Name: Die blutdrucksenkende Wirkung und die Mechanismen der Huotan Jiedu Tongluo-Abkochung bei Ratten mit H-Typ-Hypertonie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-17T13:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 57 s
Description: Erfahren Sie die blutdrucksenkende Wirkung der Huotan Jiedu Tongluo-Abkochung bei Ratten mit H-Typ-Hypertonie. Diese traditionelle chinesische Medizin hemmt den ER-Stress und induziert Apoptose.

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Diese Arbeit wurde unterstützt von der Nationalen Naturwissenschaftlichen Stiftung der Provinz Jilin (Nr. YDZJ202301ZYTS189).

Antihypertensive Wirkungen von Huotan Jiedu Tongluo bei hypertensiven Ratten vom H-Typ

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<li>Tan, Y., Nie, F., Wu, G., Guo, F., Wang, Y., Wang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+h-type+hypertension+on+intraplaque+neovascularization+assessed+by+contrast-enhanced+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22J+Atheroscler+Thromb%22%5BJournal%5D)">Impact of h-type hypertension on intraplaque neovascularization assessed by contrast-enhanced ultrasound.</a> J Atheroscler Thromb. 29 (4), 492-501 (2022).</li>
<li>Towfighi, A., Markovic, D., Ovbiagele, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pronounced+association+of+elevated+serum+homocysteine+with+stroke+in+subgroups+of+individuals%3A+A+nationwide+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Sci%22%5BJournal%5D)">Pronounced association of elevated serum homocysteine with stroke in subgroups of individuals: A nationwide study.</a> J Neurol Sci. 298 (1-2), 153-157 (2010).</li>
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<li>Tian, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Huotan+Jiedu+Tongluo+decoction+inhibits+balloon-injury-induced+carotid+artery+intimal+hyperplasia+in+the+rat+through+the+perk-eif2%CE%B1-atf4+pathway+and+autophagy+mediation%5BTitle%5D)+AND+%22Evid+Based+Complement+Alternat+Med%22%5BJournal%5D)">Huotan Jiedu Tongluo decoction inhibits balloon-injury-induced carotid artery intimal hyperplasia in the rat through the perk-eif2α-atf4 pathway and autophagy mediation.</a> Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 5536237(2021).</li>
<li>Simko, F., Pechanova, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+roles+of+melatonin+and+chronotherapy+among+the+new+trends+in+hypertension+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pineal+Res%22%5BJournal%5D)">Potential roles of melatonin and chronotherapy among the new trends in hypertension treatment.</a> J Pineal Res. 47 (2), 127-133 (2009).</li>
<li>Li, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((H-type+hypertension+is+a+risk+factor+for+cerebral+small-vessel+disease%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Res+Int%22%5BJournal%5D)">H-type hypertension is a risk factor for cerebral small-vessel disease.</a> BioMed Res Int. 2020, 6498903(2020).</li>
<li>Rodrigo, R., Passalacqua, W., Araya, J., Orellana, M., Rivera, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Homocysteine+and+essential+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Homocysteine and essential hypertension.</a> J Clin Pharmacol. 43 (12), 1299-1306 (2003).</li>
<li>Lehmann, M., Gottfries, C. G., Regland, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+cognitive+impairment+in+the+elderly%3A+Homocysteine+is+an+early+marker%5BTitle%5D)+AND+%22Dement+Geriatr+Cogn%22%5BJournal%5D)">Identification of cognitive impairment in the elderly: Homocysteine is an early marker.</a> Dement Geriatr Cogn. 10 (1), 12-20 (1999).</li>
<li>dos Santos, E. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+that+folic+acid+deficiency+is+a+major+determinant+of+hyperhomocysteinemia+in+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Metab+Brain+Dis%22%5BJournal%5D)">Evidence that folic acid deficiency is a major determinant of hyperhomocysteinemia in Parkinson's disease.</a> Metab Brain Dis. 24 (2), 257-269 (2009).</li>
<li>Zhao, W., Gao, F., Lv, L., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+interaction+of+hypertension+and+homocysteine+increases+the+risk+of+mortality+among+middle-aged+and+older+population+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hypertens%22%5BJournal%5D)">The interaction of hypertension and homocysteine increases the risk of mortality among middle-aged and older population in the United States.</a> J Hypertens. 40 (2), 254-263 (2022).</li>
<li>Woo, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperhomocyst%28e%29inemia+is+a+risk+factor+for+arterial+endothelial+dysfunction+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Hyperhomocyst(e)inemia is a risk factor for arterial endothelial dysfunction in humans.</a> Circulation. 96 (8), 2542-2544 (1997).</li>
<li>Lu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+intervention+of+enalapril+maleate+and+folic+acid+tablet+on+the+expressions+of+the+grp78+and+chop+and+vascular+remodeling+in+the+vascular+smooth+muscle+cells+of+h-hypertensive+rats+with+homocysteine%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Rev+Med+Pharmaco%22%5BJournal%5D)">The intervention of enalapril maleate and folic acid tablet on the expressions of the grp78 and chop and vascular remodeling in the vascular smooth muscle cells of h-hypertensive rats with homocysteine.</a> Eur Rev Med Pharmaco. 22 (7), 2160-2168 (2018).</li>
<li>López-García, P., Moreira, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+forces+for+the+origin+of+the+eukaryotic+nucleus%5BTitle%5D)+AND+%22BioEssays%22%5BJournal%5D)">Selective forces for the origin of the eukaryotic nucleus.</a> BioEssays. 28 (5), 525-533 (2006).</li>
<li>Minamino, T., Komuro, I., Kitakaze, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoplasmic+reticulum+stress+as+a+therapeutic+target+in+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Endoplasmic reticulum stress as a therapeutic target in cardiovascular disease.</a> Circ Res. 107 (9), 1071-1082 (2010).</li>
<li>Chen, X., Cubillos-Ruiz, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoplasmic+reticulum+stress+signals+in+the+tumour+and+its+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Endoplasmic reticulum stress signals in the tumour and its microenvironment.</a> Nat Rev Cancer. 21 (2), 71-88 (2021).</li>
<li>Ji, C., Kaplowitz, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperhomocysteinemia%2C+endoplasmic+reticulum+stress%2C+and+alcoholic+liver+injury%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Gastroentero%22%5BJournal%5D)">Hyperhomocysteinemia, endoplasmic reticulum stress, and alcoholic liver injury.</a> World J Gastroentero. 10 (12), 1699-1708 (2004).</li>
<li>Zhang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Homocysteine+induces+programmed+cell+death+in+human+vascular+endothelial+cells+through+activation+of+the+unfolded+protein+response%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Homocysteine induces programmed cell death in human vascular endothelial cells through activation of the unfolded protein response.</a> J Biol Chem. 276 (38), 35867-35874 (2001).</li>
<li>Cunard, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoplasmic+reticulum+stress%2C+a+driver+or+an+innocent+bystander+in+endothelial+dysfunction+associated+with+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Cur+Hypertens+Rep%22%5BJournal%5D)">Endoplasmic reticulum stress, a driver or an innocent bystander in endothelial dysfunction associated with hypertension.</a> Cur Hypertens Rep. 19 (8), 64(2017).</li>
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<li>Urano, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coupling+of+stress+in+the+ER+to+activation+of+JNK+protein+kinases+by+transmembrane+protein+kinase+ire1%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Coupling of stress in the ER to activation of JNK protein kinases by transmembrane protein kinase ire1.</a> Science. 287 (5453), 664-666 (2000).</li>
<li>Borghi, A., Verstrepen, L., Beyaert, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRAF2+multitasking+in+tnf+receptor-induced+signaling+to+nf-%CE%BAb%2C+map+kinases+and+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">TRAF2 multitasking in tnf receptor-induced signaling to nf-κb, map kinases and cell death.</a> Biochem Pharmacol. 116, 1-10 (2016).</li>
<li>Wen, X. -R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Butylphthalide+suppresses+neuronal+cells+apoptosis+and+inhibits+JNK-caspase3+signaling+pathway+after+brain+ischemia+%2Freperfusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Butylphthalide suppresses neuronal cells apoptosis and inhibits JNK-caspase3 signaling pathway after brain ischemia /reperfusion in rats.</a> Cell Mol Neurobiol. 36 (7), 1087-1095 (2016).</li>
<li>Jin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serine-threonine+protein+kinase+activation+may+be+an+effective+target+for+reducing+neuronal+apoptosis+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">Serine-threonine protein kinase activation may be an effective target for reducing neuronal apoptosis after spinal cord injury.</a> Neural Regen Res. 10 (11), 1830-1835 (2015).</li>
<li>Xu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estrogen+and+propofol+combination+therapy+inhibits+endoplasmic+reticulum+stress+and+remarkably+attenuates+cerebral+ischemia-reperfusion+injury+and+ogd+injury+in+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Estrogen and propofol combination therapy inhibits endoplasmic reticulum stress and remarkably attenuates cerebral ischemia-reperfusion injury and ogd injury in hippocampus.</a> Biomed Pharmacother. 108, 1596-1606 (2018).</li>
</ol>

Wir erklären, dass die Forschung in Abwesenheit von kommerziellen oder finanziellen Beziehungen durchgeführt wurde, die als potenzieller Interessenkonflikt ausgelegt werden könnten.

Bluthochdruck ist eine der häufigsten Herz-Kreislauf-Erkrankungen, von der ein Drittel der erwachsenen Bevölkerung betroffen ist und die das Risiko für Schlaganfälle, koronare Herzkrankheiten sowie Herz- und Nierenversagen erhöht8. Die H-Typ-Hypertonie ist eine spezielle Form der Hypertonie, die sich auf das gleichzeitige Auftreten von primärer Hypertonie und erhöhtem Homocysteinspiegel bezieht und im Laufe der Jahre breite Aufmerksamkeit erregt hat9. In den letzten Jahren hat die Verwendung von oraler EM in Kombination mit blutdrucksenkenden Medikamenten eine verbesserte Wirksamkeit in Bezug auf die Kontrolle des Blutdrucks und die Senkung des Hcy-Spiegels im Blut gezeigt, aber es gibt immer noch viele Kontraindikationen, Nebenwirkungen, Arzneimittelresistenzen und andere Mängel wie Kopfschmerzen, Schwindel, Müdigkeit, Husten und Hypotonie. Die traditionelle chinesische Medizin bietet Vorteile bei der Behandlung von H-Typ-Hypertonie durch ihren personalisierten Ansatz, der sich mit den zugrunde liegenden Ursachen befasst und komplementäre Wirkungen mit weniger Nebenwirkungen bietet, was eine effektive langfristige Behandlung der Erkrankung ermöglicht. In dieser Studie fanden wir heraus, dass die Formel HTJDTLD der traditionellen chinesischen Medizin offensichtlich blutdrucksenkende Wirkungen auf den Methionin-induzierten H-Typ-Hypertonie hatte. Noch wichtiger ist, dass HTJDTLD die blutdrucksenkende Wirksamkeit von EM, der ersten zugelassenen Behandlung von Bluthochdruck im Zusammenhang mit erhöhtem Hcy, signifikant verbesserte. Die Verabreichung von EM führt jedoch manchmal zu einigen Nebenwirkungen. 
Der Spiegel von Hcy, einer schwefelhaltigen Aminosäure, die während des Stoffwechsels von Methionin gebildet wird, ist bei kardiovaskulären und neurodegenerativen Erkrankungen wie Bluthochdruck10, Alzheimer, Demenz11 und Parkinson12 erhöht. Eine frühere Studie deutete auch darauf hin, dass die Wechselwirkung zwischen Bluthochdruck und Homocystein das Mortalitätsrisiko bei Menschen mittleren Alters und älteren Menschen beeinflusst13. Woo et al.14 berichteten, dass erhöhte Hcy-Spiegel eine endotheliale Dysfunktion verursachen und mit arterieller Steifigkeit verbunden sind, die auf die Zerstörung von Elastinfasern und die Erhöhung der Kollagenproduktion zurückzuführen ist. In dieser Studie fanden wir heraus, dass der Hcy-Spiegel im Plasma in der Methionin-Behandlungsgruppe signifikant erhöht war, was auch mit einem erhöhten Blutdruck und signifikanten arteriellen pathologischen Veränderungen einherging. Die Behandlung mit HTJDTLD senkte jedoch signifikant den Blutdruck, linderte arterielle pathologische Schäden und senkte die Hcy-Spiegel. EM, ein neues Präparat, das sowohl Enalapril als auch Folsäure enthält, diente als erste zugelassene Behandlung von Bluthochdruck im Zusammenhang mit erhöhtem Hcy15. Es ist erwähnenswert, dass HTJDTLD die blutdrucksenkende Wirkung verstärkte, was sich in der Abnahme des Hcy-Spiegels und der Linderung pathologischer Veränderungen zeigt.
Das endoplasmatische Retikulum (ER) ist die zentrale Organelle für die Synthese, Faltung und Modifikation von sezernierten und Transmembranproteinen16. Eine Störung der normalen ER-Funktion kann zu ER-Stress führen, der mit vielen Krankheiten und in jüngerer Zeit mit Bluthochdruck in Verbindung gebracht wird17,18. Darüber hinaus haben frühere Berichte darauf hingewiesen, dass Hcy ER-Stress aktivieren kann, indem es die Bildung von Disulfidbindungen stört und die Lebensfähigkeit des Endothels und die Vasorelaxation reduziert19. Hcy-induzierter ER-Stress kann auch endotheliale Apoptose verursachen 20,21. Ob HTJDTLD durch die Regulierung von ER-Stress blutdrucksenkende Wirkungen ausübt, wurde jedoch nicht untersucht. Daher untersuchten wir die blutdrucksenkende Wirkung von HTJDTLD über den ER-Stress-induzierten Apoptoseweg. GPR78, auch bekannt als Bip, ist ein wichtiges Chaperon und wird nach ER-Stressaktiviert 22. Es wurde auch nachgewiesen, dass der Tumornekrosefaktor-Rezeptor-assoziierte Faktor 2 (TRAF2) mit zellulären Reaktionen auf intrinsische Signale wie ER-Stress assoziiert ist23. TRAF2 initiiert Signaltransduktionskaskaden, die zell- und kontextabhängig zur Aktivierung der c-Jun N-terminalen Kinase (JNK) führen24. Caspase-3, ein wichtiger Vollstrecker der Apoptose, spielt eine zentrale Rolle im apoptotischen Prozess und kann über verschiedene Wege über verschiedene Arten von Säugetierzellen aktiviert werden25. Caspase-3, ein entscheidender Vollstrecker der Apoptose, spielt eine zentrale Rolle im apoptotischen Prozess und kann über verschiedene Wege über verschiedene Säugetierzelltypen hinweg aktiviert werden26. Caspase-3 ist an der ER-Stress-vermittelten Apoptose beteiligt und dient als ultimatives gemeinsames Mitglied verschiedener apoptotischer Kaskaden27. In dieser Studie konnten wir die Gen- und Proteinexpression von GPR78, TRAF2, JNK und Caspase 3 mittels qRT-PCR und Western Blot nachweisen. Die Ergebnisse zeigten, dass die Behandlung mit Methionin die Gen- und Proteinexpression von GPR78, TRAF2, JNK und Caspase 3 signifikant erhöhte und HTJDTLD diese Gen- und Proteinexpression signifikant hemmte. Es gibt jedoch immer noch einige Einschränkungen bei der Verwendung nur dieser beiden Methoden. Es kann ideal sein, den Wirkmechanismus von HTJDTLD zu bewerten, indem der Inhibitor des ERS-bezogenen Signalwegs verwendet und die Zellapoptose durch Durchflusszytometrie nachgewiesen wird. Wir werden unser experimentelles Protokoll in zukünftigen Studien weiter verbessern.
Unsere Ergebnisse zeigten, dass HTJDTLD bei Ratten mit Methionin-induzierter H-Typ-Hypertonie blutdrucksenkende Wirkungen hatte. Der zugrundeliegende Mechanismus könnte die Hemmung der durch ER-Stressaktivierung induzierten Apoptose beinhalten. Aufgrund seiner blutdrucksenkenden Wirkung und seines potenziellen Mechanismus bei Ratten mit Methionin-induzierter Hypertonie ist HTJDTLD vielversprechend für zukünftige therapeutische Anwendungen bei der Behandlung von Bluthochdruck.

Bluthochdruck, ein Hauptrisikofaktor für Herzinfarkt, Schlaganfall und Nierenversagen, ist zu einer bedeutenden Herausforderung für die öffentliche Gesundheit geworden, von der weltweit 1 Milliarde Menschen betroffensind 1. Homocystein (Hcy), eine Thiolgruppe enthaltende Aminosäure, ist ein wichtiger Stoffwechselvermittler des Methioninstoffwechsels. Hypertonie mit erhöhten Hcy-Spiegeln im Plasma wird als H-Typ-Hypertonie definiert, die ein signifikanter Risikofaktor für das Auftreten und Wiederauftreten von kardiozerebrovaskulären Erkrankungen wie Schlaganfall sein könnte 2,3. Jüngste Studien haben berichtet, dass die gleichzeitige Residenz von H-Typ-Hypertonie die Nebenwirkungen von Herz-Kreislauf- und zerebrovaskulären Erkrankungen verschlimmern kann4. Bemerkenswert ist, dass 75 % der Patienten in China mit H-Typ-Hypertonie an primärer Hypertonie leiden, die die Lebensqualität ernsthaft beeinträchtigt5. Derzeit umfasst die Behandlung der Hypertonie vom H-Typ hauptsächlich die westliche Medizin. Es kann jedoch bestimmte Nebenwirkungen und eine schlechte Compliance verursachen und kann die Anforderungen an eine umfassende Behandlung der H-Typ-Hypertonie nicht mehr erfüllen.
Die Traditionelle Chinesische Medizin (TCM) ist eine einzigartige Ressource mit einer mehr als 2.000-jährigen Geschichte in China. Aufgrund des ungedeckten Bedarfs an Bluthochdruckkontrolle in der westlichen Medizin haben Kliniker begonnen, die mögliche Rolle der TCM bei der Prävention und Behandlung von H-Typ-Hypertonie in Betracht zu ziehen6. Huotan Jiedu Tongluo Decoction (HTJDTLD) ist eine Formel der traditionellen chinesischen Medizin, die von Professor Yue Deng formuliert wurde und sich auf seine umfangreiche klinische Expertise stützt7. Im Laufe von mehr als 20 Jahren klinischer Anwendung hat HTJDTLD eine bemerkenswerte Wirksamkeit bei der Behandlung von Herz-Kreislauf- und zerebrovaskulären Erkrankungen gezeigt1. Es wurde jedoch nicht berichtet, ob HTJDTLD therapeutische Wirkungen bei H-Typ-Hypertonie hat. Daher haben wir uns zum Ziel gesetzt, die blutdrucksenkende Wirkung und die spezifischen Mechanismen von HTJDTLD bei Ratten mit H-Typ-Hypertonie zu untersuchen und potenzielle therapeutische Medikamente zur Behandlung von H-Typ-Hypertonie zu identifizieren.

<table><tbody><tr><td>1. Strang cDNA-Synthese SuperMix für qPCR</td><td>Yeasen, China</td><td>11149ES</td><td>cDNA-Synthesekit&nbsp;</td></tr><tr><td>Anti-Beta-Aktin-Antikörper</td><td>Bioss, China</td><td>bs-0061R</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Caspase-3-Antikörper</td><td>Bioss, China</td><td>bs-0081R</td><td></td></tr><tr><td>Anti-GPR78-Antikörper</td><td>Abcam, USA</td><td>ab108513</td><td></td></tr><tr><td>Anti-JNK-Antikörper</td><td>Abcam, USA</td><td>ab76572</td><td></td></tr><tr><td>Anti-p-JNK-Antikörper</td><td>Bioss, China</td><td>bsm-52462R</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Kaninchen-IgG-Antikörper</td><td>Bioss, China</td><td>bs-0295G-HRP</td><td></td></tr><tr><td>Anti-TRAF2 Antikörper</td><td>Bioss, China</td><td>bs-22372R</td><td></td></tr><tr><td>Bio-Rad CFX96 Touch-System&nbsp;</td><td>Bio-Rad</td><td>CFX96</td><td>Echtzeit-PCR-Nachweissystem&nbsp;</td></tr><tr><td>ECL Western Blot Substrate</td><td>Merck, MA, USA</td><td>WBULP-10ML</td><td></td></tr><tr><td>Enalapril Maleat-Folsäure-Tabletten</td><td>Yangzijiang Pharmaceutical Company, China</td><td>20040991</td><td></td></tr><tr><td>FastStart SYBR Green</td><td>Master Sigma</td><td>FSSGMMRO</td><td></td></tr><tr><td>Fructus Trichosanthis</td><td>Das erste angeschlossene Krankenhaus der Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China</td><td>Keine Katalognummer</td><td></td></tr><tr><td>Hirudo</td><td>Das erste angeschlossene Krankenhaus der Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China</td><td>Keine Katalognummer</td><td></td></tr><tr><td>intelligentes nicht-invasives Blutdruckmessgerät&nbsp;</td><td>Beijing Softron Biotechnologie-Unternehmen</td><td>BP-2010A</td><td></td></tr><tr><td>Lonicerae Japonicae Flos</td><td>Das erste angeschlossene Krankenhaus der Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China</td><td>Keine Katalognummer</td><td></td></tr><tr><td>Methionin Sigma</td><td>, USA</td><td>M9500</td><td></td></tr><tr><td>Radix Angelicae Sinensis</td><td>Das erste angeschlossene Krankenhaus der Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China</td><td>Keine Katalognummer</td><td></td></tr><tr><td>Radix et Rhizoma Glycyrrhizae</td><td>Das erste angeschlossene Krankenhaus der Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China</td><td>Keine Katalognummer</td><td></td></tr><tr><td>Radix et Rhizoma Nardostachyos</td><td>Das erste angeschlossene Krankenhaus der Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China</td><td>Keine Katalognummer</td><td></td></tr><tr><td>Radix et Rhizoma Rhodiolae Crenulatae</td><td>Das erste angeschlossene Krankenhaus der Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China</td><td>Keine Katalognummer</td><td></td></tr><tr><td>Radix et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae</td><td>Das erste angeschlossene Krankenhaus der Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China</td><td>Keine Katalognummer</td><td></td></tr><tr><td>Radix Scrophulariae</td><td>Das erste angeschlossene Krankenhaus der Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China</td><td>Keine Katalognummer</td><td></td></tr><tr><td>Rat Hcy ELISA Kits</td><td>Shanghai Meimian Industrial Company, China</td><td>MM-0293R2</td><td></td></tr><tr><td>RIPA Puffer</td><td>Shanghai Beyotime Biotechnologie</td><td>Unternehmen P0013B</td><td></td></tr></tbody></table>

die blutdrucksenkende wirkung und die mechanismen der huotan jiedu tongluo-abkochung bei ratten mit h-typ-hypertonie

The Antihypertensive Effects and Mechanisms of Huotan Jiedu Tongluo Decoction in Rats with H-Type Hypertension

Die H-Typ-Hypertonie, eine spezifische Form der Hypertonie, die durch erhöhte Homocysteinspiegel (Hcy) im Plasma gekennzeichnet ist, ist weltweit zu einer großen Herausforderung für die öffentliche Gesundheit geworden. Diese Studie untersuchte die blutdrucksenkende Wirkung und die zugrunde liegenden Mechanismen der Huotan Jiedu Tongluo-Abkochung (HTJDTLD), einer hochwirksamen Formel der traditionellen chinesischen Medizin, die häufig zur Behandlung von Gefäßstenose eingesetzt wird. Methionin wurde verwendet, um H-Typ-Hypertonie bei Ratten zu induzieren, und HTJDTLD wurde intragastrisch verabreicht. Anschließend wurden der systolische und diastolische Blutdruck der Schwanzarterie von Ratten durch nichtinvasive kaudale Manometrie der Ratte gemessen. Die histologische Beurteilung der Aorta erfolgte durch Hämatoxylin-Eosin (HE)-Färbung. Zur Messung des Hcy-Spiegels wurde ein Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) verwendet, und zur Bestimmung der mRNA- und Proteinspiegel des Glukose-regulatorischen Proteins 78 (GRP78), des Tumornekrosefaktors (TNF)-Rezeptor-assoziierten Faktors 2 (TRAF2), der c-Jun N-terminalen Kinasen (JNK) und Caspase-3 wurden die quantitativen Reverse-Transkriptase-Polymerase-Polymerase-Kettenreaktionen (qRT-PCR) und Western Blotting verwendet. Die Ergebnisse zeigten, dass HTJDTLD nach der Behandlung mit Methionin den Blutdruck signifikant senkte, histopathologische Läsionen linderte und die Hcy-Spiegel senkte. Darüber hinaus hemmte HTJDTLD signifikant die Gen- und Proteinexpression von GRP78, JNK, TRAF2 und Caspase 3, die hauptsächlich am Stress-induzierten Apoptoseweg des endoplasmatischen Retikulums (ER) beteiligt sind. Insgesamt zeigten die Ergebnisse, dass HTJDTLD bei Ratten mit H-Typ-Hypertonie wirksame blutdrucksenkende Wirkungen hatte und die blutdrucksenkenden Mechanismen aufzeigten, die mit der Hemmung der Aktivierung des ER-Stress-induzierten Apoptosewegs verbunden sind.

Wie in Tabelle 4 und Tabelle 5 gezeigt, waren der systolische Blutdruck (SBP) und der diastolische Blutdruck (DBP) in der MET-Gruppe von 1 bis 4 Wochen signifikant höher als in der CON-Gruppe. Nach HTJDTLD-Behandlung waren die SBP und DBP der Ratten signifikant niedriger als die der MET-Gruppe. Bemerkenswert ist, dass die kombinierte Anwendung von HTJDTLD und EM eine stärkere blutdrucksenkende Wirkung hatte als die HTJDTLD-Behandlung allein.
Gemäß der HE-Färbung und der Masson-Trichrom-Färbung war das Endometrium der Aortengefäßwand unvollständig und nicht glatt, und das Medium war deutlich verdickt. Es kam zu einer Proliferation und Hypertrophie der glatten Muskelzellen, die Anzahl der Anordnungsschichten nahm zu und die Fasern waren in der MET-Gruppe im Vergleich zu denen in der CON-Gruppe ungeordnet. Das vaskuläre Endometrium erholte sich jedoch vollständiger und reibungsloser, die Medienverdickung wurde signifikant reduziert und die Intimschädigung in den Gruppen MET + HTJDTLD + EM, MET + EM und MET + HTJDTLD wurde signifikant gelindert (Abbildung 1 und Abbildung 2). Darüber hinaus war die Hcy-Konzentration in der Methioningruppe 2-fach höher als in der Kontrollgruppe. Die Hcy-Konzentrationen in den Gruppen MET + HTJDTLD + EM, MET + EM und MET + HTJDTLD waren jedoch signifikant niedriger als in der MET-Gruppe. Bemerkenswert ist, dass die signifikanteste Reduktion in der MET + HTJDTLD + EM-Gruppe festgestellt wurde, die etwa 1-mal niedriger war als die in der MET-Gruppe (Abbildung 3). Die mRNA- und Proteinexpressionsergebnisse zeigten, dass die Expression von GPR78, TRAF2, JNK, p-JNK und Caspase-3 nach einer Methioninbehandlung offensichtlich hochreguliert war. HTJDTLD, EM und die Kombination von HTJDTLD und EM hemmten jedoch signifikant die Hochregulation von GPR78, TRAF2, JNK und Caspase-3. Bemerkenswert ist, dass die kombinierte Anwendung von HTJDTLD und EM den signifikantesten Effekt hatte (Abbildung 4 und Abbildung 5).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65932/65932fig01.jpg"> Abbildung 1: HE-Färbung. Thorakales Aortengewebe histologische Veränderungen aus (A) CON-Gruppe, (B) MET-Gruppe, (C) MET + HTJDTLD + EM-Gruppe, (D) MET + EM-Gruppe und (E) MET + HTJDTLD-Gruppe. Die Zellkerne sind blau gefärbt, während das Zytoplasma und die extrazelluläre Matrix unterschiedlich stark rosa gefärbt sind (100x). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65932/65932fig01large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65932/65932fig02.jpg"> Abbildung 2: Masson-Färbung. (A) CON-Gruppe, (B) MET-Gruppe, (C) MET + HTJDTLD + EM-Gruppe, (D) MET + EM-Gruppe und (E) MET + HTJDTLD-Gruppe. In jeder Gruppe wurde eine Masson-Färbung der Aortengefäße durchgeführt, um die Wirkung von HTJDTLD auf die Ablagerung und Fibrose (100x) zu bewerten. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65932/65932fig02large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65932/65932fig03v2.jpg"> Abbildung 3: Der Pegel von Hcy. Die Serum-Hcy-Konzentration jeder Gruppe wurde mittels ELISA nachgewiesen. Die Daten wurden als mittlere ± SD dargestellt (n = 6, SD sind wie folgt: CON: 236,5 nmol/L, MET: 185 nmol/L, MET + HTJDTLD + EM: 126,8 nmol/L, MET + EM: 124 nmol/L, MET + HTJDTLD: 325 nmol/L). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65932/65932fig03large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65932/65932fig04.jpg"> Abbildung 4: Die mRNA-Expression von GRP78, TRAF2, JNK und Caspase-3. Nach Behandlung mit MET, MET + EM + HTJDTLD und MET + EM wurde die Expression von ERS-verwandten Genen mittels qRT-PCR nachgewiesen. Die Daten wurden als Mittelwert ± SD dargestellt (n = 6, SD wie folgt: GRP78 [CON: 0,12, MET: 0,13, MET + HTJDTLD + EM: 0,11, MET + EM: 0,17, MET + HTJDTLD: 0,12]; TRAF2 [CON: 0.09, MET: 0.09, MET + HTJDTLD + EM: 0.07, MET + EM: 0.11, MET + HTJDTLD: 0.13]; JNK [CON: 0,99, MET: 0,01, MET + HTJDTLD + EM: 0,03, MET + EM: 0,06, MET + HTJDTLD: 0,07; Caspase-8 [CON: 0,06, MET: 0,10, MET + HTJDTLD + EM: 0,01, MET + EM: 0,13, MET + HTJDTLD: 0,03). * stellt einen signifikanten Unterschied zur CON-Gruppe dar, # stellt einen signifikanten Unterschied zur MET-Gruppe dar, Δ stellt einen signifikanten Unterschied zur MET + HTJDTLD-Gruppe dar, und ∇ stellt einen deutlichen Unterschied zur MET + EM-Gruppe dar. p &lt; 0,01. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65932/65932fig04large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65932/65932fig05.jpg"> Abbildung 5: Die Proteinexpression von GRP78, TRAF2, JNK, p-JNK und Caspase-3. (A) Die Proteinproben wurden mittels Western Blotting mit GRP78, TRAF2, JNK, p-JNK und Caspase-3 Antikörpern analysiert. Als Kontrolle wurde GAPDH verwendet. (B) Die Quantifizierung der Proteine GRP78, RAF2, JNK, p-JNK und Caspase-3 wurde durch Densitometrie bestimmt und auf GAPDH normiert. Die Daten wurden als mittlere ± SD (n = 6) dargestellt. * stellt einen deutlichen Unterschied zur CON-Gruppe dar, p &lt; 0,01. # stellt einen signifikanten Unterschied zur MET-Gruppe dar, Δ stellt einen signifikanten Unterschied zur MET + HTJDTLD-Gruppe dar und ∇ stellt einen signifikanten Unterschied zur MET + EM-Gruppe dar. p &lt; 0,01. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65932/65932fig05large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Reverse Transkriptionsreaktion</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Bestandteil</td>
			<td>Volumen (ml)</td>
		</tr><tr><td>Gesamt-RNA</td>
			<td>2</td>
		</tr><tr><td>gDNA-Fermenter-Mix</td>
			<td>3</td>
		</tr><tr><td>SuperMix plus</td>
			<td>5</td>
		</tr><tr><td>RNase-freies Wasser</td>
			<td>10</td>
		</tr><tr><td colspan="2">Das Reaktionsprogramm sah wie folgt aus: 25 °C, 5 min; 55 °C, 15 min; 85 °C, 5 Min.</td>
		</tr><tr><td>RT-PCR</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Bestandteil</td>
			<td>Volumen (ml)</td>
		</tr><tr><td>Schablone</td>
			<td>2</td>
		</tr><tr><td>Vorwärts-Grundierung (10μM)</td>
			<td>0.4</td>
		</tr><tr><td>Umgekehrte Grundierung (10μM)</td>
			<td>0.4</td>
		</tr><tr><td>Grüner qPCR-Mix</td>
			<td>10</td>
		</tr><tr><td>Nukleasefreies Wasser</td>
			<td>7.2</td>
		</tr><tr><td colspan="2">Das Reaktionsprogramm sah wie folgt aus: Vordenaturierung 95 °C, 5 min; Denaturierung 95 °C, 10 s; Glühen/Verlängern 60 °C, 45 s, für insgesamt 40 Zyklen.</td>
		</tr></tbody></table>Tabelle 1: Reaktionsvolumina der reversen Transkription.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Name der Grundierung</td>
			<td>Sequenz (5' bis 3')</td>
		</tr><tr><td>GPR78-F</td>
			<td>CGTCGTATGTGGCCTTCACT</td>
		</tr><tr><td>GPR78-R</td>
			<td>ATTCCAAGTGCGTCCGATGA</td>
		</tr><tr><td>TRAF2-F</td>
			<td>GAAGGGAGCATTCCTAGACC</td>
		</tr><tr><td>TRAF2-R</td>
			<td>GAAGGGAGCATTCCTAGACC</td>
		</tr><tr><td>JNK-F</td>
			<td>GTCAGAATCCGAACGAGA</td>
		</tr><tr><td>JNK-R</td>
			<td>GTCTACGCAGGCAATCG</td>
		</tr><tr><td>Caspase-3-F</td>
			<td>GCGGTATTGAGACAGACAGTGGAAC</td>
		</tr><tr><td>Caspase-3-R</td>
			<td>GCGGTAGAGTAAGCATACAGGAAGTC</td>
		</tr></tbody></table>Tabelle 2: Liste der Primer.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>10% Trenngel, 5 mL System:</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Bestandteil</td>
			<td>Volumen (ml)</td>
		</tr><tr><td>H2Ω</td>
			<td>1.9</td>
		</tr><tr><td>30% Acrylamid</td>
			<td>1.7</td>
		</tr><tr><td>1,5 mol/L Tris-HCL (pH 8,8)</td>
			<td>1.3</td>
		</tr><tr><td>10% Sicherheitsdatenblatt</td>
			<td>0.05</td>
		</tr><tr><td>10% Ammoniumpersulfat</td>
			<td>0.05</td>
		</tr><tr><td>TEMED</td>
			<td>0.002</td>
		</tr><tr><td>5% konzentriertes Gel, 3 mL System:</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Bestandteil</td>
			<td>Volumen (ml)</td>
		</tr><tr><td>H2Ω</td>
			<td>2.1</td>
		</tr><tr><td>30% Acrylamid</td>
			<td>0.5</td>
		</tr><tr><td>1,0 mol/L Tris-HCL (pH 6,8)</td>
			<td>0.38</td>
		</tr><tr><td>10% Sicherheitsdatenblatt</td>
			<td>0.03</td>
		</tr><tr><td>10% Ammoniumpersulfat</td>
			<td>0.03</td>
		</tr><tr><td>TEMED</td>
			<td>0.003</td>
		</tr></tbody></table>Tabelle 3: Zusammensetzung der Trennung und des konzentrierten Gels.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Gruppe</td>
			<td>1 Woche</td>
			<td>2 Wochen</td>
			<td>3 Wochen</td>
			<td>4 Wochen</td>
		</tr><tr><td>BETRÜGEN</td>
			<td>163,4 ± 6</td>
			<td>150,1 ± 7,0</td>
			<td>134,2 ± 9,9</td>
			<td>158,8 ± 10,2</td>
		</tr><tr><td>TRAF</td>
			<td>192.1 ± 9.5##</td>
			<td>166,7 ± 12,8#</td>
			<td>177,3 ± 19,7##</td>
			<td>187 ± 23.6##</td>
		</tr><tr><td>MET+HTJDTLD+EM</td>
			<td>165.4 ± 9.2##</td>
			<td>148,9 ± 11,1*</td>
			<td>134,5 ± 12,3**</td>
			<td>159,2 ± 19,6**</td>
		</tr><tr><td>MET+EM</td>
			<td>173 ± 9.1##</td>
			<td>149,9 ± 18,7*</td>
			<td>145 ± 12.5**</td>
			<td>162,4 ± 19,1**</td>
		</tr><tr><td>MET+HTJDTLD</td>
			<td>176,7 ± 8,4##</td>
			<td>154,9 ± 22,8</td>
			<td>168,3 ± 10,2</td>
			<td>172,2 ± 17,4</td>
		</tr></tbody></table>Tabelle 4: Die Veränderungen des systolischen Drucks. #p &lt; 0,05 und ##p &lt; 0,01 vs. Kontrollgruppe, *p &lt;0,05 und **p &lt; 0,01 vs. MET-Gruppe.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Gruppe</td>
			<td>1 Woche</td>
			<td>2 Wochen</td>
			<td>3 Wochen</td>
			<td>4 Wochen</td>
		</tr><tr><td>BETRÜGEN</td>
			<td>138,4 ± 13,8</td>
			<td>121,2 ± 12,5</td>
			<td>107 ± 19.7</td>
			<td>131,1 ± 16,3</td>
		</tr><tr><td>TRAF</td>
			<td>147,9 ± 7,7#</td>
			<td>131 ± 11.9</td>
			<td>143,7 ± 19,6##</td>
			<td>146 ± 21.4##</td>
		</tr><tr><td>MET+HTJDTLD+EM</td>
			<td>139,4 ± 10</td>
			<td>123,1 ± 18,5</td>
			<td>117,1 ± 9,6**</td>
			<td>129,2 ± 18,6**</td>
		</tr><tr><td>MET+EM</td>
			<td>140,9 ± 13,4</td>
			<td>119,6 ± 7,8</td>
			<td>123,6 ± 10,8**</td>
			<td>128 ± 25.2**</td>
		</tr><tr><td>MET+HTJDTLD</td>
			<td>140,4 ± 11,3</td>
			<td>129,5 ± 11,1</td>
			<td>138,3 ± 15,1</td>
			<td>132,8 ± 16</td>
		</tr></tbody></table>Tabelle 5: Die Veränderungen des diastolischen Drucks.#p &lt; 0,05 und ##p &lt; 0,01 vs. Kontrollgruppe, **p &lt; 0,01 vs. MET-Gruppe.

Hier stellen wir ein Protokoll zur Induktion von H-Typ-Hypertonie vor und bewerten die blutdrucksenkende Wirkung der intragastrisch verabreichten Huotan Jiedu Tongluo-Abkochung (HTJDTLD). Bei Ratten mit H-Typ-Hypertonie hatte HTJDTLD eine wirksame blutdrucksenkende Wirkung, die möglicherweise mit einer Hemmung der stressinduzierten Apoptose-Aktivierung des endoplasmatischen Retikulums (ER) verbunden war.

Die blutdrucksenkende Wirkung und die Mechanismen der Huotan Jiedu Tongluo-Abkochung bei Ratten mit H-Typ-Hypertonie

H-type hypertension, which is a specific form of hypertension characterized by elevated plasma homocysteine (Hcy) levels, has become a major public health ...

Der Bluthochdruck vom H-Typ ist zu einer bedeutenden Herausforderung für die öffentliche Gesundheit des Menschen geworden. Es stützt sich hauptsächlich auf die Behandlung durch westliche Medizin, die traurige Auswirkungen haben kann. Unsere Forschung untersucht die blutdrucksenkenden Wirkungen und Mechanismen der Huotan Jiedu Tongluo-Abkochung, einer Formel der traditionellen chinesischen Medizin, bei Ratten mit H-Typ-Hypertonie.Unsere Studie zeigte, dass die Abkochung von Huotan Jiedu Tongluo bei Ratten mit H-Typ-Hypertonie blutdrucksenkende Wirkungen hatte. Der zugrundeliegende Mechanismus könnte die Hemmung der durch ER-Stressaktivierung induzierten Apoptose beinhalten, die eine wirksame Behandlungsoption für Patienten darstellt. Wir werden die potenziellen Biomarker für die Früherkennung und Prognose explodieren lassen und in Zukunft neuartige therapeutische Medikamente für H-Typ-Hypertonie entwickeln.

the-antihypertensive-effects-mechanisms-huotan-jiedu-tongluo

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Biochemistry

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