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Zerstörungsfreie SPE-UPLC-basierte Quantifizierung von Aflatoxinen und Stilbenoid-Phytoalexinen i...
Zerstörungsfreie SPE-UPLC-basierte Quantifizierung von Aflatoxinen und Stilbenoid-Phytoalexinen i...
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Non-destructive SPE-UPLC-based Quantification of Aflatoxins and Stilbenoid Phytoalexins in Single Peanut (Arachis spp.) Seeds

Zerstörungsfreie SPE-UPLC-basierte Quantifizierung von Aflatoxinen und Stilbenoid-Phytoalexinen in einzelnen Erdnüssen (Arachis spp.) Samen

Full Text
1,699 Views
10:24 min
April 19, 2024

DOI: 10.3791/66574-v

Victor S Sobolev1, Renee S Arias1, Alicia N Massa1, Travis E Walk1, Valerie A Orner1, Marshall C Lamb1

1National Peanut Research Laboratory, Agricultural Research Service,U.S. Department of Agriculture

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Wir demonstrieren eine Methode mit mittlerem Durchsatz zur Quantifizierung von Aflatoxinen und Stilbenoid-Phytoalexinen in einzelnen Erdnusssamen mittels Hochleistungsflüssigkeitschromatographie. Diese Methode wurde speziell für die Analyse von wilden Arachis-Arten entwickelt, die von der aflaoxigenen Aspergillus-Art befallen sind.

Ziel der Forschung war es, eine Methode zur Quantifizierung von Aflatoxinen und defensiven Phytoalexinen in Tausenden von Erdnusssamen für die Erforschung von wildem Arachis-Keimplasma zu entwickeln, gegen Aspergillus resistente Arten zu identifizieren und neue Quellen genetischer Resistenz gegen diesen Pilzerreger zu bestimmen und zu charakterisieren. Unsere Forschungsgruppe hat herausgefunden, dass der vielversprechendste Ansatz zur Identifizierung von Erdnuss-Keimplasma, das kein Aflatoxin akkumuliert, darin besteht, eine ganzheitliche Analyse jedes einzelnen Samens durchzuführen, einschließlich seiner Transkriptomik, Genomik, Phytoalexine und Mykotoxinprofile. Wir haben Protokolle für die Analyse von wilden und kultivierten Erdnusssamen entwickelt, d. h. die Verwendung von 1/4 eines einzelnen Samens für die chemische Profilerstellung. Entwicklung von Hochdurchsatzmethoden für eine effektive Saatgutherausforderung, Extraktion und genaue Quantifizierung von Phytoalexinen in Erdnusssamenproben.

Wir haben zahlreiche Erdnuss-Phytoalexine entdeckt und effiziente und kostengünstige Methoden zur Aflatoxinanalytik sowie zum Screening von Erdnusskeimplasma mit reduzierter oder keiner Aflatoxinakkumulation entwickelt. Zu den Methoden gehören die Genotypisierung und die Bestimmung der Lebensfähigkeit des Saatguts.

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Schlüsselwörter: Zerstörungsfrei SPE-UPLC Aflatoxine Stilbenoid-Phytoalexine Erdnuss Arachis spp. Aspergillus Pilzpathogene Resistenz Einzelsamenanalyse Phytoalexine Keimplasmaexploration

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