Name: Extraktion von Gift aus der parasitoiden Wespe Trichogramma dendrolimi mit Hilfe eines künstlichen Wirts (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-10-06T13:50:00.000+00:00
Duration: 3 min 53 s
Description: Lernen Sie eine effiziente Methode zur Giftextraktion aus der parasitoiden Wespe Trichogramma dendrolimi mithilfe eines künstlichen Wirts aus Polyethylenfolie. Dieses Protokoll ermöglicht präzise Analysen der Proteinzusammensetzung.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Wir bedanken uns für die finanzielle Unterstützung durch die Natural Science Foundation of Hainan Province (Grant No. 323QN262), die National Natural Science Foundation of China (Grant No. 31701843 und 32172483), den Jiangsu Agriculture Science and Technology Innovation Fund (Grant No. CX(22)3012 und CX(21)3008), die "Shuangchuang Doctor"-Stiftung der Provinz Jiangsu (Stipendium Nr. 202030472) und der Start-up-Fonds der Nanjing Agricultural University (Zuschuss Nr. 804018).

1. Insektenzucht
<ol><li> Corcyra cephalonica auf Maismehl bei einer Temperatur von 26 ± 1°C und einer relativen Luftfeuchtigkeit von 40% ± 10% füttern.</li>
	<li>Züchten Sie den Stamm T. dendrolimi aus dem Jilin-Insektarium in Innenräumen, indem Sie die Eier von Corcyra cephalonica als Wirte verwenden. Füttern Sie erwachsene Wespen mit 10 % Saccharosewasser in Drosophila-Röhrchen bei einer Temperatur von 26 ± 1 °C, relativer Luftfeuchtigkeit von 70 % ± 10 %, hell (L): dunkel (D) Periode von 14 h: 10 h.</li>
</ol>2. Vorbereitung von Eierkarten aus Polyethylen-Kunststofffolie
<ol><li>Nehmen Sie eine Polyethylen-Kunststofffolie mit einer Länge von 16 cm, einer Breite von 12 cm und einer Dicke von 20 μm. 30 halbkreisförmige Vorsprünge mit einem Durchmesser von 2-3 mm und einer Höhe von ca. 3 mm werden mit einem Glasschleifstab nach dem Standard-PCR-Plattenlayout von 96 Löchern herausgedrückt. HINWEIS: Beim Auspressen von 30 halbkreisförmigen Vorsprüngen mit einem Glasschleifstab muss auf den Druck geachtet werden, da ein zu starker Druck den Kunststoff durchbohrt und den extrahierten giftlosen Mahlstab verunreinigt.</li>
	<li>Desinfizieren Sie die gepresste Polyethylen-Kunststofffolie, indem Sie beide Seiten 1 h lang ultraviolettem (UV) Licht aussetzen.</li>
	<li>Geben Sie eine kleine Menge 10%igen Polyvinylalkohol auf die halbkreisförmige Oberfläche.</li>
</ol>3. Trichogramma dendrolimi Parasitismus
<ol><li>Nach der CO2 - Narkose wurden die weiblichen Wespen von T. dendrolimi in eine Sammelbox gegeben, und die Anzahl der Wespen betrug ~3000.</li>
	<li>Legen Sie die gewölbte Seite der Folieneierkarte in Richtung der Auffangbox und fixieren Sie die Ränder mit einem Gummiband.</li>
	<li>4 μl Aminosäurelösung (6 g/l Leucin, 4 g/l Phenylalanin, 4,25 g/l Histidin) zu jedem halbkreisförmigen Vorsprung hinzufügen. Decken Sie es mit einer flachen Polyethylen-Kunststofffolie von 16 cm Länge und 12 cm Breite ab. Verwenden Sie ein Gummiband, um die Auffangbox fest mit zwei Plastikfolien abzudecken.</li>
	<li>Lassen Sie T. dendrolimi-Wespen 4-8 h lang frei parasitieren und liefern Sie 10% Saccharosewasser durch befeuchtete Baumwolle.</li>
</ol>4. Sammeln von T. dendrolimi Gift
<ol><li>Entnehmen Sie die parasitierte Aminosäurelösung aus dem inneren Vorsprung der künstlichen Eikarte und geben Sie sie auf den Deckel von 1,5-ml-Röhrchen.</li>
	<li>Decken Sie die Röhrchenkappe mit einem 10 μm Nylonnetz mit 25 mm Durchmesser ab, befestigen Sie das Nylonnetz und das Zentrifugenröhrchen fest. Stellen Sie das Zentrifugenröhrchen für eine kurze Zentrifugation mit einer Mini-Zentrifuge (1360 x g) für 10 s aufrecht und sammeln Sie die filtrierte Lösung (~100 μl T. dendrolimi-Gift ).</li>
	<li>Messen Sie die Konzentration des gesammelten T. dendrolimi-Giftes mit einem Bicinchoninsäure-Assay-Kit (BCA) (Materialtabelle).</li>
	<li>Lagern Sie das Gift für weitere Analysen bei -80 °C.</li>
</ol>5. SDS-PAGE-Analysen
<ol><li>30 μl T. dendrolimi-Gift zu 10 μl 4x Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamid-Gelelektrophorese-Probenladepuffer (SDS-PAGE) (Materialtabelle) geben und 10 min bei 95 °C erhitzen.</li>
	<li>SDS-PAGE-Gellauf bei 130 V für 120 Minuten durchführen.</li>
	<li>Färben und entfärben Sie das SDS-PAGE-Gel mit dem Proteinfärbegerät (Materialtabelle).</li>
</ol>

Parasitierung des künstlichen Wirts durch Trichogramma dendrolimi und Giftextraktion

<ol><li>Pennacchio, F., Strand, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+developmental+strategies+in+parasitic+hymenoptera%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Evolution of developmental strategies in parasitic hymenoptera.</a> Annual Review of Entomology. 51, 233-258 (2006).</li>
<li>Yan, Z. C., Ye, X. H., Wang, B. B., Fang, Q., Ye, G. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+advances+on+composition%2C+function+and+evolution+of+venom+proteins+in+parasitoid+wasps%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Research advances on composition, function and evolution of venom proteins in parasitoid wasps.</a> Chinese Journal of Biological Control. 33 (1), 1-10 (2017).</li>
<li>Asgari, S., Rivers, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Venom+proteins+from+endoparasitoid+wasps+and+their+role+in+host-parasite+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Venom proteins from endoparasitoid wasps and their role in host-parasite interactions.</a> Annual Review of Entomology. 56, 313-335 (2011).</li>
<li>Moreau, S. J. M., Guillot, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+and+prospects+on+biosynthesis%2C+structures%2C+and+functions+of+venom+proteins+from+parasitic+wasps%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Biochemistry+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Advances and prospects on biosynthesis, structures, and functions of venom proteins from parasitic wasps.</a> Insect Biochemistry and Molecular Biology. 35 (11), 1209-1223 (2005).</li>
<li>Yan, Z. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+venom+serpin+splicing+isoform+of+the+endoparasitoid+wasp+Pteromalus+puparum+suppresses+host+prophenoloxidase+cascade+by+forming+complexes+with+host+hemolymph+proteinases%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">A venom serpin splicing isoform of the endoparasitoid wasp Pteromalus puparum suppresses host prophenoloxidase cascade by forming complexes with host hemolymph proteinases.</a> Journal Biological Chemistry. 292 (3), 1038-1051 (2017).</li>
<li>Woelke, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Description+and+biology+of+two+new+egg+parasitoid+species+%28Hymenoptera%3A+Trichogrammatidae%29+reared+from+eggs+of+Heliconiini+butterflies+%28Lepidoptera%3A+Nymphalidae%3A+Heliconiinae%29+in+Panama%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Natural+History%22%5BJournal%5D)">Description and biology of two new egg parasitoid species (Hymenoptera: Trichogrammatidae) reared from eggs of Heliconiini butterflies (Lepidoptera: Nymphalidae: Heliconiinae) in Panama.</a> Journal of Natural History. 53 (11-12), 639-657 (2019).</li>
<li>Zang, L. S., Wang, S., Zhang, F., Desneux, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+control+with+Trichogramma+in+China%3A+History%2C+present+status%2C+and+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Biological control with Trichogramma in China: History, present status, and perspectives.</a> Annual Review of Entomology. 66, 463-484 (2021).</li>
<li>Nettles, W. C. J., Morrison, R. K., Xie, Z. N., Ball, D., Shenkir, C. A., Vinson, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synergistic+action+of+potassium+chloride+and+magnesium+sulfate+on+parasitoid+wasp+oviposition%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Synergistic action of potassium chloride and magnesium sulfate on parasitoid wasp oviposition.</a> Science. 218, 4568(1982).</li>
<li>Tilden, R. L., Ferkovich, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kairomonal+stimulation+of+oviposition+into+an+artificial+substrate+by+the+endoparasitoid+Microplitis+croceipes+%28Hymenoptera%29Braconidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+Entomological+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Kairomonal stimulation of oviposition into an artificial substrate by the endoparasitoid Microplitis croceipes (Hymenoptera)Braconidae).</a> Annals of the Entomological Society of America. 81 (1), 152-156 (1988).</li>
<li>Xie, Z. N., Li, L., Xie, Y. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+culture+of+Habrobracon+hebetor%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Biological+Control%22%5BJournal%5D)">In vitro culture of Habrobracon hebetor.</a> Chinese Journal of Biological Control. 5 (2), 49-51 (1989).</li>
<li>Han, S. T., Liu, W. H., Li, L. Y., Chen, Q. X., Zeng, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breeding+Trichogramma+ostriniae+with+artificial+eggs%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Breeding Trichogramma ostriniae with artificial eggs.</a> Journal of Environmental Entomology. 21 (1), 9-12 (1999).</li>
<li>Li, L. Y., Chen, Q. X., Liu, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oviposition+behavior+of+twelve+species+of+Trichogramma+and+its+influence+on+the+efficiency+of+rearing+them+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Oviposition behavior of twelve species of Trichogramma and its influence on the efficiency of rearing them in vitro.</a> Journal of Environmental Entomology. 11 (1), 31-35 (1989).</li>
<li>Xing, J. Q., Li, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rearing+of+an+egg+parasite+Anastatus+japonicus+Ashmead+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Entomologica+Sinica%22%5BJournal%5D)">Rearing of an egg parasite Anastatus japonicus Ashmead in vitro.</a> Acta Entomologica Sinica. 33 (2), 166-173 (1990).</li>
<li>Moreau, S. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%22It+stings+a+bit+but+it+cleans+well%22%3A+Venoms+of+Hymenoptera+and+their+antimicrobial+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">"It stings a bit but it cleans well": Venoms of Hymenoptera and their antimicrobial potential.</a> Journal of Insect Physiology. 59 (2), 186-204 (2013).</li>
<li>Moreau, S. J. M., Asgari, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Venom+proteins+from+parasitoid+wasps+and+their+biological+function%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins%22%5BJournal%5D)">Venom proteins from parasitoid wasps and their biological function.</a> Toxins. 7 (7), 2385-2412 (2015).</li>
</ol>

Der Autor hat nichts offenzulegen und keine konkurrierenden finanziellen Interessen.

In dieser Arbeit stellen wir eine Methode zur Extraktion von Gift aus T. dendrolimi unter Verwendung künstlicher Wirte vor. Die wichtigsten Punkte im Experiment mit der Giftsammlung sind folgende. (1) Während der Herstellung muss T. dendrolimi schnell mit einer geeigneten Konzentration vonCO2 betäubt werden. Ist die CO2 - Konzentration zu niedrig, reicht sie nicht aus, um das Trichogramma schnell zu betäuben. Umgekehrt, wenn die Konzentration zu hoch ist, kann Trichogr...

Schlupfwespen sind parasitäre Hautflüglerinsekten, die wichtige Ressourcen für die biologische Bekämpfung darstellen1. Es gibt eine große Vielfalt an parasitoiden Wespen mit schätzungsweise über 600.000 Arten2. Die Vielfalt der Schlupfwespen übersteigt die anderer giftiger Gliederfüßer wie Schlangen, Kegelschnecken, Spinnen, Skorpione und Bienen bei weitem. Gift ist ein wichtiger parasitärer Faktor bei Schlupfwespen. Für einen erfolgreichen Parasitismus wird Gift in den Wirt injiziert, wodurch das Verhalten, die Immunität, die Entwicklung und der Stoffwechsel des Wirts moduliertwerden 3. Darüber hinaus weist das Gift parasitoider Wespen eine bemerkenswerte Vielfalt in seinen molekularen Strukturen, Zielen und Funktionen auf, was eine komplexe Koevolution mit ihren Wirten widerspiegelt. Daher ist parasitoides Gift eine wertvolle und unterschätzte Ressource aktiver Moleküle für insektizide oder medizinische Zwecke4. Im Gegensatz zum Gift von Schlangen, Kegelschnecken, Spinnen, Skorpionen und Bienen kann parasitoides Wespengift nicht durch direkte Stimulation oder elektrische Stimulation gesammelt werden5. Die derzeitige Methode zur Extraktion von parasitoidem Wespengift besteht darin, das Giftreservoir zu sezieren. Parasitoide Wespen sind jedoch oft klein, und das Sezieren von parasitoiden Wespen erfordert hohe technische Fähigkeiten. Wenn wir also einen Weg finden, das Gift von Schlupfwespen effizient und bequem zu sammeln, wird es eine große Hilfe sein, das Gift von Schlupfwespen zu erforschen.
Trichogramma (Hymenoptera: Trichogrammatidae) ist eine Gattung winziger (~0,5 mm langer) parasitoider Wespen6. Diese Wespen gehören zu den am weitesten verbreiteten biologischen Schädlingsbekämpfungsmitteln, insbesondere gegen Eier verschiedener Schmetterlingsschädlinge in der Land- und Forstwirtschaft. Zum Beispiel wurde T. dendrolimi, eine der am weitesten verbreiteten Trichogramma-Arten in China, in großem Umfang zur Bekämpfung einer Vielzahl von land- und forstwirtschaftlichen Schädlingen wie Dendrolimus superans, Ostrinia furnacalis und Chilo suppressalis eingesetzt. Frühere Studien zeigten, dass Trichogramma-Wespen ihre Eier in künstliche Wirte injizieren konnten7. Künstliche Wirte können mit Materialien wie Wachs8, Agar9, Parafilm10 und Kunststofffolie11 hergestellt werden. Die Lösung in künstlichen Wirten, die eine ausreichende Eiablage für Trichogramma induziert, kann einfach sein, wie z. B. Aminosäuren oder anorganische Salze12. Basierend auf der Eigenschaft, dass T. dendrolimi künstliche Wirte parasitieren kann, bietet diese Studie eine neue Methode zur Extraktion von Gift aus parasitoiden Wespen mit Hilfe künstlicher Wirte. Dieser Ansatz zielt darauf ab, die Unzulänglichkeiten der geringen Ausbeute, der geringen Reinheit und der Anfälligkeit für Verunreinigungen in den derzeitigen Extraktionstechniken zu beheben. Mit dieser Methode kann eine große Menge an hochreinem Gift aus T. dendrolimi extrahiert werden, das den Anforderungen der wissenschaftlichen Forschung und des Screenings bioaktiver Moleküle für insektizide oder medizinische Zwecke entspricht.

<table><tbody><tr><td>10 &mu; m Nylon Net</td><td>Millipore</td><td>NY1002500</td><td>Zum Filtern der Eier</td></tr><tr><td>10% Polyvinylalkohol</td><td>Aladdin</td><td>P139533</td><td>Zum Anlocken von T. dendrolimi&nbsp; zur Eiablage</td></tr><tr><td>10% Saccharosewasser</td><td>Sinopharm Chemisches Reagenz</td><td>10021463</td><td>Feed Trichogramma dendrolimi</td></tr><tr><td>4x LDS Ladepuffer</td><td>Ace Hardware</td><td>B23010301</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Auffangbox</td><td>Deli</td><td>8555</td><td>Behälter für T. dendrolimi parasitism</td></tr><tr><td>Future PAGE&nbsp; 4&ndash; 12% (12 Vertiefungen)</td><td>Ace Hardware</td><td>J70236502X</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>GenScript eStain L1 Proteinfärbegerät</td><td>GenScript</td><td>L00753</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Glasschleifstab &nbsp;</td><td>Applygen</td><td>tb6268</td><td>Halbkreisförmige Vorsprünge&nbsp;</td></tr><tr><td>L-Leucin</td><td>Solarbio</td><td>L0011</td><td>Künstliche Wirtskomponenten</td></tr><tr><td>L-Histidin</td><td>Aladdin</td><td>A2219458</td><td>Künstliche Wirtskomponenten</td></tr><tr><td>L-Phenylalanin</td><td>Solarbio</td><td>P0010</td><td>Künstliche Wirtskomponenten</td></tr><tr><td>Mini-Zentrifugen</td><td>Scilogex</td><td>D1008</td><td>Zentrifuge</td></tr><tr><td>MOPS-SDS Running Buffer</td><td>Ace Hardware</td><td>B23021</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Omni-Easy Instant BCA-Protein-Assay-Kit</td><td>Shanghai Yamay Biomedical Technology</td><td>ZJ102</td><td>Zur Bestimmung der Giftproteinkonzentration</td></tr><tr><td>PCR-Plattenlayout von 96 Löchern</td><td>Thermo Fisher</td><td>AB1400L</td><td>Halbkreisförmige Vorsprünge&nbsp;</td></tr><tr><td>Polyethylen-Kunststofffolie</td><td>Suzhou Aopang Trading &nbsp;</td><td>001c5427</td><td>Karte mit künstlichem Ei</td></tr><tr><td>Vorgefärbter Proteinmarker (10&ndash; 180 kDa)</td><td>YiFeiXue Biotech</td><td>YWB007</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Gummiband</td><td>Guangzhou qianrui biologie wissenschaft und technologie</td><td>009</td><td>Ziehen Sie die Kunststofffolie und die Auffangbox</td></tr> fest <tr><td>Silikonkautschuk-Septenmatte, 96-Well, rundes Loch</td><td>Sangon Biotech</td><td>F504416-0001</td><td>Halbkreisförmige Vorsprünge&nbsp;</td></tr></tbody></table>

extraktion von gift aus der parasitoiden wespe trichogramma dendrolimi mit hilfe eines künstlichen wirts

Extracting Venom from the Parasitoid Wasp Trichogramma dendrolimi Using an Artificial Host

Parasitoide Wespen sind eine vielfältige Gruppe von Hautflüglerinsekten, die als unschätzbare Ressourcen für die biologische Schädlingsbekämpfung dienen. Um einen erfolgreichen Parasitismus zu gewährleisten, injizieren parasitoide Wespen Gift in ihre Wirte, um die Immunität ihrer Wirte zu unterdrücken und die Entwicklung, den Stoffwechsel und sogar das Verhalten der Wirte zu modulieren. Mit über 600.000 geschätzten Arten übertrifft die Vielfalt der parasitoiden Wespen die anderer giftiger Tiere wie Schlangen, Kegelschnecken und Spinnen. Parasitoides Wespengift ist eine wenig erforschte Quelle bioaktiver Moleküle mit potenziellen Anwendungen in der Schädlingsbekämpfung und Medizin. Das Sammeln von parasitoidem Gift ist jedoch eine Herausforderung, da es nicht möglich ist, direkte oder elektrische Stimulation zu verwenden, und die Dissektion aufgrund ihrer geringen Größe schwierig ist. Trichogramma ist eine Gattung winziger (~0,5 mm) Ei-Parasitoid-Wespen, die zur biologischen Bekämpfung von Lepidoptera-Schädlingen sowohl in der Landwirtschaft als auch in der Forstwirtschaft weit verbreitet sind. Hier berichten wir über eine Methode zur Extraktion von Gift aus T. dendrolimi unter Verwendung künstlicher Wirte. Diese künstlichen Wirte werden mit Polyethylenfolie und Aminosäurelösungen erzeugt und dann mit Trichogramma-Wespen gegen Parasitismus geimpft. Das Gift wurde anschließend aufgefangen und konzentriert. Diese Methode ermöglicht die Extraktion großer Mengen von Trichogramma-Gift und vermeidet gleichzeitig eine Kontamination durch andere Gewebe, die durch die Dissektion verursacht wird, ein häufiges Problem bei Giftreservoir-Dissektionsprotokollen. Dieser innovative Ansatz erleichtert die Untersuchung des Giftes von Trichogramma und ebnet den Weg für neue Forschungen und potenzielle Anwendungen.

Die Proteinkonzentration repräsentativer Giftproben wurde mit dem Protein-Assay-Kit gemessen, wobei die Ergebnisse in Tabelle 1 dargestellt sind. Die Ergebnisse zeigten, dass die Konzentration des mit dieser Methode gesammelten Giftproteins zwischen 0,35 μg/μl und 0,46 μg/μl lag, während die Negativkontrolle der Aminosäurelösung nur eine Proteinkonzentration von 0,03 μg/μl bis 0,05 μg/μl aufwies. Die Konzentration des Giftproteins, das mit dieser Methode gesammelt wird, ist viel höher als die der Negativ...

Hier stellen wir ein Protokoll zur Extraktion von Gift aus Trichogramma dendrolimi unter Verwendung eines künstlichen Wirts vor, der mit Polyethylenfilm und Aminosäurelösung hergestellt wurde.

Extraktion von Gift aus der parasitoiden Wespe Trichogramma dendrolimi mit Hilfe eines künstlichen Wirts

Parasitoid wasps are a diverse group of hymenopteran insects that serve as invaluable resources for pest biocontrol. To ensure successful parasitism, ...

Der Mangel an effizienten Methoden zur Giftgewinnung schränkt die Erforschung des Giftes von Schlupfwespen, insbesondere bei winzigen Schlupfwespen, oft ein. Diese Studie bietet eine effiziente Methode zur Extraktion des Giftes von Trichogramma mit anschließender Nachuntersuchung des Trichogramma-Giftes, wie z.B. der Proteinkompensation und der Giftfunktionsanalyse. Bisher gab es keine Methoden zum Austausch von parasitoidem Wespengift, bei denen die Giftreserve unterschieden werden musste.Schlupfwespen sind jedoch winzig. Nicht nur die technischen Anforderungen an die Unterscheidung des Giftes sind hoch, sondern auch die Fortsetzung anderer Gewebe während der Sektion ist üblich. Unsere normale Methode verwendet einen künstlichen Wirt, wodurch solche Probleme vermieden werden.In Zukunft werden wir uns auf die Landwirtschaft und die medizinischen Anwendungen von Trichogramma-Gift konzentrieren. Unser Ziel ist es, spezifische insektizide Giftgene zur Schädlingsbekämpfung zu nutzen. In der Zwischenzeit planen wir, das ungenutzte Potenzial des Trichogramma-Giftes in der Methodik zu untersuchen, insbesondere seinen potenziellen Nutzen bei der Verbesserung von Immuntherapietechniken und bei der Entdeckung neuer Antibiotikamoleküle.

extracting-venom-from-parasitoid-wasp-trichogramma-dendrolimi-using

Research

Forschung

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemie

Parasitoiden (parasitäre) Wespen stellen eine große Klasse von natürlichen Feinde vieler Insekten...

Eine Einführung in die parasitischen Wespen<em&gt; Drosophila</em&gt; Und die antiparasitäre Immune Response

Dieser Artikel enthält ein Protokoll für die Extraktion von Gift von Spinnen mit Elektrostimulation, um 1) durchzuführen Proteom Charakterisierung, 2) stimulieren Giftdrüse Genexpression, und 3) durchführen funktionelle Studien von Giften. Dies wird durch eine Beschreibung der Giftdrüse Mikrodissektionen für Genexpressionsstudien gefolgt.

Extraktion von Venom und Giftdrüse Mikrodissektionen von Spiders für Proteomik und transkriptomischen Analysen

Mikroinjektion von Nasonia Vitripennis Embryonen ist eine wesentliche Methode zur Erzeugung von erblichen Genom Modifikationen. Hier beschrieben, ist eine detaillierte Anleitung für die Mikroinjektion und Transplantation von Nasonia Vitripennis Embryonen, die zukünftige Genom Manipulation in diesem Organismus erheblich erleichtern wird.

Embryo Mikroinjektion und Transplantation Technik für Nasonia Vitripennis Genom Manipulation

Obwohl viele Insekten in der Unterordnung Heteroptera (Insecta: Hemiptera) sind giftig, deren Venom-Zusammensetzung und die Funktionen ihrer Venom-Toxine sind meist unbekannt. Dieses Protokoll beschreibt Methoden zum Heteropteran Gifte für weitere Charakterisierung, mittels Elektrostimulation, Belästigung und Drüse Dissektion zu ernten.

Ernte Venom Giftstoffe aus Assassin Bugs und andere Heteropteran Insekten

Ganaspis brasiliensis - ein Larvenparasitoid von Drosophila suzukii (ein globaler invasiver Obstkulturpest) - wurde zur biologischen Bekämpfung dieses Schädlings in Europa und den Vereinigten Staaten zugelassen oder wird für die Einführung in Europa und die Vereinigten Staaten in Betracht gezogen. Dieser Artikel enthält Protokolle für die Aufzucht dieses parasitoiden Parasitoids in kleinem und großem Maßstab.

Methoden zur Aufzucht des parasitoiden Ganaspis brasiliensis, einem vielversprechenden biologischen Bekämpfungsmittel für die invasive Drosophila suzukii

Die Manipulation der RNA-Interferenz (RNAi) stellt bei vielen parasitoiden Arten mit geringer Größe, wie z. B. Trichogramma-Wespen , eine gewaltige Herausforderung dar. Diese Studie beschrieb eine effiziente RNAi-Methode in Trichogramma denrolimi. Die vorliegende Methodik bietet ein robustes Modell für die Untersuchung der Genregulation bei Trichogramma-Wespen .

RNA-Interferenz im Ei-Parasitoiden, Trichogramma dendrolimi matsumura

Ziel dieses Protokolls ist es, die funktionelle Analyse der Parasitoid-Wirt-Interaktionen bei Asobara japonica und Drosophila melanogaster zu erleichtern. Durch optimierte Aufzuchtmethoden, einen Infektionstest mit einer einzelnen Eiablage und RNAi-vermittelte Gen-Knockdown.

Protokolle für effiziente Aufzucht und funktionelle Analyse der endoparasitoiden Wespe Asobara japonica und ihres Wirts Drosophila melanogaster

Wir stellen Richtlinien für die Entwicklung synthetischer 'chemischer Wandler' vor, die die Kommunikation zwischen natürlich nicht verwandten Proteinen induzieren können. Darüber hinaus werden detaillierte Protokolle für die Synthese und Prüfung eines spezifischen "Schallkopfs" vorgestellt, der es einem Wachstumsfaktor ermöglicht, ein entgiftendes Enzym zu aktivieren und folglich die Spaltung eines Krebsprodrugs zu regulieren.

Imitieren die Funktion von Signalproteinen: Gegen künstliches Signal Transduction Therapie

Wir stellen den Aufbau und das experimentelle Verfahren vor, um smFRET-Daten aus großen Donor-Akzeptor-Netzwerken mit einem TIRF-Mikroskop zu erhalten. Die Schritt-für-Schritt-Analyse dieser Messungen mit der Bayes'schen Inferenzsoftware Fast-NPS liefert durch die Anwendung angepasster Farbstoffmodelle hochaufgelöste Strukturinformationen.

Strukturelle Informationen vom Einzelmolekül-FRET-Experimente unter Verwendung des Fast Nano-Positionierungssystem

Wir haben es geschafft, eine Methode zur RNA-Isolierung aus Pflanzensamen zu etablieren, die große Mengen an Ölen, Proteinen und Polyphenolen enthalten, die eine hemmende Wirkung auf die hochreine RNA-Isolierung haben. Unsere Methode eignet sich zur Überwachung der Expression von Genen mit niedrigen Transkripten in Saatgut.

Eine effiziente Methode zur Isolierung von Highly Purified RNA aus Samen für die Verwendung in Quantitative Transkriptomanalyse

Lernen Sie eine effiziente Methode zur Giftextraktion aus der parasitoiden Wespe Trichogramma dendrolimi mithilfe eines künstlichen Wirts aus Polyethylenfolie. Dieses Protokoll ermöglicht präzise Analysen der Proteinzusammensetzung.

Extraktion von Gift aus der parasitoiden Wespe Trichogramma dendrolimi mit Hilfe eines künstlichen Wirts

Weitere Videos entdecken