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JoVE Journal Biology
Dissection, Histological Processing, and Gene Expression Analysis of Murine Supraclavicular Brown Adipose Tissue

Dissektion, histologische Verarbeitung und Genexpressionsanalyse von murinem supraklavikulärem braunem Fettgewebe

Full Text
3,245 Views
06:50 min
March 29, 2024

DOI: 10.3791/66475-v

Mark G Waterstraat1,2, ZiYi Wang1, Mari Kogiso1, Rommel Caballero-Juarez1,2, Miao-Hsueh Chen1

1Children's Nutrition Research Center, Department of Pediatrics,Baylor College of Medicine, 2Department of BioSciences,Rice University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study provides a detailed protocol for the dissection of supraclavicular brown adipose tissue (scBAT) from mice, which is deemed a valuable model for analyzing brown fat due to its anatomical similarities to human brown adipose tissue. The focus is on improving accessibility to scBAT research through precise dissection and subsequent histological and gene expression analyses.

Key Study Components

Research Area

  • Supraclavicular brown adipose tissue (scBAT)
  • Gene expression analysis
  • Histological techniques

Background

  • scBAT is recognized for its potential importance in metabolic research.
  • The anatomical proximity to major veins poses challenges in dissection.
  • A need for accessible and accurate extraction methods has been identified.

Methods Used

  • Dissection using a microscope for precision.
  • Gene expression analysis following tissue homogenization.
  • Hematoxylin and eosin staining for histological assessment.

Main Results

  • The protocol described improves extraction efficiency and the quality of gene expression data.
  • scBAT displays characteristic tissue structures found in brown adipose tissue.
  • The study lays groundwork for understanding scBAT's genetic lineage and physiological roles.

Conclusions

  • This protocol enables more effective research into the roles of scBAT in metabolism.
  • The findings contribute to the broader field of adipose tissue biology.

Frequently Asked Questions

What is supraclavicular brown adipose tissue (scBAT)?
scBAT is a specific type of brown fat located near the clavicles, significant for its metabolic functions.
Why is scBAT important for research?
Due to its anatomical similarities to human brown adipose tissue, scBAT serves as an excellent model for studying metabolic processes.
What challenges exist when dissecting scBAT?
The small size and its location near major veins can complicate the dissection process.
How does the protocol increase extraction efficiency?
It employs a dissecting microscope for enhanced precision and utilizes tissue homogenization to improve RNA yield.
What are the key techniques used in the study?
The study uses dissection, histological staining, and gene expression analysis techniques.
What are the main findings regarding scBAT's cellular structure?
Hematoxylin and eosin staining confirmed the presence of typical brown adipose tissue characteristics in scBAT samples.
What future research directions does this study suggest?
The study suggests defining the genetic lineage and physiological functions of scBAT, as well as developing ex-vivo models for further research.

Hier bieten wir ein praktisches Verfahren zur Präparierung und Durchführung histologischer und Genexpressionsanalysen von murinem supraklavikulärem braunem Fettgewebe.

1 Unser Labor konzentriert sich auf die Etablierung von2 supraklavikulärem braunem Fettgewebe 3 oder SCBAT als wertvolles Depot 4 für die Analyse von braunem Fett aufgrund seiner anatomischen Ähnlichkeiten 5 mit menschlichem braunem Fettgewebe. 6 Dieses Protokoll zielt darauf ab, die Zugänglichkeit7 der SCBAT-Forschung zu verbessern. 8 Dieses Depot kann aufgrund seiner geringen Größe 9 und der Nähe zu großen Venen im Hals einschüchternd wirken. 10 Daher ist es zwingend erforderlich, 11 ein einfaches Verfahren zum Extrahieren und Verarbeiten von SCBAT bereitzustellen.

12 Unsere Methodik zeichnet sich13 erstens durch die Verwendung eines Präpariermikroskops 14 bei der Extraktion von SCBAT aus. 15 Dies erhöht die Präzision 16 und die Extraktionseffizienz 17, die beide entscheidend sind, wenn 18 mit einem so kleinen Gewebedepot gearbeitet wird. 19 Zweitens homogenisierten wir die gefrorenen SCBAT-Proben 20, bevor wir eine Genexpressionsanalyse 21 durchführten, um die RNA-Ausbeute zu erhöhen und 22 eine so geringe Menge an verfügbarem Gewebe zu kompensieren.

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