The Development and Application of Biophysical Assays for Evaluating Ternary Complex Formation Induced by Proteolysis Targeting Chimeras (PROTACS)

Wei Jiang; Holly Soutter

doi:10.3791/65718

Entwicklung und Anwendung biophysikalischer Assays zur Evaluierung der Bildung ternärer Komplexe,...

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Biochemistry

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The Development and Application of Biophysical Assays for Evaluating Ternary Complex Formation Induced by Proteolysis Targeting Chimeras (PROTACS)

Entwicklung und Anwendung biophysikalischer Assays zur Evaluierung der Bildung ternärer Komplexe, die durch Proteolyse-Targeting-Chimären (PROTACS) induziert werden

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07:22 min

January 12, 2024

DOI: 10.3791/65718-v

Wei Jiang¹, Holly Soutter¹

¹Center for the Development of Therapeutics,The Broad Institute of MIT and Harvard

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

In dieser Arbeit beschreiben wir Protokolle zur biophysikalischen Charakterisierung der ternären Komplexbildung, die durch Proteolyse-Targeting-Chimären (PROTACS) induziert wird, an denen die Ubiquitin-Ligasen Von-Hippel-Lindau E3-Ligase (VHL) und Cereblon (CRBN) beteiligt sind. Zu den hier dargestellten biophysikalischen Methoden gehören die Oberflächenplasmonenresonanz (SPR), die Bioschichtinterferometrie (BLI) und die isotherme Titrationskalorimetrie (ITC).

Unsere Forschung konzentriert sich darauf, etablierte Modellsysteme zu replizieren, sie durch zusätzliche Assays zu validieren und diese Methoden an unseren spezifischen Forschungskontext anzupassen. Unser Ziel ist es, einen vielseitigen Ansatz zu demonstrieren, der auf verschiedene Projekte angewendet werden kann. Die aktuelle experimentelle Herausforderung ist die strategische Auswahl des geeigneten Assay-Formats und der geeigneten Bedingungen auf der Grundlage projektspezifischer Anforderungen und bestehender Wissenslücken.

Dies ist unerlässlich, um in unseren Experimenten effiziente und genaue Antworten zu erhalten. Unser Protokoll bietet einen optimierten Ansatz für die nahtlose Anpassung an verschiedene ProTech-Systeme. Darüber hinaus führen wir eine gründliche Bewertung jeder Methode durch und heben ihre jeweiligen Vor- und Nachteile hervor.

Wir bieten fundierte Anweisungen zur Auswahl des am besten geeigneten Formats auf der Grundlage spezifischer Bedingungen.

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