Name: Schnelle glykoqualitative Bewertung rekombinanter Proteine mit einem vollautomatischen System (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-06-28T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 19 s
Description: Erfahren Sie die glykoqualitative Analyse rekombinanter Proteine mit einem vollautomatischen Lectin-basierten System. Diese Methode reduziert den Arbeitsaufwand und ermöglicht die effiziente Validierung von Glykanstrukturen in Biopharmazeutika.

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<meta charset="utf8"></head><body>Automatisierte Lektin-basierte Glykanprofilierung mit Bead Array in a Single Tip (BIST)

<ol><li>Butler, M., Reichl, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+cell+expression+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Biochem+Eng+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Animal cell expression systems.</a> Adv Biochem Eng Biotechnol. 175, 1-36 (2021).</li>
<li>Silva, M. L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chapter+One+-+Lectin+biosensors+in+cancer+glycan+biomarker+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Clin+Chem%22%5BJournal%5D)">Chapter One - Lectin biosensors in cancer glycan biomarker detection.</a> Adv Clin Chem. 93, 1-61 (2019).</li>
<li>Hiono, T., Nagai-Okatani, C., Kuno, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((4.07+-+Application+of+glycan-related+microarrays%5BTitle%5D)+AND+%22Comprehensive+Glycoscience+%28Second+Edition%29%22%5BJournal%5D)">4.07 - Application of glycan-related microarrays.</a> Comprehensive Glycoscience (Second Edition). , 134-148 (2021).</li>
<li>Shimazaki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lectin+bead+array+in+a+single+tip+facilitates+fully+automatic+glycoprotein+profiling%29%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Lectin bead array in a single tip facilitates fully automatic glycoprotein profiling).</a> Anal Chem. 91 (17), 11162-11169 (2019).</li>
<li>Shimazaki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GlycoBIST%3A+A+System+for+automatic+glycan+profiling+of+a+target+protein+using+milli-bead+array+in+a+tip%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Protein+Sci%22%5BJournal%5D)">GlycoBIST: A System for automatic glycan profiling of a target protein using milli-bead array in a tip.</a> Curr Protoc Protein Sci. 99 (1), e103(2020).</li>
<li>Mahmood, T., Yang, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Western+blot%3A+Technique%2C+theory%2C+and+trouble+shooting%5BTitle%5D)+AND+%22N+Am+J+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Western blot: Technique, theory, and trouble shooting.</a> N Am J Med Sci. 4 (9), 429-434 (2012).</li>
<li>Bojar, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+useful+guide+to+lectin+binding%3A+machine-learning+directed+annotation+of+57+unique+lectin+specificities%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Chem+Biol%22%5BJournal%5D)">A useful guide to lectin binding: machine-learning directed annotation of 57 unique lectin specificities.</a> ACS Chem Biol. 17 (11), 2993-3012 (2022).</li>
<li>Nagai-Okatani, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2.0%3A+An+integrated+visualization+for+lectin+microarray-based+mouse+tissue+glycome+mapping+data+with+lectin+histochemistry%5BTitle%5D)+AND+%22J+Proteome+Res%22%5BJournal%5D)">2.0: An integrated visualization for lectin microarray-based mouse tissue glycome mapping data with lectin histochemistry.</a> J Proteome Res. 20 (4), 2069-2075 (2021).</li>
<li>Geisler, C., Jarvis, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effective+glycoanalysis+with+Maackia+amurensis+lectins+requires+a+clear+understanding+of+their+binding+specificities%5BTitle%5D)+AND+%22Glycobiology%22%5BJournal%5D)">Effective glycoanalysis with Maackia amurensis lectins requires a clear understanding of their binding specificities.</a> Glycobiology. 21 (8), 988-993 (2011).</li>
<li>Noro, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((N+-glycan+structures+of+Wisteria+floribunda+agglutinin-positive+Mac2+binding+protein+in+the+serum+of+patients+with+liver+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Glycobiology%22%5BJournal%5D)">N -glycan structures of Wisteria floribunda agglutinin-positive Mac2 binding protein in the serum of patients with liver fibrosis.</a> Glycobiology. 31 (10), 1268-1278 (2021).</li>
<li>Rawitch, A. B., Pollock, H. G., Yang, S. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thyroglobulin+glycosylation%3A+Location+and+nature+of+the+N-Linked+oligosaccharide+units+in+bovine+thyroglobulin%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Biochem+Biophys%22%5BJournal%5D)">Thyroglobulin glycosylation: Location and nature of the N-Linked oligosaccharide units in bovine thyroglobulin.</a> Arch Biochem Biophys. 300 (1), 271-279 (1993).</li>
<li>Dang, K., Zhang, W., Jiang, S., Lin, X., Qian, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+lectin+microarrays+for+biomarker+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Chemistry+Open%22%5BJournal%5D)">Application of lectin microarrays for biomarker discovery.</a> Chemistry Open. 9 (3), 285-300 (2020).</li>
<li>Chen, S., Qin, R., Mahal, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sweet+systems%3A+Technologies+for+glycomic+analysis+and+their+integration+into+systems+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Rev+Biochem+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Sweet systems: Technologies for glycomic analysis and their integration into systems biology.</a> Crit Rev Biochem Mol Biol. 56 (3), 301-320 (2021).</li>
<li>Dwivedi-Agnihotri, H., Srivastava, A., Shukla, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+biotinylation+of+purified+proteins+for+measuring+protein-protein+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Reversible biotinylation of purified proteins for measuring protein-protein interactions.</a> Methods Enzymol. 633, 281-294 (2020).</li>
<li>Shimazaki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auto-lectin+dotcoding+by+two+octopuses%3A+Rapid+analysis+of+fluorescence-labeled+glycoproteins+by+an+8-channel+fully-automatic+bead+array+scanner+with+a+rolling-circle+detector%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Auto-lectin dotcoding by two octopuses: Rapid analysis of fluorescence-labeled glycoproteins by an 8-channel fully-automatic bead array scanner with a rolling-circle detector.</a> Anal Chem. 95 (32), 11868-11873 (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,2 mL 8 PCR-Röhrchen + Schieberkappe</td><td>FastGene</td><td>FG-0028FC/SE</td><td>Zum Dispensieren und Lagern von Biotin-Markierungsreagenzien</td></tr><tr><td>2,0 mL SC Micro Tube Protein LB</td><td>SARSTEDT AG&Co. KG</td><td>72.694.600</td><td>Zum Laden von Proben in die LuBEA-VIII</td></tr><tr><td>Analysesoftware</td><td>SAS Institute Inc.</td><td>JMP 17</td><td></td></tr><tr><td>Antistatischer Ionisator. 110 Volt</td><td>Plas-Labs</td><td>800-AS/SPI</td><td>Verwendung beim Einsetzen von Perlen in die BIST-Spitze.</td></tr><tr><td>Antistatische Pinzette NK2A</td><td>RUBIS&nbsp;</td><td>9-5681-01</td><td>Beim Einsetzen von Perlen in die BIST-Spitze verwenden.</td></tr><tr><td>Automatisiertes Reaktionsmessgerät</td><td>Precision System Science Co., Ltd.</td><td>LuBEA</td><td>Alle Daten in dieser Studie wurden mit LuBEA-VIII gewonnen. Während LuBEA kommerzialisiert wird, befindet sich LuBEA-VIII derzeit in der Entwicklungsphase. Die Website für Produktdetails zu LuBEA und LuBEA-VIII finden Sie unter der folgenden URL (https://www.pss.co.jp/english/technology/apit/bist02.html).</td></tr><tr><td>Biotin-(AC5)2 Sulfo-Osu</td><td>Dojindo</td><td>341-06801</td><td>Als Biotinilierungsreagenz</td></tr><tr><td>BIST Spacer-Perle - V-11</td><td>Precision System Science Co., Ltd.</td><td>F4938000</td><td>Durchmesser: 1 mm</td></tr><tr><td>BIST Spitze und Scheide</td><td>Precision System Science Co., Ltd.</td><td>F4930-000</td><td>Füllen Sie diese leere Spitze mit Perlen.</td></tr><tr><td>Calciumchlorid</td><td>Wako</td><td>039-00475</td><td>Zur Herstellung von Pufferlösungen</td></tr><tr><td>Kann Signallösung erhalten Lösung 2</td><td>TOYOBO</td><td>NKB-301</td><td>Dieses Blockierungsreagenz ist gut für diese Methode</td></tr><tr><td>CentriVap Tisch-Vakuumkonzentratoren</td><td>Labconco</td><td>7810010</td><td>Für trockene Biotinilierungsreagenzien. Die Substitution durch andere Unternehmen ist möglich.</td></tr><tr><td>Clarity Western ECL-Substrat&nbsp;</td><td>Bio-Rad</td><td>1705060</td><td>Zur Messung der Proben mit LuVEA VIII</td></tr><tr><td>Kühlfalle CentriVap Serie</td><td>Labconco</td><td>7460040</td><td>Für trockenes Biotinilierungsreagenz. Die Substitution durch andere Unternehmen ist möglich.</td></tr><tr><td>Glycin</td><td>Wako</td><td>077-00735</td><td>Zur Herstellung von Pufferlösungen</td></tr><tr><td>Mangan(II)-chlorid-Tetrahydrat</td><td>Wako</td><td>139-00722</td><td>Zur Herstellung von Pufferlösungen</td></tr><tr><td>Milli-Q Referenz</td><td>MERCK</td><td>ZIQ7000T0C</td><td>Als deionasiertes Wasser zur Verdünnung von Reagenzien und Puffern</td></tr><tr><td>PBS</td><td>Wako</td><td>162-19321</td><td>Zur Herstellung von Pufferlösungen</td></tr><tr><td>Peroxidase Streptavidin</td><td>Jackson</td><td>016-030-084</td><td>Dieser Antikörper ist gut für die GlycoBIST-Analyse. Es ist nützlich für den Nachweis des Western Blottings, obwohl Substitutionen von anderen Unternehmen bereitgestellt werden können.</td></tr><tr><td></td><td>Verifizierter Lieferant - Precision System Science Co., Ltd.</td><td>FP4936000</td><td>Zur Herstellung von lektinfixierten Kügelchen. Weitere Informationen finden Sie unter Shimazaki, H. et al., Current Protocols in Protein Science, 2020 im Referenzabschnitt.</td></tr><tr><td>Protein LoBind Tubes 1,5 mL</td><td>Eppendorf</td><td>0030108442</td><td>Verwendung bei der Vorbereitung der Proben, z. B. bei der Biotinylierung.</td></tr><tr><td>Kieselgel (für Trockenmittel)</td><td>Kanto-Chemikalie</td><td>37039-02</td><td>Bei der Lagerung der GlycoBIST-Spitze und des getrockneten Biotinylierungsreagenzes verwenden.</td></tr><tr><td>Blatt zur Entfernung statischer Elektrizität M</td><td>TRUSCO NAKAYAMA</td><td>SD5050</td><td>Verwenden Sie es beim Einsetzen von Perlen in die BIST-Spitze.</td></tr><tr><td>SV Kartusche II</td><td>Daido Chemische Industrie</td><td>ED041</td><td>Zur Messung der Proben mit LuVEA VIII</td></tr><tr><td>Tisch Mikrozentrifuge-CAPSULEFUGE</td><td>TOMY</td><td>PMC-060</td><td>Zum Schleudern der Mischung in jedem Prozess</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Nacalai tesque</td><td>35501-15</td><td>Zur Herstellung von Pufferlösungen</td></tr></tbody></table>

schnelle glykoqualitative bewertung rekombinanter proteine mit einem vollautomatischen system

Rapid Glyco-Qualitative Assessment of Recombinant Proteins Using a Fully Automated System

Schnelle glykoqualitative Bewertung rekombinanter Proteine mit einem vollautomatischen System

Protein glycosylation, a critical post-translational modification, influences the stability, efficacy, and immunogenicity of recombinant proteins, ...

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Research

Forschung

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemie

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Chemisch-Antikörper blockiert Microarray für Multiplex-High-Throughput-Profiling von spezifischen Protein-Glykosylierung bei Complex Samples

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Wir präsentieren eine automatisierte modulare Hochdurchsatzmethode zur Identifizierung und Charakterisierung von mikrobiellen Exopolysacchariden in kleinem Maßstab. Diese Methode kombiniert eine schnelle Vorselektion zur Analyse der Gesamtmenge an sezernierten Polysacchariden mit einem detaillierten Kohlenhydrat-Fingerabdruck, um ein schnelles Screening von neu isolierten Bakterienstämmen oder ganzen Stammsammlungen zu ermöglichen.

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Schnelle Produktion rekombinanter menschlicher SLFN14-Ribonuklease und stöchiometrische Analyse mittels Massenphotometrie

Erfahren Sie die glykoqualitative Analyse rekombinanter Proteine mit einem vollautomatischen Lectin-basierten System. Diese Methode reduziert den Arbeitsaufwand und ermöglicht die effiziente Validierung von Glykanstrukturen in Biopharmazeutika.

Schnelle glykoqualitative Bewertung rekombinanter Proteine mit einem vollautomatischen System

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