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DOI: 10.3791/66066-v
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Forscher, die neu auf dem Gebiet der Epigenetik sind, werden in CUT&Tag eine deutlich einfachere Alternative zu ChIP-Assays finden. CUT&Tag hat die epigenetischen Studien an seltenen und primären Zellpopulationen enorm begünstigt und qualitativ hochwertige Daten von sehr wenigen Zellen generiert. Dieses Protokoll beschreibt die Durchführung von H3K4me1 CUT&Tag-Assays an Mausmyoblasten, die aus den Hintergliedmaßenmuskeln der Maus isoliert wurden.
Die Forschung unserer Gruppe konzentriert sich darauf, wie die Genomstruktur und die Transkription in adulten Skelettmuskelstammzellen reguliert und aufrechterhalten werden, insbesondere während Sulfatveränderungen wie Stammzellbindung, Differenzierung und Tinasis. Adulte Skelettmuskelstammzellen, die nur 1 % der mononukleierten Zellen im Muskelgewebe ausmachen, stellen aufgrund ihrer Seltenheit in Einzelzellsuspensionen, die aus der Muskelverdauung gewonnen werden, eine Herausforderung für Chromatin-Merkmalsstudien mit High-C, ChIPs und ATAC-Äquivalenten dar. Die Chromatin-Immunpräzipitation, ChIP, ist ein wichtiges Werkzeug für die Profilierung von Genommerkmalen.
Eine einfachere, effizientere Cut&Tag-Technik, die von Dr. Steven Henikoff entwickelt wurde, übertrifft ChIP oft, insbesondere bei der Untersuchung der Epigenetik in seltenen Zellpopulationen. Die Benutzerfreundlichkeit erweitert den Zugang für Forscher, auch für Nicht-Epigenetiker.
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