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Intravitale Zwei-Photonen-Mikroskopie der transplantierten Mauslunge
Intravitale Zwei-Photonen-Mikroskopie der transplantierten Mauslunge
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JoVE Journal Medicine
Intravital Two-Photon Microscopy of the Transplanted Mouse Lung

Intravitale Zwei-Photonen-Mikroskopie der transplantierten Mauslunge

Full Text
1,696 Views
04:16 min
April 19, 2024

DOI: 10.3791/66566-v

Yun Zhu Bai1, Yuriko Terada1, Katsutaka Mineura1, Yuhei Yokoyama1, Ruben G. Nava1, Alexander S. Krupnick2, Andrew E. Gelman1, Mark J. Miller3, Daniel Kreisel1, Wenjun Li1

1Division of Cardiothoracic Surgery,Washington University in St. Louis, 2Division of Thoracic Surgery,University of Maryland, 3Division of Infectious Diseases,Washington University in St. Louis

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Hier stellen wir ein Protokoll vor, mit dem die transplantierte linke Lunge der Maus mittels Zwei-Photonen-Mikroskopie intravital abgebildet werden kann. Dies stellt ein wertvolles Werkzeug dar, um die zelluläre Dynamik und Wechselwirkungen in Echtzeit nach einer Lungentransplantation von Mäusen zu untersuchen.

Das Ziel unserer Forschung ist es, die Immunmechanismen zu verstehen, die der Ischämie, der Reperfusionsschädigung und den entzündlichen und tolerogenen Reaktionen nach Lungentransplantation zugrunde liegen. Wir wollen die dynamischen Wechselwirkungen zwischen Spender- und Empfängerzellen untersuchen. Wir verwenden derzeit verschiedene chirurgische und bildgebende Verfahren zur Untersuchung der Immunologie von Lungentransplantaten bei der Maus.

Dazu gehören die orthotope Transplantation und Retransplantation der linken Lunge, die Klemmung des linken Lungenhilus, die nicht-invasive Positronen-Emissions-Tomographie und die Intravitalbildgebung mit zwei Photonen. Unsere Forschung zeigt einzigartige Immunreaktionen in transplantierten Lungen. Mit Hilfe fortschrittlicher bildgebender Verfahren haben wir entdeckt, dass Empfängermonozyten die Neutrophileninfiltration in Lungenallotransplantaten über IL-1 beta fördern.

Wir fanden auch heraus, dass sich FOXP3-regulatorische T-Zellen in diesen Allotransplantaten gruppieren und vor Antikörper-vermittelter Abstoßung schützen. Unsere Technik ist einfach einzurichten, mit Materialien, die in einem Mikroskopielabor leicht zu finden sind, wie z. B. Gewebekleber und Deckgläser. Darüber hinaus bietet es im Vergleich zu anderen Techniken ein größeres Sichtfeld.

Unser Labor ist daran interessiert, die Mechanismen zu verstehen, die die Toleranz von Lungentransplantaten induzieren und aufrechterhalten. Die intravitale Bildgebung wird es uns ermöglichen, die Wechselwirkungen zwischen Immunzellen während der Abstoßung und Toleranz sichtbar zu machen.

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Schlüsselwörter: Zwei-Photonen-Mikroskopie Intravitale Bildgebung Lungentransplantation Immunzelltransport zelluläre Dynamik Graft-Host-Interaktionen Lungentransplantat

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