Name: Schnelle Isolierung von Eizellen im Stadium I bei Zebrafischen ohne Granulosazellen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-07-26T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 12 s
Description: Lernen Sie eine modifizierte Methode zur schnellen Isolierung reiner Eizellen im Stadium I bei Danio rerio ohne Granulosazellen. Dieses Protokoll ermöglicht präzisere Analysen in der Genom- und Epigenetikforschung.

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<meta charset="utf8"></head><body>Verbessertes Verfahren zur Gewinnung von Granulosa-zellfreien Zebrafisch-Eizellen im Stadium I

<ol><li>Qin, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unraveling+the+mechanism+of+long-term+bisphenol+S+exposure+disrupted+ovarian+lipids+metabolism%2C+oocytes+maturation%2C+and+offspring+development+of+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosphere%22%5BJournal%5D)">Unraveling the mechanism of long-term bisphenol S exposure disrupted ovarian lipids metabolism, oocytes maturation, and offspring development of zebrafish.</a> Chemosphere. 277, 130304(2021).</li>
<li>Hau, H. T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maternal+Larp6+controls+oocyte+development%2C+chorion+formation+and+elevation%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Maternal Larp6 controls oocyte development, chorion formation and elevation.</a> Development. 147 (4), 187385(2020).</li>
<li>Cabrera-Quio, L. E., Schleiffer, A., Mechtler, K., Pauli, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+ski7+tunes+RNA+levels+during+the+oocyte-to-embryo+transition%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">Zebrafish ski7 tunes RNA levels during the oocyte-to-embryo transition.</a> PLoS Genet. 17 (2), e1009390(2021).</li>
<li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+transcriptome+reveals+insights+into+the+development+and+function+of+the+zebrafish+ovary%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Single-cell transcriptome reveals insights into the development and function of the zebrafish ovary.</a> Elife. 11, 76014(2022).</li>
<li>Li, C. W., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+expression+of+bone+morphogenetic+protein+family+ligands+and+receptors+in+the+zebrafish+ovary%3A+A+potential+paracrine-signaling+mechanism+for+oocyte-follicle+cell+communication%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal expression of bone morphogenetic protein family ligands and receptors in the zebrafish ovary: A potential paracrine-signaling mechanism for oocyte-follicle cell communication.</a> Biol Reprod. 85 (5), 977-986 (2011).</li>
<li>Zampolla, T., Spikings, E., Rawson, D., Zhang, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytoskeleton+proteins+F-actin+and+tubulin+distribution+and+interaction+with+mitochondria+in+the+granulosa+cells+surrounding+stage+III+zebrafish+%28Danio+rerio%29+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Cytoskeleton proteins F-actin and tubulin distribution and interaction with mitochondria in the granulosa cells surrounding stage III zebrafish (Danio rerio) oocytes.</a> Theriogenology. 76 (6), 1110-1119 (2011).</li>
<li>Lubzens, E., Young, G., Bobe, J., Cerda, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oogenesis+in+teleosts%3A+How+eggs+are+formed%5BTitle%5D)+AND+%22Gen+Comp+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Oogenesis in teleosts: How eggs are formed.</a> Gen Comp Endocrinol. 165 (3), 367-389 (2010).</li>
<li>Song, Y., Hu, W., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+transgenic+zebrafish+%28Danio+rerio%29+models+expressing+fluorescence+proteins+in+the+oocytes+and+somatic+supporting+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Gen+Comp+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Establishment of transgenic zebrafish (Danio rerio) models expressing fluorescence proteins in the oocytes and somatic supporting cells.</a> Gen Comp Endocrinol. 314, 113907(2021).</li>
<li>Sousa, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproductive+hormones+affect+follicular+cells+and+ooplasm+of+stage+I+and+II+oocytes+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Reproductive hormones affect follicular cells and ooplasm of stage I and II oocytes in zebrafish.</a> Reprod Fertil Dev. 28 (12), 1945-1952 (2016).</li>
<li>Yan, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gonadal+soma+controls+ovarian+follicle+proliferation+through+Gsdf+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Gonadal soma controls ovarian follicle proliferation through Gsdf in zebrafish.</a> Dev Dyn. 246 (11), 925-945 (2017).</li>
<li>Selman, K., Wallace, R. A., Sarka, A., Qi, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stages+of+oocyte+development+in+the+zebrafish%2C+Brachydanio+rerio%5BTitle%5D)+AND+%22J+Morphol%22%5BJournal%5D)">Stages of oocyte development in the zebrafish, Brachydanio rerio.</a> J Morphol. 218 (2), 203-224 (1993).</li>
<li>Wallace, R. A., Selman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructural+aspects+of+oogenesis+and+oocyte+growth+in+fish+and+amphibians%5BTitle%5D)+AND+%22J+Electron+Microsc+Tech%22%5BJournal%5D)">Ultrastructural aspects of oogenesis and oocyte growth in fish and amphibians.</a> J Electron Microsc Tech. 16 (3), 175-201 (1990).</li>
<li>Elkouby, Y. M., Mullins, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+the+analysis+of+early+oogenesis+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Methods for the analysis of early oogenesis in zebrafish.</a> Dev Biol. 430 (2), 310-324 (2017).</li>
<li>Ai, N., Liu, L., Lau, E. S., Tse, A. C., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separation+of+oocyte+and+follicle+layer+for+gene+expression+analysis+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Separation of oocyte and follicle layer for gene expression analysis in zebrafish.</a> Methods Mol Biol. 2218, 1-9 (2021).</li>
<li>Zhan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Explorations+of+the+optimal+method+for+isolating+oocytes+from+zebrafish+%28Danio+rerio%29+ovary%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Zool+B+Mol+Dev+Evol%22%5BJournal%5D)">Explorations of the optimal method for isolating oocytes from zebrafish (Danio rerio) ovary.</a> J Exp Zool B Mol Dev Evol. 330 (8), 417-426 (2018).</li>
<li>Avma guidelines for the euthanasia of animals: 2020 edition. Avma. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.avma.org/resources-tools/avma-policies/avma-guidelines-euthanasia-animals">https://www.avma.org/resources-tools/avma-policies/avma-guidelines-euthanasia-animals</a> (2020).</li>
<li>Phs policy on humane care and use of laboratory animals. Olaw. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://olaw.nih.gov/policies-laws/phs-policy.htm#Introduction">https://olaw.nih.gov/policies-laws/phs-policy.htm#Introduction</a> (2015).</li>
<li>Matthews, M., Varga, Z. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthesia+and+euthanasia+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Anesthesia and euthanasia in zebrafish.</a> ILAR J. 53 (2), 192-204 (2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Kinger's Zelldissoziationslösung</td><td>PlantChemMed</td><td>PC-33689</td><td>Kinger's Zelldissoziationslösung kann stabil bei -20 &de; C nach dem Verpacken und kann nach dem Auftauen bei niedriger Temperatur (4 & Grad; C). Es kann direkt zur Dissoziation der Eierstöcke von Zebrafischen verwendet werden. Die optimale Temperatur beträgt 28,5 & Grad; C, für ca. 2-3 Stunden. Die Dauer kann je nach den spezifischen Dissoziationsbedingungen entweder verkürzt oder verlängert (https://www.plantchemmed.com/chanpin?productNo=PC-33689) angepasst werden.</td></tr><tr><td>Zellsiebe (100 &mu; m )</td><td>Falcon</td><td>352360</td><td></td></tr><tr><td>Fluoreszenzmikroskop</td><td>Zeiss</td><td>Axio Zoom.V16</td><td></td></tr><tr><td>Pinzette</td><td>Dumont</td><td>#5</td><td></td></tr><tr><td>Glaskapillarnadel</td><td></td>/<td>/</td><td>Durch Brennen mit Feuerzeug abgestumpft</td></tr><tr><td>Hoechst</td><td>Yesen</td><td>40732ES03</td><td></td></tr><tr><td>Pipettenspitzen mit geringer Adsorption (10 &mu; l )</td><td>Labsellect</td><td>T-0010-LR-R-S</td><td></td></tr><tr><td>Leibovitz' s L-15 medium medium (mit L-Glutamin)</td><td>Hyclone</td><td>SH30525.01</td><td></td></tr><tr><td>Eiskübel</td><td>/</td><td>/</td><td>Eiskaltes Wasser wird zur Einschläferung von Zebrafischen verwendet</td></tr><tr><td>Inkubator</td><td>WIGGENS</td><td>WH-01</td><td></td></tr><tr><td>Jungfische</td><td>/</td><td>/</td><td>5&ndash; 6 Wochen nach der Befruchtung, Standardlänge [SL] von 10&ndash; 15 mm</td></tr><tr><td>Kunststoffschale (35 mm)</td><td>SORFA</td><td>230101</td><td></td></tr><tr><td>Stereomikroskop</td><td>Motic</td><td>SMZ-161</td><td></td></tr><tr><td>Gewebekulturplatte (6 Vertiefungen)</td><td>SORFA</td><td>0110006</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Federschere</td><td>Fine Science Toosl</td><td>#15000-00</td><td></td></tr></tbody></table>

schnelle isolierung von eizellen im stadium i bei zebrafischen ohne granulosazellen

Rapid Isolation of Stage I Oocytes in Zebrafish Devoid of Granulosa Cells

Abbildung 1 zeigt die Morphologie der Eierstöcke, die sowohl bei adulten als auch bei juvenilen Zebrafischen beobachtet wurde, und zeigt Eizellen in verschiedenen Entwicklungsstadien, die als Referenz dienen. Abbildung 1A zeigt eine grafische Darstellung der Morphologie und Größe der Eizelle in jedem Entwicklungsstadium, beginnend mit dem primären Wachstumsstadium (Stadium I) und endend mit der ovulierten Eizelle (Stadium V). Die Abbildungen 1Ai-v zeigen die Durchmesser, die den Stadien I bis V der Eizellen entsprechen. Abbildung 1B (linkes Bild) zeigt Eierstockbilder von Jungfischen (6 wpf mit SL = 1,5 cm). Bemerkenswert ist, dass der juvenile Eierstock ein ausgeprägtes lobuläres Erscheinungsbild aufweist, das hauptsächlich durch eine Fülle von transparenten Eizellen im Stadium I gekennzeichnet ist, begleitet von einer kleineren Population von Eizellen im Stadium II. Diese Prävalenz von Eizellen im Stadium I erleichtert ihre Beobachtung und Entnahme erheblich. Das rechte Bild zeigt die Morphologie des Eierstocks der adulten Fische (6 Monate), wobei Eizellen in verschiedenen Entwicklungsstadien beobachtet werden können. Im Eierstock überwiegen jedoch undurchsichtige Eizellen im Spätstadium (Stadium II-III).
Abbildung 2 veranschaulicht die repräsentativen Prozesse von der Dissektion bis zur Gewinnung sauberer Eizellen im Stadium I. Abbildung 3 zeigt Eizellen im Stadium I, die sowohl mit der Referenzmethode als auch mit der modifizierten Methode gewonnen wurden. Nach der Hoechst-Färbung zeigten die Zellkerne der Eizelle und der Granulosazelle unter UV-Licht eine blaue Fluoreszenz. In den Bildern, die mit der Referenzmethode (Abbildung 3A) aufgenommen wurden, war die Oberfläche der Eizellen dicht von zahlreichen gefärbten Granulosazellkernen umgeben. Im Gegensatz dazu weisen Oozyten im Stadium I, die mit der modifizierten Methode (Abbildung 3B) getrennt wurden, eine vollständige Exposition und Sauberkeit auf, wobei keine Granulosazellkernfärbung vorhanden ist.
Unsere Ergebnisse zeigten die Wirksamkeit der vorgeschlagenen Methode zur Isolierung von Eizellen im Stadium I. Der Entwicklungsprozess von Eizellen bei Teleostfischen weist mehrere gemeinsame Merkmaleauf 7. Um die artübergreifende Anwendbarkeit zu bewerten, wurden weitere Analysen an anderen Fischarten durchgeführt. Weibliche Teichschmerlen wurden von einem lokalen Markt erworben, und Eizellen im Frühstadium (Durchmesser &lt;100 μm) wurden nach dem gleichen Verfahren isoliert. Die ovarielle Zusammensetzung der Teichschmerle zeigte ebenfalls eine Mischung von Eizellen in mehreren Entwicklungsstadien, die durch eine auffällige Ähnlichkeit in der Eizellmorphologie und -größe mit der des Zebrafisches im selben Stadium gekennzeichnet war. Wie in Abbildung 4A dargestellt, waren die Eierstöcke der adulten weiblichen Teichschmerle von undurchsichtigen späten Eizellen dominiert, die mit transparenten frühen Eizellen durchsetzt waren. Auf der Oberfläche von Eizellen wurde eine deutliche Monoschicht aus Granulosazellen beobachtet. In Übereinstimmung mit unseren Beobachtungen im Zebrafisch entsprachen die Schmerlen-Eizellen mit einem Durchmesser von weniger als 100 μm dem Stadium vor dem Diploten-Stadium. Abbildung 4B zeigt die Eizellen der reinen Teichschmerle (Misgurnus anguillicaudatus), die mit der modifizierten Methode gewonnen wurden. Im Vergleich zu den Eierstöcken von Zebrafischen sind die Eierstöcke der Teichschmerle schwieriger zu trennen. Nach 6-7 h Verdauung dissoziieren mehr Eizellen im Frühstadium. Nichtsdestotrotz führte dieser angepasste Ansatz zu den gewünschten sauberen und nackten Eizellen. Der Zebrafisch gehört zur Familie der Cyprinidae, während die Teichschmerlen zur Familie der Cobitidae gehören. Diese beiden Familien weisen eine entfernte taxonomische Verwandtschaft auf, aber ihr Entwicklungsstadium und ihre Morphologie sind bemerkenswert ähnlich, was darauf hindeutet, dass diese Methode im Allgemeinen für die Analyse von Eizellen verschiedener Fischarten verwendet werden kann.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66458/66458fig01v2.jpg"> Abbildung 1: Repräsentative Bilder von Zebrafisch-Eierstöcken und -Eizellen in verschiedenen Stadien. (A) Morphologie und Größe der Eizellen in jedem Entwicklungsstadium (St). i-v stellt die Bilder und den Durchmesser der Eizellen von Stadium I bis V dar. Maßstabsbalken = 200 μm. (B) Ovarialmorphologie von adulten und juvenilen Zebrafischen. Maßstabsbalken = 500 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66458/66458fig01largev2.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66458/66458fig02v2.jpg"> Abbildung 2: Repräsentative Bilder des Isolierungsverfahrens, von der Dissektion bis zur Entnahme sauberer Eizellen im Stadium I. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66458/66458fig02largev2.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung zu sehen.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66458/66458fig03.jpg"> Abbildung 3: Eizellen im Stadium I, die mit den beiden Methoden gewonnen wurden. (A) Eizellen im Stadium (St) I, isoliert mit der genannten Methode. (B) Eizellen im Stadium I, die mit der modifizierten Methode isoliert wurden. Die Eizell- und Granulosazellkerne wurden mit Hoechst gefärbt und mit UV-Licht angeregt. Maßstabsbalken = 100 μm. BF = Hellfeld. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66458/66458fig03large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66458/66458fig04.jpg"> Abbildung 4: Eizellen aus Teichschmerle, die mit der modifizierten Methode im Frühstadium gewonnen wurden. (A) Repräsentative Bilder von Eierstöcken und Eizellen von Teichschmerle. I, II stellen die Eierstöcke von Teichschmerlen unter verschiedenen Vergrößerungen dar, und III-IV stellt die Eizellen von Teichschmerlen im Frühstadium dar. Maßstabsleisten: i (500 μm); II (200 μm); III, IV (100 μm). (B) Eizellen im Frühstadium, die aus Teichschmerlen isoliert wurden. Die Eizellen und Granulosazellkerne wurden mit Hoechst angefärbt und mit UV-Licht angeregt. Maßstabsbalken = 100 μm. BF = Hellfeld. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66458/66458fig04large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>

Schnelle Isolierung von Eizellen im Stadium I bei Zebrafischen ohne Granulosazellen

The study of oocyte development holds significant implications in developmental biology. The zebrafish (Danio rerio) has been extensively used as a model ...

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Research

Forschung

JoVE Journal

Developmental Biology

Entwicklungsbiologie

Stufe spezifischen Isolierung von mittleren bis späten Drosophila Follikel ist nützlich für eine Vielzahl von Zwecken. Wie Follikel in Kultur, die für die genetische und / oder pharmakologischen Manipulationen in vitro-Assays und Entwicklung die Bildgebung gekoppelt werden können. Zusätzlich kann Follikel für molekularbiologische Untersuchungen, wie Isolierung von mRNA und Protein verwendet werden.

Das Utility von Stage-spezifischen Mid-zu-spät<em&gt; Drosophila</em&gt; Follikel Isolation

Hier präsentieren wir ein Protokoll für die Charakterisierung von Maus antralen Oozyten basierend auf nucleolar Organisation.

Isolierung und Charakterisierung von Maus Antral Oozyten Basierend auf Nucleolar Chromatinorganisation

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode zur Isolierung einzelner Zellen aus Zebrafischembryonen, zur Anreicherung von Zellen von Interesse, zum Einfangen von Zebrafischzellen in mikrofluidisch basierten Einzelzell-Multiplexsystemen und zur Bewertung der Genexpression von einzelnen Zellen.

Isolierung und Charakterisierung von Einzelzellen aus Zebrafischembryonen

Ein optimiertes Protokoll für die in - vitro - Reifung von Zebrabärbling Eizellen für die Manipulation der mütterlichen Genprodukten verwendet wird hier vorgestellt.

Funktionelle Manipulation der mütterlichen Gene Produkte verwenden<em&gt; In Vitro</em&gt; Oozytenreifung in Zebrabärbling

Das Hauptziel dieser Studie war die Nadel anpassen Verglasung (NIV) Verfahren um ganze Zebrafisch Hoden Ovarialgewebe eingetaucht. Darüber hinaus wurde die Reproduzierbarkeit der Methode in fünf verschiedenen Zebrafisch-Sorten getestet.

Kryokonservierung von Zebrafisch-Spermatogonien durch ganze Hoden Nadel eingetaucht, ultra-schnelle Abkühlung

Hier stellen wir eine einfache Methode zur Trennung von Follikelzellen und Eizellen in Zebrafisch-Ovarialfollikel vor, die Untersuchungen der Eierstockentwicklung bei Zebrafischen erleichtern.

Trennung von Follikulärzellen und Oozyten in Denrogarischen Follikel von Zebrafischen

Um die Untersuchung der präantralen Follikulogenese voranzutreiben, sind effiziente Methoden der Follikelisolierung aus einzelnen Eierstöcken erforderlich. Hier wird ein optimiertes, mechanisches Protokoll zur Follikelisolierung aus Rinderovarien mit einem Gewebezerkleinerer und Homogenisator vorgestellt. Diese Methode ermöglicht die Entnahme einer großen Anzahl lebensfähiger präantraler Follikel aus einem einzigen Eierstock.

Isolierung kleiner präantraler Follikel aus dem Rindereierstock durch eine Kombination aus Fragmentierung, Homogenisierung und serieller Filtration

Hier stellen wir eine optimierte Methode zur sofortigen Entfernung eines Teils der Kumulus-Eizell-Komplexe nach der Eizellentnahme vor, um den IVF-Beobachtungsprozess zu beschleunigen, die für die Entnahme von Granulosazellen erforderliche Zeit zu reduzieren, die Exposition der Eizellen gegenüber externen Elementen zu minimieren und die Embryonenentwicklung nicht zu behindern, was letztendlich die Effizienz der IVF-Laborverfahren verbessert.

Die sofortige partielle Entfernung von Kumulus-Eizell-Komplexen: Ein verfeinerter Ansatz für die schnelle Beobachtung der In-vitro-Fertilisation

Hier beschreiben wir ein Protokoll zur Trennung von Dotter-, Granulosazellen und Thekazellen in präovulatorischen Follikeln von Vögeln. Diese präzise Handhabung ermöglicht kritische Untersuchungen der Rolle dieser Schichten für die Fortpflanzungsfunktion und hilft beim Verständnis der Follikelentwicklung, der Hormonregulation und der Krankheitsforschung, um den landwirtschaftlichen Ertrag zu steigern und biomedizinische Erkenntnisse zu gewinnen.

Trennung von präovulatorischen Follikel-, Granulosa- und Thekazellschichten von Vögeln für Downstream-Anwendungen

Hier stellen wir ein reproduzierbares Verfahren adulte Neurogenese zu untersuchen, aus dem gesamten Gehirn stamm eine Neurosphäre Assay verwendet oder von entweder dem telencephalic, tectal oder cerebellar Regionen des adulten Gehirns Zebrabärbling. Zusätzlich beschreiben wir das Verfahren der Genexpression in Zebrabärbling Neurosphären zu manipulieren.

Isolierung und Kultur von Adult Zebrafisch brain-derived Neurosphären

Lernen Sie eine modifizierte Methode zur schnellen Isolierung reiner Eizellen im Stadium I bei Danio rerio ohne Granulosazellen. Dieses Protokoll ermöglicht präzisere Analysen in der Genom- und Epigenetikforschung.

Schnelle Isolierung von Eizellen im Stadium I bei Zebrafischen ohne Granulosazellen

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