Subretinale Verabreichung von Photorezeptor-Vorläuferzellen aus humanen embryonalen Stammzellen in rd10-Mäusen

Wir beschreiben ein detailliertes Protokoll für die Präparation von post-kryokonservierten hESC-abgeleiteten Photorezeptor-Vorläuferzellen und die subretinale Verabreichung dieser Zellen in rd10-Mäusen .

Meine Forschung konzentriert sich auf die Entwicklung einer stammzellbasierten Therapie für fortgeschrittene Stadien von Netzhauterkrankungen, die eine Degeneration der Photorezeptoren verursachen. Das Ziel unserer Forschung ist es, den Verlust von Photorezeptoren bei Patienten durch klinisch sichere und funktionelle Photorezeptor-Vorläuferzellen zu ersetzen, mit dem Ziel, ihre Sehschärfe zu verbessern oder sogar ihr Sehvermögen wiederherzustellen. Das wichtigste präklinische Modell sind Mäuse, aber ihr kleiner Augapfel macht es schwierig, Materialien zu injizieren, insbesondere unter die Netzhaut.

Die Entwicklung der Fähigkeit, erfolgreiche subretinale Injektionen durchzuführen, erfordert Geduld und Ausdauer. Es ist uns gelungen, eine Lamininbasis für die Rezeptordifferenzierungsmethode zu entwickeln, die in der Lage ist, Photorezeptor-Vorläuferzellen in 32 Tagen zu erzeugen. Die subretinalen Transplantationen dieser Photorezeptor-Vorläuferzellsuspensionen in den Nagetieren führten zu einer synaptischen Konnektivität zwischen den Löchern und dem Transplantat in den Augen.

Dies hat zu einer teilweisen optischen Restaurierung geführt. Unser Ansatz ist einfach, die richtige Visualisierung hilft dem Chirurgen, die Nadel in den gewünschten Bereich zu bringen.