Name: Quantitative Analyse von Vitamin-A-Metaboliten in okulärem und nicht-okulärem Gewebe von Mäusen mittels Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-12-27T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 3 s
Description: Erfahren Sie die quantitative Analyse von Vitamin-A-Metaboliten in okulärem und systemischem Gewebe von Mäusen mittels HPLC. Diese Methode untersucht die physiologischen Funktionen der Transporter STRA6 und RBPR2.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Vitamin-A-Metaboliten-Analyse in murinem Gewebe für Rhodopsin-Funktionsstudien

<table><tbody><tr><td>Reagenz</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>1-Octanol, geeignet für HPLC, &ge; 99,5%</td><td>Sigma-Aldrich, Millipore Sigma</td><td>203-917-6</td><td></td></tr><tr><td>1,4-Dioxan, geeignet für HPLC, &ge; 99,5%</td><td>Sigma-Aldrich, Millipore Sigma</td><td>204-661-8</td><td></td></tr><tr><td>11-cis-Retinal</td><td>National Eye Institute</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>11-cis-Retinol</td><td>Toronto Research Chemicals</td><td>TRC-R252105</td><td></td></tr><tr><td>13-cis-Retinal</td><td>Toronto Research Chemicals</td><td>TRC-R239900</td><td></td></tr><tr><td>13-cis-Retinol</td><td>Toronto Research Chemicals</td><td>TRC-R252110</td><td></td></tr><tr><td>All-trans-Retinal</td><td>Toronto Research Chemicals</td><td>TRC-R240000</td><td></td></tr><tr><td>All-trans-Retinol</td><td>Toronto Research Chemicals</td><td>TRC-R252002</td><td></td></tr><tr><td>Ethylacetat, geeignet für HPLC, &ge; 99,7%</td><td>Sigma-Aldrich, Millipore Sigma</td><td>205-500-4</td><td></td></tr><tr><td>Hexan, HPLC-Qualität</td><td>Fisher Scientific, Spectrum Chemical</td><td>18-610-808</td><td></td></tr><tr><td>Methanol (HPLC)</td><td>Fisher Scienctific</td><td>A452SK-4</td><td></td></tr><tr><td>Retinylpalmitat</td><td>Toronto Research Chemicals</td><td>TRC-R275450</td><td></td></tr><tr><td>Natriumchlorid (kristallin/ACS-zertifiziert)</td><td>Fisher Scientific</td><td>S271-500<</td><td></td></tr><tr><td>strong>Instruments</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>1260 Infinity II Analytischer Fraktionssammler</td><td>Agilent</td><td>G1364F</td><td></td></tr><tr><td>1260 Infinity II Binärpumpe</td><td>Agilent</td><td>G7112B</td><td></td></tr><tr><td>1260 Infinity II Diodenarray-Detektor</td><td>Agilent</td><td>G7115A</td><td></td></tr><tr><td>1260 Infinity II Mehrsäulenthermostat</td><td>Agilent</td><td>G7116A</td><td></td></tr><tr><td>1260 Infinity II Vialsampler</td><td>Agilent</td><td>G7129A</td><td></td></tr><tr><td>ST40R Kühlzentrifuge</td><td>Thermo Scientific</td><td>TSST40R</td><td></td></tr><tr><td>Vacufuge Plus Zentrifuge Konzentrator</td><td>Eppendorf</td><td>22820168</td><td></td></tr><tr><td>Verbrauchsmaterialien2 mL</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Braune Fläschchen mit Schraubverschluss</td><td>Agilent</td><td>5188-6535</td><td></td></tr><tr><td>Bördelkappe mit PTFE/roten Gummisepten, 11 mm</td><td>Agilent</td><td>5183-4498</td><td></td></tr><tr><td>Konische Einweg-Zentrifugenröhrchen aus Glas</td><td>Millipore Sigma</td><td>CLS9950215</td><td></td></tr><tr><td>Schraubverschlussröhrchen, 15 mL</td><td>Sarstedt</td><td>62.554.502</td><td></td></tr><tr><td>Fläschcheneinsatz, 150 & Mikro; L, Glas mit Polymerfüßen</td><td>Agilent</td><td>5183-2088</td><td></td></tr></tbody></table>

quantitative analyse von vitamin-a-metaboliten in okulärem und nicht-okulärem gewebe von mäusen mittels hochleistungsflüssigkeitschromatographie

Quantitative Analysis of Dietary Vitamin A Metabolites in Murine Ocular and Non-Ocular Tissues Using High-Performance Liquid Chromatography

Hier haben wir die oben beschriebene Methode zum Nachweis und zur Quantifizierung von Retinoiden in murinem okulärem und systemischem Gewebe verwendet und repräsentative Chromatogramme erstellt. Zusätzlich geben wir eine Zusammenfassung der typischen Retinoide, die in diesen Geweben nachgewiesen werden können.
Im Alter von 6 Monaten wurden die Mäuse durch CO2 -Erstickung eingeschläfert. Um den okulären Retinoidgehalt aufrechtzuerhalten, wurden die Mäuse vor der Euthanasation und Extraktion 2 Tage lang dunkeladaptiert. Zwei Augen, 0,2 g Leber und 75 μl Blut wurden für die Retinoidextraktion und die anschließende HPLC-Analyse entnommen. Für das Augengewebe wurde ein Auge ohne Zusatz von Hydroxylamin extrahiert, während das andere einer Hydroxylaminbehandlung unterzogen wurde. Für Leber und Blut war eine Hydroxylaminbehandlung nicht erforderlich, da Retinaldehyde in diesen Geweben normalerweise nicht nachgewiesen werden.
Im Chromatogramm des Mausauges, das nicht mit Hydroxylamin behandelt wurde, wurde 13-cis-Retinal, eines der beiden nicht-kanonischen Retinaldehyd-Isomere, identifiziert. Zusätzlich wurden sowohl 11-cis-Retinal als auch all-trans-Retinal, die beiden kanonischen Retinaldehyd-Isomere, identifiziert. In beiden Chromatogrammen wurden sowohl das visuelle Zyklus-Zwischenprodukt 11-cis-Retinol als auch der Hauptvitamin-A-Transport von all-trans-Retinol identifiziert (Abbildung 4A).
Im Chromatogramm des mit Hydroxylamin behandelten Mausauges waren noch alle zuvor erwähnten Retinaldehyd-Isomere vorhanden. Die Retentionszeiten für diese Isomere wurden jedoch deutlich erhöht. Darüber hinaus liegen diese Retinaldehyd-Isomere jetzt sowohl als syn- als auch als anti-Isomere vor. Bei der Quantifizierung durch Peak-Integration müssen sowohl die syn- als auch die anti-Peaks summiert werden, um einen genauen Integrationswert zu erhalten. Sowohl 11-cis-Retinol als auch all-trans-Retinol waren noch vorhanden (Abbildung 4B).
Im Chromatogramm von Lebergewebe von Mäusen wurden Retinylpalmitat und all-trans-Retinol in diesen Geweben identifiziert. Retinylpalmitat, ein Retinylester, dient als Hauptspeicherform von Vitamin A bei Säugetieren und kommt in erheblichen Mengen im Lebergewebe von Säugetieren vor. Die Leber gibt Vitamin A in systemisches Gewebe als Holo-RBP4 ab, das all-trans-Retinol innerhalb des RBP4-Transthryetin-Komplexes enthält. Anschließend kann in diesem Chromatogramm ein großer all-trans-Retinol-Peak identifiziert werden (Abbildung 4C).
Im Chromatogramm des Blutes von Mäusen wurde ein großer all-trans-Retinol-Peak identifiziert. Angesichts der Tatsache, dass Holo-RBP4 aus der Leber über das Kreislaufsystem an systemische Gewebe abgegeben wird, ist dies zu erwarten (Abbildung 4D). Die charakteristische UV-Spektrum-Absorption (~250-400 nm) der Retinoid-Isoformen auf den zeitabhängig aufgelösten HPLC-Peaks kann hilfreich sein, um die Qualität des Vorhandenseins der Isoform in einem bestimmten jeweiligen Peak zunächst zu bestätigen (Abbildung 5).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig01.jpg"> Abbildung 1: Chemische Strukturen von Retinoiden. (A) Diese Retinoide kommen typischerweise in extrahiertem Mausgewebe vor. Beachten Sie die unterschiedlichen polaren Endgruppen sowie die unterschiedlichen Positionen der cis-Doppelbindungen in Retinoid-Isomeren. (B) Die Umwandlung von Retinaldehyden in Netzhautoxime erhöht die Extraktionseffizienz, verhindert die Co-Elution von Peaks mit Retinylpalmitat sowie die Co-Elution innerhalb von Retinaldehyd-Isomeren. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig01large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig02.jpg"> Abbildung 2: Arbeitsablauf für Gewebeentnahme, Homogenisierung, Retinoidextraktion und Analyse. Netzhaut- und Gewebeproben von dunkeladaptierten Mäusen wurden homogenisiert und extrahiert. Schritt 1: Nach der Euthanasie von Mäusen gemäß den Richtlinien werden Blut und verschiedene Gewebe entnommen. Schritte 2-4: Die Gewebehomogenisierung erfolgt dann mit Kochsalzlösung und Methanol, mit Hydroxylaminhydrochlorid für quantitative Analysen. Schritte 5-7: Retinoide werden mit Hexan behandelt, gefolgt von einer Verdampfung. Schritte 8,9: Resuspendiert mit 100 μl Hexan, um sicherzustellen, dass alle Retinoide aufgelöst sind. Schritt 10: Abschließend werden die Proben mittels HPLC analysiert. Abkürzung: HPLC = High-performance Liquid Chromatography. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig02large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig03.jpg"> Abbildung 3: Chromatogramm von Retinoidstandards und Hydroxylamin-behandelten Retinoidstandards. (A) Dieses Chromatogramm enthält Retinylpalmitat, 13-cis-Retinal, 11-cis-Retinal, all-trans-Retinal, 11-cis-Retinol, 13-cis-Retinol und all-trans-Retinol-Standards. (B) Dieses Chromatogramm enthält Retinylpalmitat, 13-cis-Retinal, 11-cis-Retinal, all-trans-Retinal, 11-cis-Retinol, 13-cis-Retinol und all-trans-Retinol-Standards. Dieses Chromatogramm enthält neben den Retinol-Isomeren auch die Syn- und Anti-Oxim-Retinaldehyd-Isomere. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig03large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig04.jpg"> Abbildung 4: Repräsentative Chromatogramme. (A) Repräsentatives Chromatogramm des Augengewebes der Maus. Dieses Chromatogramm enthält neben Retinol-Isomeren auch Retinoide, die typischerweise im Augengewebe von Mäusen vorkommen, einschließlich Retinaldehyd-Isomere. (B) Repräsentatives Chromatogramm von mit Hydroxylamin behandeltem Augengewebe von Mäusen. Es ist zu beachten, dass dieses Chromatogramm anstelle der nicht chemisch modifizierten Retinaldehyde, die in den vorherigen Chromatogrammen (Abbildung 4A) gefunden wurden, zusätzlich zu den Retinol-Isomeren die Syn- und Anti-Oxim-Retinaldeyde-Isomere enthält. (C) Repräsentatives Chromatogramm von Lebergewebe der Maus. Dieses Chromatogramm enthält Retinoide, die typischerweise im Lebergewebe von Mäusen vorkommen, einschließlich Retinylpalmitat und All-trans-Retinol. (D) Repräsentatives Chromatogramm von Mausblut. Dieses Chromatogramm enthält Retinoide, die typischerweise im Blut von Mäusen vorkommen, einschließlich all-trans-Retinol. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig04large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig05.jpg"> Abbildung 5: UV-Absorptionsspektrum von Retinaldehyd-Isomeren aus murinem Augengewebe. Absorptionsspektren von (A) 13-cis-Retinal, (B) 11-cis-Retinal, (C) 9-cis-Retinal, (D) all-trans-Retinal, (E) syn 11-cis-Retinaloxim, (F) Anti-11-cis-Retinaloxim. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig05large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig06.jpg"> Abbildung 6: Überblick über HPLC-Module, mobile Phasenströmung und andere Instrumente. Der mobile Phasenfluss beginnt bei den vorbereiteten Lösungsmittelflaschen und wird von der binären Pumpe mit hohem Druck in den Autosampler gepumpt, wo der Analyt in den Lösungsmittelstrom eingearbeitet wird. Die bewegliche Phase und der Analyt gelangen in das temperaturgeregelte Säulenfach und schließlich zur Messung in den Diodenarray-Detektor. (A) Rot getönter Monitorbildschirm zur Minimierung der Photoisomerisierung von Retinoiden. (B) Binäre Pumpe. (C) Probennehmer für Fläschchen. (D) Mehrsäulen-Thermostat. (E) Diodenarray-Detektor. (F) Analytischer Fraktionssammler. (G) Abfallbehälter aus Poly mit hoher Dichte. (H) Von links nach rechts, Bördelkappe aus Aluminium, 250-μl-Einsatz mit Polymerfüßen, gelbbraun getöntes Bördelfläschchen mit Bördelaufsatz, Endmontage des Injektionsfläschchens. (I) Links, gekühlte Zentrifuge. Rechts, Zentrifugenkonzentrator. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig06large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Verbindung</td>
			<td>Molares Absorptionsvermögen (ε)</td>
			<td>Lösungsmittel</td>
			<td>Referenz</td>
		</tr><tr><td>Retinylpalmitat</td>
			<td>49260</td>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Hubbard et al.49</td>
		</tr><tr><td>13-cis-Retinal</td>
			<td>35500</td>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Hubbard et al.49</td>
		</tr><tr><td>11-cis-Netzhaut</td>
			<td>24935</td>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Hubbard et al.49</td>
		</tr><tr><td>9-cis-Retinal</td>
			<td>36100</td>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Robeson et al.51</td>
		</tr><tr><td>All-trans-Retinal</td>
			<td>42880</td>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Hubbard et al.49</td>
		</tr><tr><td>11-cis-Retinol</td>
			<td>34890</td>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Hubbard et al.49</td>
		</tr><tr><td>13-cis-Retinol</td>
			<td>48305</td>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Robeson et al.50 und Robeson et al.51</td>
		</tr><tr><td>All-Trans-Retinol</td>
			<td>52770</td>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Hubbard et al.49</td>
		</tr></tbody></table>Tabelle 1: Molares Absorptionsvermögen von Retinoiden in Ethanol. Die molaren Absorptionswerte von Retinoiden wurden von Kane und Napoli44, Hubbard et al.46, Robeson et al.47 und Robeson et al.48 erhoben. Das molare Absorptionsvermögen hängt vom Lösungsmittel ab. Die hier aufgeführten Werte sind spezifisch für in Ethanol gelöste Retinoide.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Gewebe</td>
			<td>Menge der Gewebeentnahme</td>
			<td>Volumen für die Homogenisierung</td>
		</tr><tr><td>Blut</td>
			<td>75 μL</td>
			<td>N/A</td>
		</tr><tr><td>Leber</td>
			<td>0,2 g</td>
			<td>2 mL</td>
		</tr><tr><td>Niere</td>
			<td>2 ganze Nieren</td>
			<td>2 mL</td>
		</tr><tr><td>Haut</td>
			<td>0,2 g</td>
			<td>1 mL – 1,5 mL</td>
		</tr><tr><td>Milz</td>
			<td>1 ganze Milz</td>
			<td>1 mL</td>
		</tr><tr><td>Auge</td>
			<td>Beide Retina, Pool 4 Retina</td>
			<td>1 mL</td>
		</tr><tr><td>Gehirn</td>
			<td>1 ganzes Gehirn</td>
			<td>2 mL</td>
		</tr><tr><td>Herz</td>
			<td>1 Ganzes Herz</td>
			<td>1 mL</td>
		</tr><tr><td>Lunge</td>
			<td>0,2 g</td>
			<td>2 mL</td>
		</tr></tbody></table>Tabelle 2: Empfohlene Gewebemenge pro Analyse. Gewebemenge pro Analyse und Volumen von 50 % eiskalter Kochsalzlösung (0,9 %) und 50 % Methanol für die Gewebehomogenisierung, wie von Kane und Napoliempfohlen 44.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Verbindung</td>
			<td>Aufbewahrungszeit (min)</td>
			<td>Maximale UV-Absorption (nm)</td>
		</tr><tr><td>Retinylpalmitat</td>
			<td>5.177</td>
			<td>326</td>
		</tr><tr><td>13-cis-Retinal</td>
			<td>7.268</td>
			<td>366</td>
		</tr><tr><td>11-cis-Netzhaut</td>
			<td>7.691</td>
			<td>366</td>
		</tr><tr><td>9-cis-Retinal</td>
			<td>7.931</td>
			<td>364</td>
		</tr><tr><td>All-trans-Retinal</td>
			<td>8.993</td>
			<td>370</td>
		</tr><tr><td>11-cis-Retinol</td>
			<td>17.003</td>
			<td>318</td>
		</tr><tr><td>13-cis-Retinol</td>
			<td>17.83</td>
			<td>328</td>
		</tr><tr><td>All-Trans-Retinol</td>
			<td>23.933</td>
			<td>326</td>
		</tr></tbody></table>Tabelle 3: Retentionszeiten und maximale Absorptionswellenlängen von Retinoiden. Diese Werte wurden bei Verwendung mit dem beschriebenen Verfahren und der mobilen Phase beobachtet, wie sie mit dem referenzierten Diodenarray-Detektor detektiert wurden.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Verbindung</td>
			<td>Aufbewahrungszeit (min)</td>
			<td>Maximale UV-Absorption (nm)</td>
		</tr><tr><td>Syn 11-cis-Retinaloxim</td>
			<td>9.59</td>
			<td>346</td>
		</tr><tr><td>Syn All-trans-Retinales Oxim</td>
			<td>10.6</td>
			<td>356</td>
		</tr><tr><td>Syn 13-cis-Retinaloxim</td>
			<td>11.3</td>
			<td>352</td>
		</tr><tr><td> Anti-13-cis-Retinaloxim</td>
			<td>13</td>
			<td>356</td>
		</tr><tr><td> Anti-11-cis-Retinaloxim</td>
			<td>15.1</td>
			<td>350</td>
		</tr><tr><td>Anti All-trans-Retinales Oxim</td>
			<td>19.7</td>
			<td>360</td>
		</tr></tbody></table>Tabelle 4: Retentionszeiten und maximale Absorptionswellenlängen von Hydroxylamin-behandelten Retinaldehyden, was zu Syn- und Anti-Oxim-Isomeren jedes Retinaldehyds führt. Diese Werte wurden bei Verwendung mit dem beschriebenen Verfahren und der mobilen Phase beobachtet, wie sie mit dem referenzierten Diodenarray-Detektor detektiert wurden.

Quantitative Analyse von Vitamin-A-Metaboliten in okulärem und nicht-okulärem Gewebe von Mäusen mittels Hochleistungsflüssigkeitschromatographie

G protein-coupled receptors (GPCRs) are a superfamily of transmembrane proteins that initiate signaling cascades through activation of its G protein upon ...

quantitative-analysis-dietary-vitamin-metabolites-murine-ocular-non

Research

Forschung

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemie

Hier beschreiben wir ein Protokoll für die Extraktion von Metaboliten von Staphylococcus aureus und deren anschließenden Analyse mittels Flüssigchromatographie und Massenspektrometrie.

Ein Tandem-Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie-basierter Ansatz zur Analyse von Metabolit<em&gt; Staphylococcus aureus</em

Ein Protokoll zur umfassenden Extraktion von Lipiden, Metaboliten und Proteinen aus biologischen Geweben mit einer Probe wird vorgestellt.

Eine einfache Fraktionierte Extraktionsmethode für die umfassende Analyse von Metaboliten, Lipiden und Proteinen aus einer einzigen Probe

Wir präsentieren Ihnen ein Protokoll, um präzise quantitate Proteine mit Isobaren Kennzeichnung, umfangreiche Fraktionierung, Bioinformatik und Qualitätskontrolle Schritte in Kombination mit Flüssigkeitschromatographie eine Schnittstelle zu einem hochauflösenden Massenspektrometer.

Tiefen Proteom Profilierung durch isobare Kennzeichnung, umfangreiche Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie und softwaregestützte Quantifizierung

Blatt-Spray-Massenspektrometrie ist eine direkte chemische Analyse-Technik, die minimiert die Probenvorbereitung und beseitigt Chromatographie, so dass für die schnelle Erkennung von kleinen Molekülen von Pflanzengewebe.

Blatt-Spray-Massenspektrometrie: Eine schnelle Ambient Ionisation Technik direkt Metaboliten von Pflanzengewebe bewerten

Diese Methode beschreibt, einen stabile und reproduzierbaren Ansatz für den Vergleich der Proteingehalte in verschiedenen Geweben und an verschiedenen Entwicklungsstörungen Zeitpunkten mit einem standardisierten quantitativen westlichen befleckenden Ansatz.

Robuste Vergleich der Proteingehalte in Gewebe und in der gesamten Entwicklung mit standardisierten quantitativen Western Blotting

Diese Methode beschreibt die Probenvorbereitung aus kultivierten Zellen und tierischen Geweben, die Extraktion und Derivatisierung von Coenzym A in den Proben, gefolgt von einer Hochdruck-Flüssigkeitschromatographie zur Reinigung und Quantifizierung des derivatisierten Coenzyms A durch Absorptions- oder Fluoreszenzdetektion.

Quantifizierung von Coenzym A in Zellen und Geweben

Wir präsentieren ein Protokoll mit Flüssigchromatographie gekoppelt mit Tandem-Massenspektrometrie, um wichtige zelluläre Lipide in Saccharomyces cerevisiaezu identifizieren und zu quantifizieren. Die beschriebene Methode zur quantitativen Bewertung wichtiger Lipidklassen innerhalb einer Hefezelle ist vielseitig, robust und empfindlich.

Quantitative Analyse des Zelllipidoms von Saccharomyces Cerevisiae mit Flüssigchromatographie gekoppelt mit Tandem-Massenspektrometrie

Diese Methode beschreibt die Bewertung globaler Veränderungen in der Ubiquitin-Kettentopologie. Die Bewertung erfolgt durch die Anwendung eines auf Massenspektrometrie basierenden zielgerichteten Proteomik-Ansatzes.

Ubiquitin-Kettenanalyse durch Parallelreaktionsüberwachung

Eine Methode zur ungezielten Analyse von Weizenkornmetaboliten und Lipiden wird vorgestellt. Das Protokoll umfasst eine Acetonit-Metabolit-Extraktionsmethode und eine umgekehrte Phase-Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie-Methodik mit Erfassung in positiven und negativen Elektrospray-Ionisationsmodi.

Ungezielte Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie-basierte Metabolomik-Analyse von Weizengetreide

Dieses Protokoll umfasst eine detaillierte Analyse der Peptidoglykanzusammensetzung mittels Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie in Verbindung mit fortschrittlicher Merkmalsextraktion und bioinformatischer Analysesoftware.

Semi-quantitative Analyse von Peptidoglycan mittels Flüssigkeitschromatographie, Massenspektrometrie und Bioinformatik

Erfahren Sie die quantitative Analyse von Vitamin-A-Metaboliten in okulärem und systemischem Gewebe von Mäusen mittels HPLC. Diese Methode untersucht die physiologischen Funktionen der Transporter STRA6 und RBPR2.

Quantitative Analyse von Vitamin-A-Metaboliten in okulärem und nicht-okulärem Gewebe von Mäusen mittels Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (Video) | JoVE Journal

Quantitative Analyse von Vitamin-A-Metaboliten in okulärem und nicht-okulärem Gewebe von Mäusen mittels Hochleistungsflüssigkeitschromatographie

Weitere Videos entdecken