex MIxer</td><td>Dragon Lab</td><td>MX-S</td><td></td></tr></tbody></table>

ultrastrukturelle expansionsmikroskopie in drei in vitro lebenszyklusstadien von trypanosoma cruzi

Ultrastructural Expansion Microscopy in Three In Vitro Life Cycle Stages of Trypanosoma cruzi

Wenn das Protokoll ordnungsgemäß ausgeführt wurde (Abbildung 1), sind die Proben als planares und durchscheinendes Gel sichtbar, das in Wasser bis zu einem Faktor von 4-4,5x expandiert werden kann (Abbildung 3A). Diese Expansion ergab eine effektive Auflösung von etwa 70 nm, die je nach endgültigem Expansionsfaktor und verwendetem Bildgebungssystem variieren kann. Nach dem zweiten Expansionsprozess und der Bildaufnahme in einem konfokalen Mikroskop konnten wir E...

Ultrastrukturelle Expansionsmikroskopie in drei in vitro Lebenszyklusstadien von Trypanosoma cruzi

We describe here the application of ultrastructure expansion microscopy (U-ExM) in Trypanosoma cruzi, a technique that allows increasing the spatial ...

ultrastructural-expansion-microscopy-three-vitro-life-cycle-stages

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

In diesem Protokoll Eindringmittel beschrifteten T. Trypanosoma wurden in durchsichtigen Zebrafischlarven injiziert und Parasiten Motilität wurde in Vivo mit Lichtblattmikroskopie Fluoreszenz beobachtet.

Gründung der Larven Zebrafisch als Tier-Modell zu untersuchen Trypanosomen Trypanosoma Motilität In Vivo

Die Trypanosomen Trypanosoma Agent der Chagas-Krankheit produziert langlebige asymptomatische Infektionen, die abrupt in klinisch anerkannten Pathologie zu entwickeln. Die folgenden Forschungs-Protokoll beschreibt eine kurzfristige familienbasierte epidemiologische Studie um die T. Trypanosoma Infektion, sexuell übertragbare von übergeordneten an Nachkommen zu entwirren.

Sexuelle Übertragung von amerikanischen Trypanosomen von Männchen und Weibchen zu Naive Mates

Hier beschreiben wir ein Protokoll zur Einführung eines Genknockouts in den extrazellulären Amastigot von Trypanosoma cruzi, mit dem CRISPR/Cas9-System. Dem Wachstumsphänotyp kann entweder durch Zellzählung der axtischen Amastigotenkultur oder durch Proliferation intrazellulärer Amastigoten nach der Invasion der Wirtszelle gefolgt werden.

Einführung eines Gene Knockout direkt in die Amastigote-Phase von Trypanosoma cruzi mit dem CRISPR/Cas9-System

Wir beschreiben einen kolorimetrischen Hochdurchsatz-Assay zur Messung der β-Galactosidase-Aktivität in drei Lebenszyklusstadien von Trypanosoma cruzi, dem Erreger der Chagas-Krankheit. Dieser Assay kann verwendet werden, um trypanozide Verbindungen auf einfache, schnelle und reproduzierbare Weise zu identifizieren.

In vitro Arzneimittelscreening gegen alle Lebenszyklusstadien von Trypanosoma cruzi unter Verwendung von Parasiten, die β-Galactosidase exprimieren

Das vorliegende Protokoll beschreibt Lichtblatt-Fluoreszenzmikroskopie und automatisierte softwaregestützte Methoden zur Visualisierung und genauen Quantifizierung proliferierender und ruhender Trypanosoma-cruzi-Parasiten und T-Zellen in intakten, gereinigten Organen und Geweben. Diese Techniken bieten eine zuverlässige Möglichkeit, Behandlungsergebnisse zu bewerten und neue Einblicke in Parasiten-Wirt-Interaktionen zu bieten.

Quantitative 3D-Bildgebung von Trypanosoma-cruzi-infizierten Zellen, ruhenden Amastigoten und T-Zellen in intakten geklärten Organen

Das hier bereitgestellte Protokoll beschreibt die detaillierten Schritte zur Durchführung von Arzneimittelwirksamkeitsstudien in einem biolumineszierenden Modell der Trypanosoma cruzi-Infektion , wobei der Schwerpunkt auf der Datenerfassung, -analyse und -interpretation liegt. Fehlerbehebungs- und Qualitätskontrollverfahren zur Minimierung technischer Probleme werden ebenfalls bereitgestellt.

Entmystifizierung der In-vivo-Biolumineszenz-Bildgebung eines Mausmodells für die Chagas-Krankheit für Wirksamkeitsstudien von Arzneimitteln

Mama ist eine einzigartige Magnetosom assoziierten Protein, das nachweislich in Magnetosomen Aktivierung beteiligt sein sollte. Hier präsentieren wir die Aufreinigungsprotokolls von Mama Deletionsmutante (MamAΔ41)...

Die Reinigung des M. magneticum Stamm AMB-1 Magnetosom assoziierten Protein MamAΔ41

Dieser Artikel beschreibt eine Technik zur Visualisierung der frühen Ereignisse der Embryogenese in den...

Zeitraffer-Mikroskopie der frühen Embryogenese in Caenorhabditis elegans

Die Art der Wechselwirkung zwischen hämatopoetischen Stamm-und Vorläuferzellen (HSPCs) und Knochenmark Nischen schlecht verstanden. Kundenspezifische Hardware-Modifikationen und eine mehrstufige Akquisitionsprotokoll ermöglichen den Einsatz von Zwei-Photonen-Mikroskopie und konfokaler Bild ex vivo markierten HSPCs innerhalb des Knochenmarks Bereichen referenziert, Tracking-Wechselwirkungen und Bewegung.

In-vivo-4-Dimensional-Tracking von hämatopoetischen Stamm-und Vorläuferzellen im erwachsenen Maus Schädeldachknochenmark

Diese Handschrift beschreibt eine einfach zu bedienende und kostengünstige Methode zum Kryofixation Suspensionszellen durch Transmissionselektronenmikroskopie sichtbar zu machen.

Freezing Plunge: Ein Werkzeug für den Elektronenmikroskopische und Immunolokalisation Studium der Suspensionszellen in Transmissions-Elektronen-Mikroskopie

Erfahren Sie die ultrastrukturelle Expansionsmikroskopie für Trypanosoma cruzi in drei Lebenszyklusstadien. Diese Methode ermöglicht hochauflösende 3D-Rekonstruktionen zellulärer Strukturen mit konventionellen Mikroskopen.

Ultrastrukturelle Expansionsmikroskopie in drei in vitro Lebenszyklusstadien von Trypanosoma cruzi

Weitere Videos entdecken