Regeneration von Zebrafischschuppen in Toto- und Ex-vivo-Schuppenkultur

Dieses Protokoll beschreibt die Entnahme und Visualisierung von elasmoiden Schuppen von Zebrafischen während der in vivo Regeneration. Darüber hinaus wird die ex vivo Kultur dieser Schuppen für bis zu 7 Tage nach der Ernte vorgestellt.

Einer der Vorteile der Verwendung von Fischschuppen für die Forschung besteht darin, dass sie sowohl Osteoblasten als auch Osteoklasten enthalten, die für den Knochenumbau unerlässlich sind. Wenn die Schuppen ex vivo kultiviert werden, können wir die Interaktionen dieser beiden Zellpopulationen zusammen mit der Skelettmatrix untersuchen, im Gegensatz zur traditionellen Zellkultur, bei der es in der Regel nur einen Zelltyp gibt. Ein Vorteil der Verwendung von Fischschuppen für die Forschung besteht darin, dass sie reichlich auf den Fischen vorhanden sind, leicht geerntet werden können und durchscheinend sind, was eine bessere Ex-vivo-Bildgebung ermöglicht.

Da sich die Schuppen vollständig regenerieren können, ermöglichen sie es uns, die Knochenregeneration zu untersuchen, die in Säugetiermodellen selten vorkommt. Die Protokolle, die wir hier vorstellen, ermöglichen es uns, Zellinteraktionen besser zu analysieren. Auf diese Weise können wir testen, wie die verschiedenen Zelltypen auf das Altern und auf Veränderungen des zirkadianen Rhythmus reagieren.