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DOI: 10.3791/65851-v
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Wir beschreiben ein Protokoll zur Gewinnung enzymatisch dissoziierter Fasern unterschiedlicher Länge und Art aus sechs Muskeln erwachsener Mäuse: drei davon bereits beschrieben (Flexor digitorum brevis, Extensor digitorum longus, soleus) und drei von ihnen erstmals erfolgreich dissoziiert (Extensor hallucis longus, Peroneus longus, Peroneus digiti quarti).
In dieser Studie beschreiben wir eine Methode, um Fasern unterschiedlicher Länge und Art aus sechs Hintergliedmaßenmuskeln von Mäusen zu isolieren. Außerdem haben wir die Eignung der Fasern für physiologische Experimente getestet, die sich mit der Untersuchung des Erregungs-Kontraktions-Kopplungsmechanismus befassen. Jahrelang war es eine Herausforderung, lange Muskelfasern zu erhalten, was den Umfang vieler Studien auf diesem Gebiet einschränkte.
Nun zeigen wir, dass es möglich ist, magere Fasern mit Mausflexoren, Extensoren und Evertoren mit Längen von bis zu sechs Millimetern zu erhalten. Beispielsweise konnten wir anhand von Fasern aus sechs verschiedenen Muskeln zeigen, dass die als Morphologie Typ II bekannte transiente Kalziumkinetik unabhängig von der Lage oder Funktion ihrer Muskelquelle auf Typ IIB und IIX verallgemeinert werden kann. Wir glauben, dass das Modell der enzymatisch isolierten Fasern für eine Vielzahl von experimentellen Ansätzen mit unterschiedlichen Technologien geeignet ist, die es uns ermöglichen, mechanistische Fragen im Bereich der Biochemie, Physiologie, Biophysik, Zellbiologie und Molekularbiologie zu beantworten.
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