Name: Gewebeaufbereitung und Isolierung von primären Fibroblasten aus der menschlichen Vagina (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-22T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 30 s
Description: Erfahren Sie die Isolierung primärer Fibroblasten aus menschlichem Vaginalgewebe für die Erforschung von Beckenorganprolaps. Diese optimierte Methode kombiniert mechanische und enzymatische Aufschlussverfahren für prä- und postmenopausale Spender.

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<ol><li>Mirin, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gender+disparity+in+the+funding+of+diseases+by+the+U.S%5BTitle%5D)+AND+%22J+Womens+Health%22%5BJournal%5D)">Gender disparity in the funding of diseases by the U.S.</a> J Womens Health. 30 (7), 956-963 (2021).</li>
<li>MacLennan, A. H., Taylor, A. W., Wilson, D. H., Wilson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prevalence+of+pelvic+floor+disorders+and+their+relationship+to+gender%2C+age%2C+parity%2C+and+mode+of+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22BJOG%22%5BJournal%5D)">The prevalence of pelvic floor disorders and their relationship to gender, age, parity, and mode of delivery.</a> BJOG. 107 (12), 1460-1470 (2000).</li>
<li>Ruiz-Zapata, A. M., Kerkhof, M. H., Zandieh-Doulabi, B., Brölmann, H. A. M., Smit, T. H., Helder, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblasts+from+women+with+pelvic+organ+prolapse+show+differential+mechanoresponses+depending+on+surface+substrates%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Urogynecol+J+Pelvic+Floor+Dysfunct%22%5BJournal%5D)">Fibroblasts from women with pelvic organ prolapse show differential mechanoresponses depending on surface substrates.</a> Int Urogynecol J Pelvic Floor Dysfunct. 24 (9), 1567-1575 (2013).</li>
<li>Kaur, G., Dufour, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Spermatogenesis%22%5BJournal%5D)">Cell lines.</a> Spermatogenesis. 2 (1), 1-5 (2012).</li>
<li>Rorteau, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maintenance+of+chronological+aging+features+in+culture+of+normal+human+dermal+fibroblasts+from+old+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Maintenance of chronological aging features in culture of normal human dermal fibroblasts from old donors.</a> Cells. 11 (5), 858(2022).</li>
<li>Blum, M., Koehler, J., Yangdon, T., Chatterjea, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generating+primary+murine+vaginal+fibroblast+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22MethodsX%22%5BJournal%5D)">Generating primary murine vaginal fibroblast cell lines.</a> MethodsX. 7, 101100(2020).</li>
<li>Kufaishi, H., Alarab, M., Drutz, H., Lye, S., Shynlova, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((comparative+characterization+of+vaginal+cells+derived+from+premenopausal+women+with+and+without+severe+pelvic+organ+prolapse%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">comparative characterization of vaginal cells derived from premenopausal women with and without severe pelvic organ prolapse.</a> Reprod Sci. 23 (7), 931-943 (2016).</li>
<li>Ruiz-Zapata, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vaginal+fibroblastic+cells+from+women+with+pelvic+organ+prolapse+produce+matrices+with+increased+stiffness+and+collagen+content%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Vaginal fibroblastic cells from women with pelvic organ prolapse produce matrices with increased stiffness and collagen content.</a> Sci Rep. 6 (1), 22971(2016).</li>
<li>Khan, M., Gasser, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generating+primary+fibroblast+cultures+from+mouse+ear+and+tail+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Generating primary fibroblast cultures from mouse ear and tail tissues.</a> J Vis Exp. (107), e53565(2016).</li>
<li>Kufaishi, H., Alarab, M., Drutz, H., Lye, S., Shynlova, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Static+mechanical+loading+influences+the+expression+of+extracellular+matrix+and+cell+adhesion+proteins+in+vaginal+cells+derived+from+premenopausal+women+with+severe+pelvic+organ+prolapse%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">Static mechanical loading influences the expression of extracellular matrix and cell adhesion proteins in vaginal cells derived from premenopausal women with severe pelvic organ prolapse.</a> Reprod Sci. 23 (8), 978-992 (2016).</li>
<li>Medel, S., Alarab, M., Kufaishi, H., Drutz, H., Shynlova, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attachment+of+primary+vaginal+fibroblasts+to+absorbable+and+nonabsorbable+implant+materials+coated+with+platelet-rich+plasma%5BTitle%5D)+AND+%22Female+Pelvic+Med+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Attachment of primary vaginal fibroblasts to absorbable and nonabsorbable implant materials coated with platelet-rich plasma.</a> Female Pelvic Med Reconstr Surg. 21 (4), 190-197 (2015).</li>
<li>Awwad, J., Sayegh, R., Yeretzian, J., Deeb, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence%2C+risk+factors%2C+and+predictors+of+pelvic+organ+prolapse%5BTitle%5D)+AND+%22Menopause%22%5BJournal%5D)">Prevalence, risk factors, and predictors of pelvic organ prolapse.</a> Menopause. 19 (11), 1235-1241 (2012).</li>
<li>Waise, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+optimized+method+to+isolate+human+fibroblasts+from+tissue+for+ex+vivo+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">An optimized method to isolate human fibroblasts from tissue for ex vivo analysis.</a> Bio Protoc. 9 (23), e3440(2019).</li>
<li>Nadalutti, C. A., Wilson, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+human+primary+foreskin+fibroblasts+to+study+cellular+damage+and+mitochondrial+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Using human primary foreskin fibroblasts to study cellular damage and mitochondrial dysfunction.</a> Curr Protoc Toxicol. 86 (1), (2020).</li>
<li>Da Silva Lara, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Menopause+Leading+to+Increased+Vaginal+Wall+Thickness+in+Women+with+Genital+Prolapse%3A+Impact+on+Sexual+Response%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sex+Med%22%5BJournal%5D)">Menopause Leading to Increased Vaginal Wall Thickness in Women with Genital Prolapse: Impact on Sexual Response.</a> J Sex Med. 6 (11), 3097-3110 (2009).</li>
<li>Stasio, D. D., Lauritano, D., Iquebal, H., Romano, A., Gentile, E., Lucchese, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+oral+epithelial+thickness+by+optical+coherence+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Diagnostics%22%5BJournal%5D)">Measurement of oral epithelial thickness by optical coherence tomography.</a> Diagnostics. 9 (3), 90(2019).</li>
<li>Zorina, A., Zorin, V., Kudlay, D., Kopnin, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+changes+in+the+fibroblastic+differon+of+the+dermis%3A+role+in+skin+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Age-related changes in the fibroblastic differon of the dermis: role in skin aging.</a> Int J Mol Sci. 23 (11), 6135(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Amphotericin B</td><td>Bio Techne</td><td>B23192</td><td></td></tr><tr><td>Zellsieb (100 &mu; m)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>22363549</td><td></td></tr><tr><td>konische Zentrifugenröhrchen (15 mL)</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>14-959-53A</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11320033</td><td></td></tr><tr><td>Feder Einweg-Skalpell Nr. 15</td><td>Socorex</td><td>FB.15</td><td></td></tr><tr><td>Fötales Rinderserum</td><td>Sigma Aldrich</td><td>NC1983075</td><td></td></tr><tr><td>konische Zentrifugenröhrchen mit hoher Klarheit (50 mL)</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>14-432-22</td><td></td></tr><tr><td>HulaMixer Probenmischer</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15920D</td><td></td></tr><tr><td>Humanes Fibronektin DuoSet ELISA</td><td>R& D Systems</td><td>DY1918-05</td><td></td></tr><tr><td>Pro-Kollagen I alpha 1 DuoSet ELISA</td><td>R& D Systems</td><td>DY6220-05</td><td></td></tr><tr><td>Liberase Research Grade</td><td>Sigma Aldrich</td><td>05 401 119 001</td> Penicillin/Streptomycin <td></td></tr><tr><td>(5000U/ml)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15070063</td><td></td></tr><tr><td>Petrischale, Polystyrol (100 mm x 20 mm)</td><td>Millipore Sigma</td><td>P5606</td><td></td></tr><tr><td>Serologische Pipetten (10 mL)</td><td>ThermoFischer Scientific</td><td>170356N</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Spritzen (5 mL)</td><td>Fischer Scientific</td><td>14-955-458</td><td></td></tr></tbody></table>

gewebeaufbereitung und isolierung von primären fibroblasten aus der menschlichen vagina

Tissue Processing and Isolation of Primary Fibroblasts from the Human Vagina

Vaginalgewebe wurde von 10 unabhängigen Spendern entnommen, die sich einer Operation am Beckenorganprolaps unterzogen. Unter Verwendung des beschriebenen Protokolls wurden Zellen aus menschlichem Vaginalgewebe isoliert. Die Zellpopulationen hatten ein charakteristisches längliches, flaches und spindelförmiges Aussehen. Wie in anderen Studien auch, beobachteten wir mit zunehmendem Alter des Spenders eine signifikant langsamere Zellverdopplungskapazität und eine verringerte klonogene Fähigkeit der Fibroblasten. Diese Unterschiede zeigten sich beim Vergleich von Fibroblasten, die von älteren Personen (75-78 Jahre alt) isoliert wurden, mit solchen, die von jungen Personen (35-47 Jahre alt) isoliert wurden. Zellen von Spendern mittleren Alters wiesen ein mittleres Profil auf (56-61 Jahre alt). Die Zellproliferationsraten wurden zunächst durch direkte Visualisierung mit einem Phasenkontrastmikroskop mit der gleichen bekannten Seeding-Dichte abgeschätzt.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65864/65864fig01.jpg"> Abbildung 1: Schematische Darstellung des Protokolls. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65864/65864fig01large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
Abbildung 1 zeigt eine schematische Darstellung des Dissoziations- und Isolationsprotokolls. Nach diesen Schritten ergab dieses Protokoll bei neun von zehn Spendern eine Erfolgsrate von 90 % bei der Isolierung von primären Fibroblasten bei ausreichender Zellzahl, um eine Subkultivierung der Zellen zu ermöglichen. Das Durchschnittsalter der Spender betrug 59 Jahre.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Protokoll (Autor, Jahr)</td>
			<td>Spendergewebe des ursprünglichen Protokolls</td>
			<td>Anzahl der Spender</td>
			<td>Alter des Spenders in Jahren</td>
			<td>Erhaltene Fibroblasten</td>
			<td>Morphologie</td>
		</tr><tr><td>Ruiz-Zapata et al., 2013</td>
			<td>Menschliche Vagina</td>
			<td>3</td>
			<td>56-78</td>
			<td>Nein</td>
			<td>N/A</td>
		</tr><tr><td>Khan et al., 2016</td>
			<td>Mausohr und -schwanz</td>
			<td>2</td>
			<td>48-65</td>
			<td>Nein</td>
			<td>N/A</td>
		</tr><tr><td>Waise et al., 2019</td>
			<td>Menschliches Gewebe</td>
			<td>3</td>
			<td>56-75</td>
			<td>Nein</td>
			<td>N/A</td>
		</tr><tr><td>Nadalutti et al., 2020</td>
			<td>Menschliche Vorhaut</td>
			<td>1</td>
			<td>65</td>
			<td>Nein</td>
			<td>N/A</td>
		</tr><tr><td>Strömung</td>
			<td>Menschliche Vagina</td>
			<td>10</td>
			<td>35-79</td>
			<td>Ja</td>
			<td>Spindelförmig</td>
		</tr></tbody></table>Tabelle 1: Vergleich der Protokolle für die erfolgreiche Isolierung humaner vaginaler Fibroblasten. Vergleich verschiedener existierender Protokolle mit unseren und belegt durch morphologische Ergebnisse.
Tabelle 1 zeigt die Ergebnisse der Verwendung anderer Protokolle zur Isolierung vaginaler Fibroblasten in dieser Studie. Wir haben ein Standardprotokoll für die Isolierung von primären Fibroblasten aus der Vaginalschleimhaut und älteren Spendern entwickelt5.
Wir testeten mehrere etablierte Protokolle, einschließlich der in Tabelle 1 aufgeführten, und beobachteten in unserer Studie keinen Erfolg bei der Zellisolierung mit diesen Protokollen. Wir schlagen die folgenden Gründe für ihre Einschränkungen vor.
Das von Ruiz et al.3 veröffentlichte Protokoll sieht vor, die Faszien abzukratzen und das Gewebe in kleine Stücke zu schneiden. Unserer Erfahrung nach ist es schwierig, Faszien zu unterscheiden, und Versuche des Schabens können zu einer deutlichen Verringerung der Zellausbeute führen. Diese Methode ist zwar unkompliziert, aber es fehlen kritische Details, was ihre Verallgemeinerbarkeit einschränkt. Darüber hinaus scheint die mechanische Verdauung in diesem Protokoll für postmenopausales Gewebe, das tendenziell dichter ist, unzureichend zu sein.
Die von Khan et al.9 und Waise et al.13 veröffentlichten Protokolle verwenden eine Schere zum Zerkleinern des Gewebes, die im Vergleich zur Skalpelltechnik keine signifikanten multidirektionalen Scherkräfte einführt. Unserer Erfahrung nach hat auch die Scherenmethode nicht effektiv funktioniert.
Schließlich hat das Protokoll von Nadalutti et al.14 , das die Explantatmethode verwendete, keine Fibroblasten in unseren Händen hervorgebracht. Diese Methode kann aufgrund der Beschaffenheit des postmenopausalen Gewebes weniger effektiv sein, da möglicherweise eine aggressivere mechanische und enzymatische Verarbeitung erforderlich ist, um Fibroblasten erfolgreich zu dissoziieren.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65864/65864fig02.jpg"> Abbildung 2: Phasenkontrastbild von suspendierten Zellen am Tag 0. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65864/65864fig02large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung zu sehen.</a>
Abbildung 2 zeigt suspendierte Zellen an Tag 0 unter Verwendung unseres Protokolls.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65864/65864fig03.jpg"> Abbildung 3: Phasenkontrastbild von vaginalen primären Fibroblasten am Tag 14 der Kultur bei 100-facher Vergrößerung aus einer gepoolten Zellsuspension von drei 1 cm2 Gewebebiopsien. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65864/65864fig03large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
Abbildung 3 zeigt primäre Fibroblasten bei 100-facher Vergrößerung aus einer gepoolten Zellsuspension von 3 Gewebebiopsien von 1 cm² Dimension.
Die Identität der Fibroblasten wurde mit Immunfluoreszenztechniken, wie zuvor beschrieben, mit geringfügigen Modifikationen untersucht. Um den zellulären Ursprung primärer Vaginalzellen zu verifizieren, verwendeten wir spezifische Biomarker fibroblastischen Ursprungs mittels Immunfluoreszenzfärbung. Die Zellen wurden als Fibroblasten identifiziert, basierend auf einer positiven Färbung von Vimentin (Abbildung 4), F-Aktin und α-SMA aus prämenopausalen und postmenopausalen Gewebeproben (Abbildung 5). Fibroblasten wurden bis zur Expansion mit hoher Lebensfähigkeit (&gt;90%) kultiviert, um sie in Experimenten zu verwenden.
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65864/65864fig04.jpg"> Abbildung 4: Positive Färbung von Vimentin von vaginalen Fibroblasten. Die isolierten primären Fibroblasten des prämenopausalen und postmenopausalen Gewebes wurden einer IF-Analyse unterzogen und die Bilder wurden mit 200-facher Vergrößerung aufgenommen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65864/65864fig04large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65864/65864fig05.jpg"> Abbildung 5: Positive Färbung von F-Aktin und α-SMA von vaginalen Fibroblasten. Die Ergebnisse der Proteinexpression im Vergleich zur IgG-Kontrolle. Die Bilder wurden mit 200-facher Vergrößerung aufgenommen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65864/65864fig05large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>

Gewebeaufbereitung und Isolierung von primären Fibroblasten aus der menschlichen Vagina

Pelvic organ prolapse is a disorder that seriously impacts the quality of life of women. It occurs when muscles and ligaments weaken and cause pelvic ...

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Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Dieser Artikel beschreibt ein Protokoll für die Isolierung und Instandhaltung von Fibroblastenkulturen von Haut-und Lungengewebe von wilden Nagetieren.

Gründung Primary Adult Fibroblastenkulturen von Nagetieren

Die Fibroblasten Explantatkultur Protokoll aus der menschlichen Haut Stanzbiopsien ist eine technisch robuste und einfache Weise abzuleiten Hautzellen innerhalb von 4-8 Wochen für Banken von etwa 15-20 Millionen Zellen auf einem niedrigen Durchgang Nummer.

Haut Stanzbiopsie Explantatkultur für die Ableitung des primären humanen Fibroblasten

Wir berichten über eine Methode, um naive multipotent Haut stammenden Vorläufer (SKP) Zellen aus primären humanen Fibroblasten Kulturen zu isolieren. Wir zeigen, dass diese SKPs von Fibroblastenkulturen abgeleitet ähnliche Stammzellen Eigenschaften teilen, die, die direkt aus der menschlichen Haut Biopsien abgeleitet. Diese Zellen exprimieren die Neuralleisten Marker Nestin, zusätzlich zu der multipotenten Marker wie OCT4 und Nanog.

Naive Adult Stem Cells Isolation von primären humanen Fibroblasten Kulturen

Das Verhalten von Fibroblasten liegt einem Spektrum klinischer Entitäten zugrunde, aber sie bleiben schlecht charakterisiert, hauptsächlich aufgrund ihrer inhärenten Heterogenität. Die traditionelle Fibroblastenforschung beruht auf In-vitro-Manipulation, um das Verhalten von Fibroblasten in vivo zu maskieren. Wir beschreiben ein FACS-basiertes Protokoll für die Isolierung von Hautfibroblasten der Maus, das keine Zellkultur erfordert.

Murine Hautfibroblasten-Isolation durch FACS

Hier wird ein Protokoll zur Isolierung und Etablierung von primären Fibroblasten/Myofibroblasten (MF)-Kulturen aus gefrorenen Magen-, kleinen Darm- und Dickdarmgewebe-liefernden Zellen mit einem MF-Phänotyp vorgestellt. Diese Zellen exprimieren CD90, α-SMA und Vimentin. MFs können für eine Vielzahl von funktionellen Assays verwendet werden, einschließlich enzymatischer Aktivität und Zytokinproduktion.

Isolierung von CD 90+ Fibroblasten / Myofibroblasten von Human Gefrorene Magen-Darm-Proben

Dieses Manuskript beschreibt ein FACS-basiertes Protokoll zur Isolierung von papillären und Netzfibroblasten von der menschlichen Haut. Sie umgeht in der vitro-Kultur, die mit dem häufig verwendeten Isolationsprotokoll über Explantationskulturen unvermeidlich war. Die ausstrahlenden fibroblasten Untersätze sind funktional unterscheidbar und zeigen eine differenzierte Genexpression und Lokalisierung innerhalb der Dermis.

Isolierung von papillären und retikulären Fibroblasten aus der menschlichen Haut durch Fluoreszone-aktivierte Zellsortierung

Wir präsentieren ein Protokoll, um primäre erwachsene Fibroblasten auf einfache, schnelle und zuverlässige Weise zu isolieren, die von Anfängern (z. B. Studenten) durchgeführt werden können. Das Verfahren kombiniert enzymatische Gewebeverdauung und mechanische Agitation mit Ultraschallwellen, um primäre Fibroblasten zu erhalten. Das Protokoll kann leicht an spezifische experimentelle Anforderungen (z.B. menschliches Gewebe) angepasst werden.

Ultraschall-augmented Primary Adult Fibroblast Isolation

Die Zellumprogrammierung erfordert die Einführung von Schlüsselgenen, die den pluripotenten Zellzustand regulieren und aufrechterhalten. Das beschriebene Protokoll ermöglicht die Bildung induzierter pluripotenter Stammzellen (iPSCs) aus menschlichen dermalen Fibroblasten ohne virale/integrierende Methoden, aber unter Verwendung nicht modifizierter RNAs (NM-RNAs) in Kombination mit Immunumgehungsfaktoren, die die zellulären Abwehrmechanismen reduzieren.

Isolierung von adulten menschlichen Dermal-Fibroblasten aus der Bauchhaut und Generierung induzierter pluripotenter Stammzellen mit einer nicht-integrierenden Methode

Dieser Beitrag beschreibt eine explantationskulturbasierte Methode zur Isolierung und Kultivierung primärer, patientenspezifischer humaner Aortenglattmuskelzellen und dermaler Fibroblasten. Weiterhin wird eine neuartige Methode zur Messung der Zellkontraktion und anschließenden Analyse vorgestellt, mit der patientenspezifische Unterschiede in diesen Zellen untersucht werden können.

Isolierung primärer patientenspezifischer glatter Aortenmuskelzellen und semiquantitative Echtzeit-Kontraktionsmessungen in vitro

Die Untersuchung der Wundheilung im Zusammenhang mit Muskel-Skelett-Verletzungen erfordert oft die Beurteilung von In-vitro-Interaktionen zwischen Schwann-Zellen (SCs), Keratinozyten und Fibroblasten. Dieses Protokoll beschreibt die Isolierung, Kultivierung und Charakterisierung dieser Primärzellen aus der menschlichen Vorhaut.

Isolierung, Kultur und Charakterisierung von primären Schwann-Zellen, Keratinozyten und Fibroblasten aus der menschlichen Vorhaut

Diese Studie beschreibt ein optimiertes Protokoll zur Etablierung von primären Fibroblasten aus Keloidgeweben, die effektiv und stetig reine und lebensfähige Fibroblasten bereitstellen können.

Isolierung, Kultivierung und Charakterisierung von primären dermalen Fibroblasten aus humanem Keloidgewebe

Erfahren Sie die Isolierung primärer Fibroblasten aus menschlichem Vaginalgewebe für die Erforschung von Beckenorganprolaps. Diese optimierte Methode kombiniert mechanische und enzymatische Aufschlussverfahren für prä- und postmenopausale Spender.

Gewebeaufbereitung und Isolierung von primären Fibroblasten aus der menschlichen Vagina

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