Reproducibility and Harmonization in Research Using Biological Standards: The Example of Platelet Agonist Collagen-Related Peptide

Carmen H. Coxon; Peter Rigsby

doi:10.3791/65410

Reproduzierbarkeit und Harmonisierung in der Forschung mit biologischen Standards: Das Beispiel d...

JoVE Journal
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Reproducibility and Harmonization in Research Using Biological Standards: The Example of Platelet Agonist Collagen-Related Peptide

Reproduzierbarkeit und Harmonisierung in der Forschung mit biologischen Standards: Das Beispiel des Thrombozytenagonisten-Kollagen-verwandten Peptids

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04:50 min

August 4, 2023

DOI: 10.3791/65410-v

Carmen H. Coxon¹, Peter Rigsby¹

¹Medicines and Healthcare products Regulatory Agency

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a method for standardizing the platelet agonist collagen-related peptide cross-linked (CRP-XL) using light transmission aggregometry. The protocol, while focused on platelet function, can be applied to various biological molecules and bioassays to enhance scientific rigor and reproducibility.

Key Study Components

Area of Science

Platelet function measurement
Biological standardization
Light transmission aggregometry

Background

Biological standards ensure quality and safety in biological medicines.
Standardization is crucial for reproducibility in research.
There is a lack of knowledge exchange regarding biological standards among academics.
Improper training in metrological principles can compromise scientific rigor.

Purpose of Study

To standardize platelet function measurement using CRP-XL.
To promote the application of biological standardization in research practices.
To address inconsistencies in biological experiments.

Methods Used

Dilution of CRP-XL in assay buffer to induce platelet aggregation.
Preparation of a dilution series for both standard and test reagents.
Use of light transmission aggregometry to record platelet aggregation responses.
Data analysis using nonlinear regression to determine potency (EC50).

Main Results

Clear aggregation response observed at 0.075 micrograms per milliliter for the standard.
No response for the test reagent at the corresponding concentration.
EC50 values calculated for both standard and test reagents.
Relative potency determined by comparing EC50 values.

Conclusions

Standardization improves reproducibility in biological experiments.
Proper training in metrology is essential for scientific rigor.
Application of the protocol can enhance the quality of research across various biological systems.

Frequently Asked Questions

What is CRP-XL?

CRP-XL is a platelet receptor agonist used to induce platelet aggregation in assays.

Why is biological standardization important?

It ensures reproducibility and consistency in experimental results across different studies.

How is the potency of a test reagent determined?

Potency is determined by calculating the EC50 value through nonlinear regression analysis.

What role do biological standards play in medicine?

They ensure the quality, consistency, and safety of biological medicines and diagnostics.

Can this method be applied to other biological systems?

Yes, the principles of standardization can be applied to various biological assays beyond platelet function.

In dieser Arbeit stellen wir eine Methode zur Standardisierung des Thrombozytenagonisten-Kollagen-verwandten Peptids Cross-Linked (CRP-XL) mittels Lichttransmissionsaggregometrie vor. Während das Protokoll auf die Thrombozytenfunktion abzielt, kann das experimentelle Verfahren auf die meisten biologischen Moleküle und Bioassays angewendet werden, um wissenschaftliche Genauigkeit und Reproduzierbarkeit zu gewährleisten.

Forscher der MHRA South Mimms Laboratories entwickeln seit über 60 Jahren biologische Standards für die Herstellung, und diese Referenzreagenzien werden verwendet, um die Qualität, Konsistenz und Sicherheit biologischer Arzneimittel und Diagnostika zu gewährleisten. Die NIB-Standards der MHRA unterstützen die Translation modernster therapeutischer Produkte sowie die Kontrolle etablierter Medikamente. In den MHRA South Mimms Laboratories verwenden wir modernste Technologien, um Materialien herzustellen, die die Entwicklung und Regulierung neuartiger therapeutischer Innovationen unterstützen.

Biologische Standards werden von Akademikern in den Biowissenschaften aufgrund mangelnden Wissensaustauschs nach wie vor zu wenig genutzt. Dies wirkt sich negativ auf die Qualität der Forschung aus und trägt zur Reproduzierbarkeitskrise bei. Die biologische Standardisierung stellt sicher, dass Experimente reproduzierbar sind, unabhängig davon, wo und wann sie durchgeführt werden.

Mangelnde Kenntnisse in den grundlegenden metrologischen Prinzipien und in der Ausbildung beeinträchtigen die wissenschaftliche Strenge und wirken sich negativ auf die Reproduzierbarkeit aus. Obwohl sich unser Protokoll auf die Standardisierung der Messung der Thrombozytenfunktion konzentriert, kann die Praxis auf jedes biologische System angewendet werden. Die Anwendung biologischer Standardisierung auf Forschungspraktiken wird nicht nur biologische Experimente standardisieren, sondern auch dazu beitragen, Inkonsistenzen und den Mangel an Harmonisierung zu beseitigen, der die Forschung untergräbt.