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Immunology and Infection
Experimentelles Modell der Ligatur-induzierten Periimplantitis bei Mäusen
Experimentelles Modell der Ligatur-induzierten Periimplantitis bei Mäusen
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JoVE Journal Immunology and Infection
Experimental Model of Ligature-Induced Peri-Implantitis in Mice

Experimentelles Modell der Ligatur-induzierten Periimplantitis bei Mäusen

Full Text
3,245 Views
05:37 min
May 17, 2024

DOI: 10.3791/66316-v

Davi Neto de Araújo Silva1, Maísa Casarin2, Sepehr Monajemzadeh1, Taciane Menezes da Silveira2, Jacob Lubben1, Beatriz Bezerra1, Flavia Q. Pirih1

1School of Dentistry, Section of Periodontics,University of California, 2School of Dentistry, Department of Periodontology,Federal University of Pelotas

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Dies ist ein Bericht über ein experimentelles Modell der Ligatur-induzierten Periimplantitis bei Mäusen. Wir beschreiben alle chirurgischen Schritte, von der prä- und postoperativen Behandlung der Tiere, Extraktionen, Implantatinsertion und ligaturinduzierter Periimplantitis.

Das übergeordnete Ziel dieses Artikels ist es, über das Protokoll zu berichten, das zur Induktion von Periimplantitis bei Mäusen durch Ligatur angewendet wird, und seine Wirksamkeit durch Gewebebewertung und Knochenverlust um die Implantate herum zu beobachten. Die folgenden Eingriffe wurden in einem Operationssaal durchgeführt, der alle Biosicherheits- und Schutzstandards erfüllte. Alle Verfahren wurden unter 10-facher mikroskopischer Vergrößerung durchgeführt und von geschulten und kalibrierten Bedienern durchgeführt.

Alle Operationen wurden unter Inhalationsnarkose mit Isofluran und Sauerstoff durchgeführt. Ein Hilfsbediener wurde benötigt, um das Tier zu stabilisieren und die Maulöffnung aufrechtzuerhalten. Um Augenreizungen zu vermeiden, wurde vor Beginn der Extraktion Augengleitmittel verwendet.

Für diese Methode wurden 18 drei Wochen alte männliche Mäuse des Typs C57BL/6J verwendet und zahnärztlichen Extraktionen, Implantatinsertion und Periimplantitis-Induktion unterzogen. Zahnextraktion. Für zahnärztliche Extraktionen wurde ein 5-Zahn-Explorer zwischen dem ersten und zweiten Molaren eingeführt, um die Elevation und Luxation zu starten.

Als nächstes wurde der Zahnforscher in die mesiale Stelle des ersten Backenzahns eingeführt. Nach der Hochlagerung wurden die Spitzenzange und die Nahtbindezange verwendet, um den ersten Backenzahn zu entfernen. Als nächstes wurde der Zahnforscher zwischen dem zweiten und dritten Backenzahn eingeführt, um den zweiten Backenzahn zu erhöhen und zu luxieren.

Nach dentalen Extraktionen wurde eine vollständige Blutstillung erreicht, indem ein steriler Applikator mit Wattespitze für eine Minute verwendet wurde. Unmittelbar nach der Extraktion erhielten alle Tiere Schmerzmittel, die durch subkutane Injektion verabreicht wurden. Darüber hinaus wurde vier Wochen lang nach der Extraktion die normale Nahrung durch eine weiche Diät ersetzt und das Antibiotikum oral verabreicht, wobei das Medikament in das Trinkwasser eingearbeitet wurde.

Einsetzen von Implantaten. Mit einer 15c-Klinge wurde ein mesiodistaler Schnitt durch das keratinisierte Gewebe in dem Bereich gemacht, der den zuvor vorhandenen Zähnen entspricht. Die rechten Oberkiefermolaren waren der Raumbezug.

Die bukkalen und palatinalen Lappen in voller Dicke wurden mit einem 5-Zahn-Explorer angehoben, um eine vollständige Lappenerhöhung zu gewährleisten. Die Osteotomie wurde mit einem Hartmetall-Mikrohandbohrer mit einem Durchmesser von 0,3 Millimetern durchgeführt, der an einem Stiftschraubstock befestigt und durch Drehung im Uhrzeigersinn aktiviert wurde. Die Osteotomiestellen befanden sich etwa einen Millimeter tief in den verheilten Extraktionsalveolen.

Danach wurden Titanimplantate, eines pro Tier, im Bereich des ersten und zweiten linken Backenzahns im Oberkiefer mit einer Verschraubungsbewegung im Uhrzeigersinn selbst gezapft. Die Implantate hatten eine vierwöchige Heilungsphase, in der die Mäuse Antibiotika erhielten und wie zuvor beschrieben gefüttert wurden. Periimplantitis-Induktion.

Die Periimplantitis wurde induziert, indem eine Seidenligatur 6-0 um jede Befestigung unmittelbar apikal des Implantatkopfes platziert wurde. Die Ligaturen wurden zwei Wochen lang gehalten, um eine Periimplantitis zu entwickeln. Die Ligaturen wurden alle zwei Tage überprüft, um sicherzustellen, dass sie noch vorhanden waren.

Wenn sie fehlte, wurde eine neue Ligatur eingesetzt. Nach dieser Zeit wurden alle Tiere geopfert. Die Oberkiefer wurden geerntet, mit einem Lichtmikroskop fotografiert, 24 Stunden lang in 10 % Formalin fixiert und dann in 70 % Ethanol gelagert.

Die klinische Bewertung wurde durchgeführt, indem unmittelbar nach den Opfern mit optischer Mikroskopie Bilder aufgenommen wurden. Im Vergleich zur Kontrollgruppe wurden in der Periimplantitis-Gruppe Entzündungen, Taschenbildung und erhöhte Weichteilödeme um das Implantat herum beobachtet. Es wurden keine Hinweise auf schwere klinische Phänotypkomplikationen beobachtet.

Zwei Wochen nach der Ligaturplatzierung gab es beim Vergleich von Nicht-Ligatur- und Ligaturgruppen signifikante Unterschiede in der Knochenhöhe, die durch lineare Analyse beobachtet wurde, und dem Knochenverlustvolumen, das durch volumetrische Analyse beobachtet wurde. Um zelluläre Veränderungen zu bestimmen, wurden entkalkte Proben geschnitten und mit Hämatoxylin und Eosin gefärbt. Infolgedessen wurde in Periimplantitis-Proben im Vergleich zur Kontrollgruppe mehr apikale Epithelmigration und Knochenverlust beobachtet.

Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie man eine Periimplantitis in einem Mausmodell induziert, und die gefundenen klinischen, mikrotomographischen und histologischen Unterschiede identifizieren. Obwohl diese Methode nicht alle Aspekte der Periimplantitis abbildet, ist sie für die Herstellung eines Ursache-Wirkungs-Zusammenhangs unerlässlich, da sie Informationen zur Gewebeheilung liefert und Studien zu Knochenschwund und periimplantären Erkrankungen unterstützt.

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