Name: Die Kombination aus mechanisch isolierter stromaler vaskulärer Fraktion und Fibrinhydrogel: Ein Verarbeitungsprotokoll (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-11-17T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 30 s
Description: Erfahren Sie die mechanische Isolation der stromalen vaskulären Fraktion aus Fettgewebe und deren Kombination mit Fibrinhydrogel zur Verbesserung der Wundheilung bei chronischen Wunden.

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<meta charset="utf8"></head><body>Mechanische stromale vaskuläre Fraktion in Fibrinhydrogel für die regenerative Medizin

<table><tbody><tr><td>12-Well-Platte</td><td>Sarstedt</td><td>83.3921</td><td></td></tr><tr><td>4&prime;,6-Diamidino-2-phenylindol (DAPI)</td><td>Biochemica</td><td>A1001.0010</td><td></td></tr><tr><td>50 mL-Falcon</td><td>Falcon</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Saughandtücher, Zweierpack</td><td>Fall</td><td>89701</td><td></td></tr><tr><td>Alamar blau 25 mL</td><td>Invitrogen</td><td>DAL1025</td><td></td></tr><tr><td>Albumin, Rind (BSA)</td><td>VWR</td><td>0332-500G</td><td></td></tr><tr><td>Biotek Cytation 5&nbsp;</td><td>Agilent</td><td></td><td>Cell Imaging Multimode-Mikroplatten-Reader&nbsp;</td></tr><tr><td>CaCl2&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C5670-500G</td><td></td></tr><tr><td>Kryostat</td><td>Mikrotom</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM mit 4,5 g/L Glukose, mit L-Glutamin, mit Natriumpyruvat</td><td>VWR</td><td>392-0416</td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Gibco</td><td>14190-144</td><td></td></tr><tr><td>Epinephrin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E4250</td><td></td></tr><tr><td>Fötales Rinderserum</td><td>Biowest</td><td>S181H-500</td><td></td></tr><tr><td>Fibrinogen Menschliches Plasma 100 mg</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>341576-100MG</td><td></td></tr><tr><td>Formalin</td><td>Fisher Scientific</td><td>SF100-4</td><td></td></tr><tr><td>Formalin 4%</td><td>Formafix</td><td>1308069</td><td></td></tr><tr><td>FSC 22-Einbettmedium, blau</td><td>Biosystems</td><td>3801481S</td><td></td></tr><tr><td>Hämatoxylin & Eosin-Lösung</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3136 / HT110132</td><td></td></tr><tr><td>Laktat-Ringer' s Lösung 1000 mL</td><td>B Braun</td><td>R5410-01</td><td></td></tr><tr><td>Mercedes Kanüle 4mm</td><td>MicroAire</td><td>PAL-R404LL</td><td></td></tr><tr><td>NaCl 0,9%</td><td>Bbraun</td><td>570160</td><td></td></tr><tr><td>OCT Embedding Matrix 125 mL</td><td>CellPath</td><td>KMA-0100-00A</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyd</td><td>Fisher Scientific</td><td>10342243</td><td></td></tr><tr><td>PBS 1%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P4474</td><td></td></tr><tr><td>PenStrep</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P4333-100ML</td><td></td></tr><tr><td>Petrischale 150mm</td><td>Sarstedt</td><td>83.1803</td><td></td></tr><tr><td>Phalloidin-iFluor 488 Reagenz</td><td>Abcam</td><td>ab176753</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Spritze 20 mL Luer</td><td>HENKE-JECT</td><td>5200-000V0</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Spritze 30 mL Luer-Lock</td><td>BD</td><td>10521</td><td></td></tr><tr><td>Thrombin aus humanem Plasma</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T6884-100UN</td><td></td></tr><tr><td>Tranexamsäure</td><td>Orpha Swiss</td><td>6837093</td><td></td></tr><tr><td>Tulpenfilter 1.2</td><td>Lencion Surgical</td><td>ATLLLL</td><td></td></tr><tr><td>Tulpenfilter 1.4</td><td>Lencion Surgical</td><td>ATLLLL</td><td></td></tr></tbody></table>

die kombination aus mechanisch isolierter stromaler vaskulärer fraktion und fibrinhydrogel: ein verarbeitungsprotokoll

The Combination of Mechanically Isolated Stromal Vascular Fraction and Fibrin Hydrogel: A Processing Protocol

Resazurin-Assay Wir untersuchten zunächst die in vitro Zellviabilität der mSVF-Zellen. Zu diesem Zweck führten wir an den Tagen 0, 3 und 7 einen Resazurin-Zellviabilitätsassay durch. Die Zellviabilität an den Tagen 0, 3 und 7 von insgesamt vier Proben ist in Abbildung 1 dargestellt. Die Werte von Tag 0 dienen als Ausgangswert und wurden auf 100 % festgelegt. An Tag 3 zeigte die Positivkontrolle (mSVF) einen leichten Rückgang auf 78,92 % (± 5,33 %), während die mS...

Die Kombination aus mechanisch isolierter stromaler vaskulärer Fraktion und Fibrinhydrogel: Ein Verarbeitungsprotokoll

The regenerative potential of adipose-derived stromal cells (ASCs) has gained significant attention in regenerative and translational research. In the ...

the-combination-mechanically-isolated-stromal-vascular-fraction

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Forschung

JoVE Journal

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Medizin

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Verkapselung von Kardiomyozyten in einer Fibrin-Hydrogel für Cardiac Tissue Engineering

Diese Arbeit wird die Herstellung von 3D-Fibrin-Gerüste für die Kultivierung und Differenzierung von Stammzellen plutipotent. Solche Gerüste verwendet werden, um die Auswirkungen von verschiedenen biologischen Verbindungen zur Stammzellforschung Verhalten Bildschirm als auch modifiziert werden, um Drug Delivery-Systemen enthalten sein.

Erstellung von 3D-Fibrin-Gerüste für Stem Cell Culture Anwendungen

Dieses Protokoll konzentriert sich auf die Nutzung der inhärenten Fähigkeit von Stammzellen zu Stichwort von der sie umgebenden extrazellulären Matrix induziert nehmen und in mehrere Phänotypen zu unterscheiden. Dieses Verfahren erweitert unser Manuskript Beschreibung und Charakterisierung eines Modells unter Verwendung einer zweischichtigen Hydrogel, von PEG-Fibrin und Kollagen zusammen, um gleichzeitig Co-differenzieren Fettgewebe gewonnene...

Projektierung eines zweischichtigen Hydrogel ASC Differenzierungskontrolle

Zeitraffermikroskopie und Bildverarbeitungstechniken wurden eingesetzt, um die fibroblast-vermittelte Gelverdichtung und Die Fibrinfaser-Neuausrichtung in einem umweltkontrollierten Bioreaktor über einen Zeitraum von 48 Stunden zu beobachten und zu analysieren.

Beobachtung und Quantifizierung von Fibroblasten-vermittelter Fibrin-Gelverdichtung

Dieses Modell geht von einem System myofibroblast besiedelten Fibringel, die verwendet werden, um die endogene Kollagen (Re-) Organisation in Echtzeit in einer zerstörungsfreien Weise studieren kann. Das Modell ist sehr abstimmbaren, wenn er auf verschiedene Zellquellen Medium Zusatzstoffe verwendet werden, und kann leicht an spezifische Anforderungen angepasst werden.

Ingenieurwesen Fibrin-basierten Tissue Konstrukte von Myofibroblasten und Anwendung von Constraints und abseihen to Cell und Collagen (Re) Organisation Induce

Um hochorganisierte Strukturen aus komplexem Gewebe zu erzeugen, muss man mehrere Materialien und Zelltypen zu einem integrierten Komposit zusammenfügen.  Dieses kombinatorische Design umfasst organspezifische geschichtete Zellblätter mit zwei unterschiedlichen biologisch abgeleiteten Materialien, die eine starke fibröse Matrixbasis enthalten, und Endothelzellen zur Verbesserung der Bildung neuer Gefäße.

Tissue Engineering: Aufbau eines Multizelluläre 3D Gerüst für die Lieferung von Layered Zellschichten

Das Protokoll beschreibt, wie ein perfusable Kreislauf Netzwerk in ein Sphäroid zu konstruieren. Das Sphäroid umliegenden Mikroumgebung ist entworfen, um induzieren Angiogenese und der Sphäroid an die Mikrokanäle in einem mikrofluidischen Gerät anschließen. Die Methode erlaubt die Perfusion der Sphäroid, das eine lang ersehnte Technik in dreidimensionale Kulturen ist.

Perfusable vaskuläre Netzwerk mit einem Gewebe-Modell in einem mikrofluidischen Gerät

Die vorgestellte Methode beinhaltet das einachsige Dehnen von 3D-Weichhydrogelen, die in Silikonkautschuk eingebettet sind, während eine konfokale Live-Mikroskopie ermöglicht wird. Die Charakterisierung der externen und internen Hydrogelstämme sowie die Faserausrichtung werden demonstriert. Das entwickelte Gerät und Protokoll kann die Reaktion von Zellen auf verschiedene Belastungsregime beurteilen.

Kontrollierte Dehnung von 3D-Hydrogelen unter Live-Mikroskopie-Bildgebung

Hier stellen wir ein Protokoll vor, um ein dreidimensionales vereinfachtes und undifferenziertes Hautmodell unter Verwendung einer mikrobearbeiteten mikrofluidischen Plattform zu generieren. Ein paralleler Strömungsansatz ermöglicht die In-situ-Ablagerung eines Hautkompartiments für die Aussaat von Epithelzellen auf der Oberseite, die alle von Spritzenpumpen gesteuert werden.

Generierung eines vereinfachten dreidimensionalen Skin-on-a-Chip-Modells in einer mikrobearbeiteten mikrofluidischen Plattform

Ein reproduzierbares Protokoll wird für die Herstellung, Anreicherung und Anwendung eines in situ blaulicht-kreuzvernetzbaren Gelatine-Ribollavin-Hydrogels zur Reparatur von hornhautstromaler Wunden bei Kaninchen vorgestellt, einschließlich prozeduraler Schritte für chirurgische Handhaben, partielle Tarsorrhaphie und postoperative Betreuung.

Herstellung und chirurgische Anwendung von angereicherten, fotovernetzten Gelatine-Riboflavin-Hydrogelen zur Reparatur von Hornhautwunden bei Kaninchen

Erfahren Sie die mechanische Isolation der stromalen vaskulären Fraktion aus Fettgewebe und deren Kombination mit Fibrinhydrogel zur Verbesserung der Wundheilung bei chronischen Wunden.

Die Kombination aus mechanisch isolierter stromaler vaskulärer Fraktion und Fibrinhydrogel: Ein Verarbeitungsprotokoll

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