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DOI: 10.3791/65650-v
Gabriel R. Martins*1,2, Felipe L. Brum*1,2,3, Davi Marconi Miranda Carvalho da Silva*1,2, Livia C. Barbosa3, Ronaldo Mohana-Borges3, Ayla Sant'Ana da Silva1,2
1Laboratório de Biocatálise (LABIC),Instituto Nacional de Tecnologia, 2Departamento de Bioquímica, Instituto de Química,Universidade Federal do Rio de Janeiro, 3Centro de Espectrometria de Massas de Biomoléculas, Instituto de Biofísica Carlos Chagas Filho,Universidade Federal do Rio de Janeiro
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Dieses Protokoll zielte darauf ab, detaillierte Leitlinien für die Vorbereitung von harten Saatgutprobenschnitten mit niedrigem Wassergehalt für die MALDI-IMS-Analyse zu beschreiben, die ursprüngliche Verteilung und Häufigkeit der Analyten beizubehalten und eine qualitativ hochwertige Signal- und räumliche Auflösung bereitzustellen.
Unsere Forschung konzentriert sich auf die Inwertsetzung pflanzlicher Biomasse aus der tropischen Biodiversität. Dafür ist es sehr wichtig, diese Materialien gut zu charakterisieren, damit wir ihnen den besten Wert geben und die besten Reiseziele vorschlagen können. Dafür verwenden wir in dieser Arbeit die bildgebende MALDI-Massenspektrometrie-Analyse als Charakterisierungstechnik, da es sich um eine sehr präzise Methode handelt, die uns eine molekularspezifische Bildgebung des biologischen Gewebes liefern kann.
Mit den Ergebnissen können wir einen Überblick über die Hauptkomponenten dieser pflanzlichen Biomasse und auch deren Lokalisierung erhalten, und dies kann unsere Erforschung neuer Produkte und Prozesse aus diesem Material leiten. Um jedoch eine sehr gute MALDI-Bild-Massenspektrometrie-Analyse zu erhalten, ist es sehr wichtig, eine gute Probenvorbereitungsmethode zu haben, und genau das beschreiben wir in dieser Arbeit. Der technologische Fortschritt hat zu vielen Herausforderungen bei der bildgebenden Massenspektrometrie geführt.
Insbesondere Pflanzengewebe stellen aufgrund ihrer spezialisierten Organe eine komplexe Herausforderung dar. Es ist entscheidend für diese Technik, diese Probenvorbereitung, wenn die Probenvorbereitung unzureichend durchgeführt wird, werden die Signale nicht erkannt oder es treten Artefakte auf, was zu ungenauen Ergebnissen führt. Diese Protokolle ermöglichen uns die Herstellung dünner Scheiben darmresistenter Palmsamen, die als Beweis für ein Konzept für die molekulare Kartierung in einem lebenden Samengewebe dienen.
Diese Technik bietet also wertvolle Einblicke in die in diesen Samen enthaltenen Oligosaccharide. Wir hoffen also, dass diese Technik für die Forscher mit ähnlichen Hindernissen hilfreich sein wird. Diese Technik kann bei der Untersuchung anderer harter Samen oder anderer biologischer Materialien helfen, die eine Herausforderung darstellen, um in Flossenscheiben geschnitten zu werden.
Zum Beispiel kann dieses Protokoll ein Werkzeug für die Untersuchung der Samenentwicklung und Keimung sein, wenn man einen harten Samen untersucht.
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