Name: Antagonistische Wirkung von Jiawei Shengjiang San auf ein Rattenmodell der diabetischen Nephropathie: Verwandt mit dem EGFR/MAPK3/1-Signalweg (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-10T13:50:00.000+00:00
Duration: 8 min 15 s
Description: Erfahren Sie, wie Netzwerkpharmakologie und Moleküldocking die Wirkweise von Jiawei Shengjiang San bei diabetischer Nephropathie aufklären. Diese Methode identifiziert aktive Komponenten und konstruiert Zielnetzwerke für die traditionelle chinesische Medizin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Jiawei Shengjiang San zur Bekämpfung der diabetischen Nephropathie mit Hilfe der Netzwerkpharmakologie

<table><tbody><tr><td>2& mal; SYBR Green qPCR Master Mix&nbsp;</td><td>Servicebio, Wuhan, China</td><td>G3320-05</td><td></td></tr><tr><td>24-Stunden-Urinproteinquantifizierung (UTP)</td><td>Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>3,3'-Diaminobenzidin</td><td>Shanghai Huzheng Biotech, China</td><td>91-95-2</td><td></td></tr><tr><td>Automatisches biochemisches Analysegerät</td><td>Hitachi, Japan</td><td>7170A</td><td></td></tr><tr><td>Wasserfreies Ethanol</td><td>Biosharp, Tianjin, China</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>BAX Primäre Antikörper&nbsp;</td><td>Affinity, USA</td><td>AF0120</td><td>Ratte</td></tr><tr><td>BCL-2 Primäre Antikörper&nbsp;</td><td>Affinity, USA</td><td>AF6139</td><td>Ratte</td></tr><tr><td>BX53 Mikroskop</td><td>Olympus, Japan</td><td>BX53</td><td></td></tr><tr><td>Chloroform Substitute</td><td>ECOTOP, Guangzhou, China</td><td>ES-8522</td><td></td></tr><tr><td>Desmond Software&nbsp;</td><td>New York, NY, USA</td><td>Release 2019-1</td><td></td></tr><tr><td>Digitales Wasserbad mit konstanter Temperatur</td><td>Changzhou Jintan Liangyou Instrument, China</td><td>DK-8D</td><td></td></tr><tr><td>EGFR Primäre Antikörper&nbsp;</td><td>Affinity, USA</td><td>AF6043</td><td></td></tr> Ratten-Embed-812 <tr><td>RESIN</td><td>Shell Chemical, USA</td><td>14900</td><td></td></tr><tr><td>Nüchternblutzucker (FBG)</td><td>Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>FC-Typ Vollwellenlängen-Enzymmarkierungsanalysator</td><td>Multiskan; Thermo, USA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>GAPDH&nbsp; Primäre Antikörper&nbsp;</td><td>Affinity, USA</td><td>AF7021</td><td>Ratte</td></tr><tr><td>Glykiertes Serumprotein (GSP)</td><td>Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Transmissionselektronenmikroskop</td><td>Hitachi, Japan</td><td>H-7650</td><td></td></tr><tr><td>Hämatoxylin/Eosin (HE) Färbelösung</td><td>Servicebio, USA</td><td>G1003</td><td></td></tr><tr><td>Image-Pro Plus</td><td>MEDIA CYBERNETICS, USA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Real-Time-PCR-Amplifikationsinstrument</td><td>Applied Biosystems, USA</td><td>iQ5&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Irbesartan Tabletten</td><td>Hangzhou Sanofi Pharmaceuticals</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Isopropanol</td><td>Biosharp, Tianjin, China</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; JWSJS Granulat</td><td>Guangdong Yifang Pharmaceutical</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Kodak Image Station 2000 MM Imaging System</td><td>Kodak, USA</td><td>IS2000</td><td></td></tr><tr><td>Low-Density Cholesterin (LDL-C)</td><td>Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>MAPK3/1Primäre Antikörper&nbsp;</td><td>Affinity, USA</td><td>AF0155</td><td>Medizinische Zentrifuge für Ratten</td></tr><tr><td></td><td>Entwicklung von Laborinstrumenten, China&nbsp;</td><td>TGL-16K</td><td></td></tr><tr><td>Mini-Trans-Blot-Transfersystem</td><td>Bio-Rad, USA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Mini-PROTEAN-Elektrophoresesystem</td><td>Bio-Rad, USA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>NanoVue Plus Spektralphotometer</td><td>Healthcare Bio-Sciences AB, Schweden</td><td>111765</td><td></td></tr><tr><td>p-EGFR Primäre Antikörper&nbsp;</td><td>Affinity, USA</td><td>AF3044</td><td></td></tr><tr><td>Färbelösung für Periodensäure-Schiff (PAS)</td> bei Ratten <td>Servicebio, USA</td><td>G1008</td><td></td></tr><tr><td>p-MAPK3/1 Primäre Antikörper&nbsp;</td><td>Affinity, USA</td><td>AF1015</td><td>Ratte</td></tr><tr><td>Sekundäre Antikörper</td><td>&nbsp; Santa Cruz, USA</td><td>sc-2357</td><td>Kaninchen</td></tr><tr><td>Streptozotocin</td><td>Sigma, USA</td><td>S0130</td><td></td></tr><tr><td>SureScript Erststrang-cDNA-Synthesekit</td><td>GenCopeia, USA</td><td>QP056T</td><td></td></tr><tr><td>TriQuick Reagenz</td><td>Solarbio, Peking, China</td><td>R1100</td><td></td></tr><tr><td>Ultra-Clean Workbench</td><td>Suzhou Aufreinigungsanlage, China</td><td>SW-CJ-1F&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

antagonistische wirkung von jiawei shengjiang san auf ein rattenmodell der diabetischen nephropathie: verwandt mit dem egfr/mapk3/1-signalweg

Antagonistic Effect of Jiawei Shengjiang San on a Rat Model of Diabetic Nephropathy: Related to EGFR/MAPK3/1 Signaling Pathway

Dem Protokoll folgend wurden schließlich 90 Wirkstoffe von JWSJS aus der Analyse nach Screening und Deduplizierung nach den festgelegten Standards von OB und DL gewonnen. Dazu gehörten 20 Arten von Hedysarum Multijugum Maxim, 23 Arten von Epimrdii Herba, 15 Arten von Smilacis Glabrae Rhixoma, 16 Arten von Radix Rhei et Rhizome, vier Arten von Curcumaelongae Rhizoma, 15 Arten von Cicadae Periostracum und sechs Arten von Bombyx Batryticatus Komponenten. Da in JWSJS viele Wirkstoffe enthalten sind, sind nur 20 aufgeführt (siehe Tabelle 1). Nach der Deduplizierung wurden schließlich 396 Ziele erhalten, die den Wirkstoffen von JWSJS entsprechen.
Nach der Suche nach krankheitsbezogenen Genen wurden schließlich 3035 DN-bezogene Zielgene nach Zusammenführung und Deduplikation erhalten. Die entsprechenden Ziele von DN wurden mit den Zielen der Wirkstoffe der Medikamente verglichen und analysiert. Der Schnittpunkt wurde bestimmt, was zu 227 Schnittpunkten von JWSJS und DN führte. Anschließend wurde ein Wayne-Diagramm gezeichnet (siehe Abbildung 1A). Das "Wirkstoff-Wirkstoff-Ziel"-Netzwerkdiagramm wurde mit der Software Cytoscape 3.8.0 erstellt (siehe Abbildung 1B) und eine topologische Analyse durchgeführt. Jeder Knoten wurde entsprechend dem Gradwert von hoch bis niedrig eingestuft. Die fünf wichtigsten Wirkstoffkomponenten waren Quercetin, Palmitoleinsäure, Luteolin, Kaempferol und Naringenin, und die fünf wichtigsten Ziele waren PTGS2, PTGS1, NCoA2, AR und ESR1.
Als nächstes wurde ein PPI-Netzwerk für JWSJS- und DN-Schnittpunkte entwickelt (196 Knoten und 1714 Kanten mit einem mittleren Gradwert von 17,4). Darüber hinaus wurden nach drei Screenings sieben Schlüsselziele erhalten, die die Schlüsselziele von JWSJS für die DN-Behandlung sein könnten: MAPK14, TP53, MAPK3, MYC, HIF1A, ESR1 und MAPK1 (siehe Abbildung 1C).
Anschließend wurde eine GO-Anreicherungsanalyse durchgeführt, um über die biologischen Eigenschaften des Ziels von JWSJS bei der Behandlung von DN zu spekulieren. Unter BP, CC und MF sind die Top Ten der angereicherten Einträge in Abbildung 1D dargestellt. Die Ergebnisse zeigen, dass JWSJS die Zellproliferation, -differenzierung und -apoptose regulieren kann, indem es an Transkriptionsfaktoren und Proteinkinasen in Membran-Rafts und Membran-Mikrodomänen bindet, was zu einem therapeutischen Effekt auf DN führt. Die KEGG-Signalanreicherungsanalyse wurde an den teilnehmenden Targets durchgeführt, um die potenziellen Wirkwege von JWSJS bei DN zu untersuchen. Die dreißig wichtigsten angereicherten Signalwege sind in Abbildung 1E dargestellt. Die Ergebnisse zeigen, dass die JWSJS-Behandlung von DN auf 181 Signalwege wirken könnte, hauptsächlich auf Lipid- und Atherosklerose, den PI3K-Akt-Signalweg, chemische Karzinogenese, Hepatitis, Prostatakrebs, Apoptose, den HIF-1-Signalweg und den TNF-Signalweg.
Um die Ziele der ersten 30 KEGG-angereicherten Signalwege weiter zu untersuchen, verwendeten wir die Software Cytoscape 3.8.0, um eine KEGG-Signalweg-Beziehungskarte für JWSJS-behandelte DN zu erstellen. MAPK1, MAPK3, EGFR und AKT1 erwiesen sich als Ziele mehrerer Signalwege, die zusammen wirken (siehe Abbildung 1F), was darauf hindeutet, dass diese Proteine eine zentrale Rolle bei der Vermittlung der Auswirkungen von JWSJS auf DN spielen könnten.
Um die potenziellen Ziele von JWSJS bei der Behandlung von DN weiter zu validieren, untersuchten wir als nächstes drei Schlüsselziele, MAPK1, MAPK3 und EGFR, mit hohen Gradwerten im PPI-Netzwerk und im KEGG-Signalwegnetzwerk. Diese wurden molekular mit Quercetin, Palmitoleinsäure und Luteolin angedockt - den drei wichtigsten Kernkomponenten von JWSJS für die DN-Behandlung. Die Bedingungen für das Screening der PDB-ID sind wie folgt: (1) vom Menschen stammen; (2) Die Konformationsauflösung ≤ 2,5Å, d.h. so klein wie möglich; (3) Die Konformationssequenz muss so vollständig wie möglich sein, d.h. der Strukturkomplex muss Informationen über Liganden kleiner Moleküle aufweisen; und (4) Der kristalline pH-Wert sollte so nahe wie möglich am normalen physiologischen Bereich des menschlichen Körpers liegen35. Schließlich waren die PDB-IDs von MAPK1, MAPK3 und EGFR 4QTA, 4QTB und 7JXQ.
Um die Zuverlässigkeit der AutoDock-Software mit dem Andocksystem in dieser Studie36 zu überprüfen, haben wir zunächst die drei Proteine MAPK1, Mapk3 und EGFR redockiert. Die Ligandenkonformation in der ursprünglichen Kristallstruktur der drei Zielproteine wurde nach dem Andocken mit den Liganden überlagert (Abbildung 2A). Anschließend wurden die RMSD-Werte (Root-Mean-Square Deviation) zwischen der Ligandenkonformation nach dem Andocken und der ursprünglichen Kristallstruktur berechnet. Die RMSD-Werte betrugen 1,129, 1,201 bzw. 1,877 Å, alle ≤ 2Å. Dies zeigte, dass die Docking-Methode zuverlässig war und für die nächste molekulare Docking-Verifizierung verwendet werden konnte. Um das inhibitorische Potenzial der Kernkomponenten zu vergleichen und zu deklarieren, wurden dann die ursprünglichen Liganden von MAPK1, MAPK3 und EGFR als Kontrollen verwendet. Die Docking-Analyse sagte erfolgreich die Bindungsenergie zwischen Luteolin, Palmitoleinsäure und Quercetin und den drei Kernzielen voraus. Diese waren alle negativ und weniger als -637; siehe Tabelle 2. Bemerkenswert ist, dass das molekulare Andocken zwischen Luteolin und MAPK1 die höchste Kavitätengröße und die niedrigste Bindungsenergie aufweist. Insgesamt zeigten die Ergebnisse des molekularen Andockens, dass Luteolin, Palmitoleinsäure und Quercetin eine gute Bindungsaktivität mit drei Kernzielen aufwiesen (Abbildung 2B, C).
Der RMSD wird verwendet, um die durchschnittlichen Verschiebungsänderungen einer ausgewählten Gruppe von Atomen in Bezug auf ein Bezugssystem zu quantifizieren. In der Zwischenzeit charakterisiert der RMSF effektiv lokalisierte Veränderungen entlang der Proteinkette. Das RMSD-Diagramm (Abbildung 2D) zeigt, dass sich die RMSD-Werte der Verbindung Luteolin-MAPK1-Komplex und des Quercetin-MAPK3-Komplexes innerhalb von 5 ns stabilisiert haben. Der Luteolin-EGFR-Komplex zeigte einen fluktuierenden RMSD im Bereich von 0-35 ns; Dieser Wert stabilisierte sich bis zum Ende der 100 ns MD-Simulation bei 35 ns. Alle Komplexe interagierten am Ende der 100 ns MD-Simulation stabil. Der RMSF-Wert wurde anhand der MD-Simulationsbahn bewertet: Atome im aktiven Zentrum und in der Hauptkette, die minimal fluktuierten, implizierten eine minimale Konformationsänderung, was darauf hindeutet, dass die erwähnte Leitverbindung sicher im Hohlraum der Bindungstasche des Zielproteins verankert ist. Die RMSF-Ergebnisse zeigten begrenzte Schwankungen in den komplexen Strukturen.
Schließlich verifizieren wir die oben genannten Ergebnisse in vivo. Wir beobachteten zunächst, dass das Gewicht der Ratten in der Modellgruppe signifikant abnahm und GSP, LDL-C, UTP und FBG signifikant zunahmen (P &lt; 0,05). Das Körpergewicht der Ratten nahm in der Irbesartan-Gruppe und in jeder JWSJS-Gruppe im Vergleich zur Modellgruppe signifikant zu. GSP, LDL-C, UTP und FBG nahmen unterschiedlich stark ab (P &lt; 0,05; siehe Tabelle 3).
Dann zeigte die HE-Färbung, dass die Glomeruli in der Normalgruppe eine normale Größe hatten. Sie waren regelmäßig und klar in der Struktur und hatten eine glatte Basalmembran, sauber angeordnete Nierentubuli und keine infiltrierende Zellinfiltration. In der Modellgruppe waren die Glomeruli hypertroph, die Basalmembran war verdickt und die mesangiale Matrix war erhöht. Das Interstitium war mit Entzündungszellen infiltriert. Die pathologischen Manifestationen jeder Verabreichungsgruppe waren im Vergleich zur Modellgruppe unterschiedlich stark gelindert (siehe Abbildung 3A).
Die PAS-Färbung zeigte, dass die Modellgruppe im Vergleich zur Normalgruppe ein erhöhtes glomeruläres Volumen, eine verdickte Basalmembran und eine erhöhte mesangiale Matrix aufwies. Diese pathologischen Manifestationen wurden durch jede Verabreichungsgruppe signifikant gelindert (siehe Abbildung 3B). Mit Hilfe der Transmissionselektronenmikroskopie fanden wir heraus, dass die glomeruläre Basalmembran in der Modellgruppe im Vergleich zur Normalgruppe verdickt war. Die mesangiale Matrix wuchs und die Podozyten-Fußfortsätze wurden weitgehend miteinander verschmolzen. Mikroskopische Manifestationen von Ratten in jeder Verabreichungsgruppe waren im Vergleich zur Modellgruppe in unterschiedlichem Maße gelindert (siehe Abbildung 3C).
Schließlich wurden die Expressionen von Gesamt-EGFR, p-EGFR, MAPK3/1 und p-MAPK3/1 nachgewiesen, um zu sehen, ob sie sich in JWSJS-behandelten DN-Ratten veränderten. Es gab keine signifikante Veränderung in der Gesamtexpression von EGFR und MAPK3/1 in den Modellgruppen im Vergleich zur Normalgruppe. Die Expression von p-EGFR, p-MAPK3/1 und BAX stieg signifikant an, und die BCL-2-Expression nahm signifikant ab. Im Vergleich zur Modellgruppe war die Expression von p-EGFR, p-MAPK3/1 und BAX signifikant reduziert, und die BCL-2-Expression war in Rattennierengeweben in jeder Dosierungsgruppe in unterschiedlichem Maße signifikant hochreguliert (Abbildung 3D, E). Dieses Ergebnis wurde immunhistochemisch bestätigt (Abbildung 3F,G). Diese Studie zeigte, dass JWSJS die Nieren bei DN-Ratten schützen kann, indem es die Expression von p-EGFR-, p-MAPK3/1-, BAX- und BCL-2-Proteinen reguliert und die Zellapoptose reduziert. Darüber hinaus wurde die qPCR verwendet, um die Expressionsniveaus von MAPK3-, MAPK1- und EGFR-mRNA in verschiedenen Gruppen zu bewerten. Die Ergebnisse zeigten, dass die relative Expression in der DN-Gruppe im Vergleich zur Kontrollgruppe sowie den Gruppen Irbesartan, JWSJS-L, JWSJS-M und JWSJS-H signifikant höher war. Dieser Befund bestätigt die ersten Ergebnisse weiter (Abbildung 3H).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66179/66179fig01.jpg"> Abbildung 1: Die Netzwerkpharmakologie klärte die potenziellen Ziele und Signalwege des JWSJS bei der diabetischen Nephropathie. (A) Venn-Diagramm der sich überschneidenden Ziele von JWSJS und diabetischer Nephropathie. Grün stellt die Anzahl der therapeutischen Ziele von JWSJS-Komponenten dar, und Violett stellt die Anzahl der relevanten Ziele von DN dar. Der sich schneidende Teil stellt die Anzahl der sich überschneidenden Ziele dar (d. h. die Anzahl der Ziele von JWSJS für DN). (B) "Drug-ingredient-target"-Netzwerkdiagramm von JWSJS bei der Behandlung von DN. Das Hellblau stellt die relevanten Ziele von JWSJS für die DN-Behandlung dar. Fuchsia stellt den Wirkstoff von Bombyx Batryticatus dar. Grün stellt die Wirkstoffe von Hedysarum Multijugum Maxim dar. Dunkelblau repräsentiert die Wirkstoffe von Radix Rhei et Rhizome. Rot repräsentiert die Wirkstoffe von Cicadae Periostracum. Lila repräsentiert die Wirkstoffe von Epimrdii Herba. Gelb steht für die Wirkstoffe des Smilacis Glabrae Rhixoma. Himmelblau repräsentiert die Wirkstoffe von Curcumaelongae Rhizoma. (C) PPI-Netzwerk von JWSJS- und DN-Schnittpunktzielen. (D) Die 10 signifikantesten Gene, die durch Ontologieanalyse von Therapiezielgenen identifiziert wurden, die an der JWSJS-Behandlung von DN beteiligt sind. (E) Die 30 signifikantesten Gene, die durch die Signalweganalyse von Therapiezielgenen identifiziert wurden, die an der JWSJS-Behandlung von DN beteiligt sind. (F) Das Beziehungsnetzwerk des KEGG-Signalwegs bei der Behandlung von DN durch JWSJS. Gelbe Symbole stellen Signalwege dar. Blaue Symbole stellen Aktionsziele dar. Ein größerer Graph impliziert, dass mehr Pfade damit verbunden sind. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/66179fig01large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66179/66179fig02.jpg"> Abbildung 2: Visualisierung von molekularen Docking- und Molekulardynamik-Trajektorien von JWSJS bei der Behandlung der diabetischen Nephropathie. (A) Die Konformationen des Liganden in der ursprünglichen Kristallstruktur der drei Zielproteinkomplexe 7JXQ (a), 4QTA (b) und 4QTB (c) werden mit den Konformationen des Liganden nach dem Andocken verglichen. Grün, Orange und Pink sind EGFR-, MAPK1- bzw. MAPK3-Zielproteine. Gold ist das ursprüngliche Ligandenmolekül und Blau ist das Ligandenmolekül nach dem Andocken. (B) 3D-Visualisierung des molekularen Andockens von JWSJS bei der Behandlung der diabetischen Nephropathie. Grün, Orange und Pink sind die Zielproteine 7JXQ, 4QTA bzw. 4QTB. 1a-3a stellt das Interaktionsdiagramm von 7JXQ, 4QTA und 4QTB mit dem ursprünglichen Inhibitor dar (blau). 1b-3b stellt das Interaktionsdiagramm von 7JXQ, 4QTA, 4QTB und Luteolin (gelb) dar. 1c-3c stellt das Interaktionsdiagramm von 7JXQ, 4QTA, 4QTB und Palmitoleinsäure (Fuchsia) dar. 1d-3d stellt das Interaktionsdiagramm von 7JXQ, 4QTA, 4QTB und Quercetin (violett) dar. (C) 2D-Visualisierung des molekularen Dockings von JWSJS bei der Behandlung der diabetischen Nephropathie. 1a-3a stellt das Interaktionsdiagramm von 7JXQ, 4QTA und 4QTB mit dem ursprünglichen Inhibitor dar. 1b-3b stellt das Wechselwirkungsdiagramm von 7JXQ, 4QTA, 4QTB und Luteolin dar. 1c-3c stellt das Interaktionsdiagramm von 7JXQ, 4QTA, 4QTB und Palmitoleinsäure dar. 1d-3d stellt das Interaktionsdiagramm von 7JXQ, 4QTA, 4QTB und Quercetin dar. (D) RMSD- und RMSF-Analyse der molekulardynamischen Trajektorien von (a) Luteolin und Zielprotein 7JXQ, (b) Luteolin und Zielprotein 4QTA und (c) Quercetin und Zielprotein 4QTB-Komplexen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/66179fig02large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66179/66179fig03.jpg"> Abbildung 3: JWSJS lindert die Nierenschädigung und unterdrückt die Aktivierung des EGFR/MAPK3/1-Signalwegs in vivo-Experimenten . (A) HE-Färbung und (B) periodische Säure-Schiff (PAS)-Färbung von Nierengewebe von Ratten in verschiedenen Gruppen (Vergrößerung, 200x; n = 10). (C) Transmissionselektronenmikroskopie von Nierengewebe bei verschiedenen Gruppen von Ratten (Vergrößerung, 5000x; n = 3). (D) EGFR, p-EGFR, MAPK3/1, p-MAPK3/1, BAX und BCL-2 im Nierengewebe von Ratten von Diabetikern durch Western Blot (n = 3). (E) Statistische Analyse der Expression von p-EGFR, p-MAPK3/1, BAX und BCL-2. (F) Immunhistochemische Analyse der p-EGFR- UND p-MAPK3/1-Expression in den sechs Gruppen (n = 6). (G) Statistische Analyse der Expression von p-EGFR UND p-MAPK3/1. (H) qPCR-Analyse der MAPK3-, MAPK1- und EGFR-mRNA-Expression in sechs Gruppen. *P &lt; 0,05 vs. Kontrolle. **P &lt; 0,01 vs. Kontrolle. ▲P &lt; 0,05 vs. DN. ▲▲P &lt; 0,01 vs. DN. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/66179fig03large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
Tabelle 1: Informationen über einige Wirkstoffe von JWSJS. Es enthält Details zu jeder Komponente und ihren Eigenschaften oder Eigenschaften. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/Table%201.zip" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um diese Tabelle herunterzuladen.</a>
Tabelle 2: Tabelle der Andockergebnisse der Kernziele und Hauptwirkstoffe von JWSJS. Die Tabelle zeigt die Ergebnisse von Docking-Studien von Kernzielen und Hauptwirkstoffen von JWSJS. Diese Tabelle zeigt, wie diese Bestandteile mit ihren jeweiligen Zielen interagieren, was einen Einblick in den Wirkmechanismus von JWSJS geben kann. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/Table%202.zip" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um diese Tabelle herunterzuladen.</a>
Tabelle 3: Einfluss von JWSJS auf das Körpergewicht und die biochemischen Indizes bei Ratten mit diabetischer Nephropathie (ausgedrückt als Mittelwert ± Standardabweichung, n = 10). Im Vergleich zur Normalgruppe: * P &lt; 0,05. Verglichen mit der Modellgruppe: # P &lt; 0,05. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66179/Table%203.zip" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um diese Tabelle herunterzuladen.</a>

Antagonistische Wirkung von Jiawei Shengjiang San auf ein Rattenmodell der diabetischen Nephropathie: Verwandt mit dem EGFR/MAPK3/1-Signalweg

We aimed to delve into the mechanisms underpinning Jiawei Shengjiang San's (JWSJS) action in treating diabetic nephropathy and deploying network ...

antagonistic-effect-jiawei-shengjiang-san-on-rat-model-diabetic

Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Das vorliegende Protokoll beschreibt die Etablierung eines Tiermodells für membranöse Nephropathie (MN) und wie die Hemmung von Kemeng Fang die Apoptose von MN-Ratten durch Aktivierung des PI3K/AKT-Signalwegs reduziert.

Mechanismus der Hemmung der Podozyten-Apoptose durch Kemeng Fang bei Ratten mit membranöser Nephropathie über den PI3K/AKT-Signalweg

Blut-Hirn-Schranke Störungen hilft die Lieferung von bestimmten Medikamenten an das Gehirn. Mannitol geliefert intraarteriell schrumpft umgebenden Zellen die Blutgefäße, um physisch stören die Barriere.

Rat Modell der Blut-Hirn-Schranke Störung zu Neurovascular Therapeutics Gezielte zulassen

Osteoarthritis (OA) oder degenerative Gelenkerkrankung, ist eine schwächende Krankheit mit Schmerzen verbunden, die durch den verfügbaren Analgetika nur teilweise kontrolliert bleibt. Tiermodelle entwickelt werden, unser Verständnis von OA im Zusammenhang mit Schmerzmechanismen zu verbessern. Hier beschreiben wir die Methodik für die monoiodoacetate Modell von OA Schmerzen in der Maus.

Das Monoiodoacetate Modell von Osteoarthritis Schmerzen in der Maus

Das unten beschriebene Modell der Karotisballonverletzung bei Ratten ermöglicht es Forschern, Medikamente oder Therapeutika zu bewerten, die die verletzungsinduzierte arterielle Hyperplasie negieren. Es werden detaillierte präoperative Vorbereitungen, chirurgische Eingriffe und postoperative Behandlungen des Tieres beschrieben.

Eine Ratte Karotis-Ballon-Verletzung Modell Anti-vaskuläre Remodeling Therapeutics zu Test

Fettgewebe Stammzellen (ASC) leicht zu isolieren und aus dem Fett von normalen Ratten geerntet. ASC Blätter können mit Handy-Blatt Engineering erstellt werden und können in Zucker Diabetiker fetthaltige Ratten ausstellenden voll-dicke Haut Mängel mit freiliegenden Knochen und dann bedeckt mit einem Bilayer künstlicher Haut transplantiert werden.

Schaffung und Transplantation von einem Fettgewebe-derived Stem Cell (ASC) Blatt in einem diabetischen Wundheilung Modell

Hier beschreiben wir eine optimierte, Langendorff-basierte Verfahren zur Isolierung von einzelligen Vorhofflimmern Herzzellen aus einem Rattenmodell der metabolischen Syndrom im Zusammenhang mit Herzinsuffizienz mit erhaltener Auswurffraktion. Eine manuelle Regelung der Intraluminal Druck von kardialen Hohlräumen wird implementiert, um funktionell intakt Myozyten geeignet für Erregung-Kontraktion-Kupplung Studien ergeben.

Isolierung von Vorhofflimmern Herzzellen aus einem Rattenmodell der metabolischen Syndrom im Zusammenhang mit Herzinsuffizienz mit erhaltener Auswurffraktion

Myograph Leitertechnik dient zur vaskulären glatten Muskelzellen Funktionen und Bildschirm neue Drogen zu untersuchen. Wir berichten über ein detailliertes Protokoll zur Messung der isometrischen Kontraktilität der Maus mesenterialen Arterie und für das screening von neuen Muskelrelaxantien von vaskulären glatten Muskelzellen.

Messung der isometrischen Kontraktilität der Maus mesenterialen Arterie mit Draht Myographie

Wir beschreiben ein chirurgisches Verfahren, das zur indufären Ischämie bei Kaninchen mit Hyperlipidämie und Diabetes eingesetzt wird. Diese Operation dient als präklinisches Modell für Erkrankungen der peripheren Arterienerkrankung bei Patienten. Die Angiographie wird auch als Mittel zur Messung des Ausmaßes der eingeführten Ischämie und der Wiederherstellung der Perfusion beschrieben.

Präklinische Modell von Hind Limb Ischemia in diabetischen Kaninchen

Ziel dieses Protokolls ist es zu bewerten, ob verschiedene künstliche Tränenformulierungen menschliche Hornhautepithelzellen mit einem In-vitro-Modell vor der Austrocknung schützen können. Nach der Exposition gegenüber künstlichen Tränenformulierungen und Dericcation werden menschliche Hornhautepithelzellen auf metabolische Aktivität untersucht.

Wirkung künstlicher Tränenformulierungen auf die Metabolische Aktivität menschlicher Hornhautepithelzellen nach Exposition gegenüber Dericcation

Ziel dieses Protokolls ist es, ein Modellsystem für die Wirkung von Hyperoxie auf mikrobielle Gemeinschaften der Mukoviszidose der Atemwege zu entwickeln.  Künstliches Sputummedium emuliert die Zusammensetzung von Sputum, und hyperoxische Kulturbedingungen modellieren die Auswirkungen von zusätzlichem Sauerstoff auf mikrobielle Lungengemeinschaften.

Design und Entwicklung eines Modells zur Untersuchung der Wirkung von zusätzlichem Sauerstoff auf das Mukoviszidose-Atemwegsmikrobiom

Erfahren Sie, wie Netzwerkpharmakologie und Moleküldocking die Wirkweise von Jiawei Shengjiang San bei diabetischer Nephropathie aufklären. Diese Methode identifiziert aktive Komponenten und konstruiert Zielnetzwerke für die traditionelle chinesische Medizin.

Antagonistische Wirkung von Jiawei Shengjiang San auf ein Rattenmodell der diabetischen Nephropathie: Verwandt mit dem EGFR/MAPK3/1-Signalweg (Video) | JoVE Journal

Antagonistische Wirkung von Jiawei Shengjiang San auf ein Rattenmodell der diabetischen Nephropathie: Verwandt mit dem EGFR/MAPK3/1-Signalweg

Weitere Videos entdecken