Name: Eine modifizierte Modellpräparation für die Reperfusion des Verschlusses der mittleren Hirnarterie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-05-31T15:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 18 s
Description: Erfahren Sie eine modifizierte Präparation für die Reperfusion nach Verschluss der mittleren Hirnarterie über die Arteria carotis communis. Diese Methode vereinfacht den komplexen Eingriff und erleichtert die Erforschung von Hirnischämie und neuroprotektiven Wirkstoffen.

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Diese Arbeit wurde unterstützt von der National Natural Science Foundation of China (82173781 und 82373835), dem Postdoktoranden-Forschungsprojekt (BKS212055), dem Science and Technology Innovation Project des Foshan Science and Technology Bureau (2320001007331), der Guangdong Basic and Applied Basic Research Foundation (2019A1515010806), Key Field Projects (Intelligent Manufacturing) der General Universities in der Provinz Guangdong (2020ZDZX2057) und den Scientific Research Projects (Charakteristische Innovation) der General Universitäten in der Provinz Guangdong (2019KTSCX195).

Das Versuchsprotokoll wurde in Übereinstimmung mit den Richtlinien des Ausschusses für die Verwendung von Labortieren und des institutionellen Tierpflege- und -verwendungsausschusses an der Universität für Traditionelle Chinesische Medizin in Chengdu (Aktenzeichen: 2019-DL-002) durchgeführt. Alle Tierforschungsdaten wurden nach den ARRIVE-Richtlinien (Animal Research: Reporting In Vivo Experiments) dokumentiert. Für diese Studie wurden männliche Sprague Dawley (SD) Ratten mit einem Gewicht von 250 g ± 20 g und einem Alter von 6-8 Wochen verwendet. Die Einzelheiten zu den verwendeten Tieren, Reagenzien und Geräten sind in der Materialtabelle aufgeführt.
1. Vorbereitung der Tiere
<ol><li>Einleitung und Aufrechterhaltung einer Tiefenanästhesie bei Ratten mit Zoletil 50 (50 mg/kg, IM) und Xylazinhydrochlorid (40 mg/kg, IP). Stellen Sie sicher, dass die Körpertemperatur während des gesamten chirurgischen Eingriffs bei 37 ± 0,5 °C gehalten wird, indem Sie eine Rektalsone verwenden, die mit einem Heizkissen verbunden ist. Tragen Sie Veterinärsalbe auf die Augen der Ratte auf, um ein Austrocknen zu verhindern.</li>
	<li>Rasieren Sie die Haare von Kopf und Hals der Ratten. Verwenden Sie Enthaarungscreme, um das Fell von Kopf und Hals zu entfernen, und waschen Sie die Creme dann mit normaler Kochsalzlösung ab. Desinfizieren Sie die Haut an der Operationsstelle, indem Sie Ethanol und Povidon-Jod dreimal mit sterilen Wattebällchen auftragen.</li>
	<li>Machen Sie mit einem Skalpell einen 2 cm langen Schnitt in der Mitte des Rattenkopfes entlang der Sagittalnaht und entfernen Sie vorsichtig die Muskeln, die den Schädel bedecken.</li>
	<li>Verdünne den Schädel auf der ischämischen Seite der Ratte mit einem Schädelbohrer. Verwenden Sie normale Kochsalzlösung, um sich während des Schleifvorgangs abzukühlen und Ablagerungen zu entfernen. Erfassen Sie den Ausgangsblutfluss der Ratten mit Hilfe der Laser-Speckle-Kontrastbildgebung (LSCI).</li>
	<li>Tragen Sie Ethanol und Povidon-Jod dreimal mit sterilen Wattebällchen auf die Haut des Halses auf. Machen Sie mit einer chirurgischen Klinge einen 2 cm langen Schnitt entlang der Mittellinie des Halses. Verwenden Sie Retraktoren, um die Haut und die Speicheldrüsen seitlich zurückzuziehen und die Sternocleidomastoideus- und Halsmuskulatur freizulegen.</li>
	<li>Trennen Sie die Muskeln sternocleidomastoideus und die Halsmuskulatur, um das Halsschlagadergebiet freizulegen. Identifizieren Sie die vaskuläre Anatomie der Arteria carotis communis (CCA), der Arteria carotis interna (ICA) und der Arteria carotis externa (ECA). Trennen Sie basierend auf der Gefäßanatomie die CCA sowie die von CCA abgeleitete ECA und ICA15. HINWEIS: Die anatomische Struktur der Ratte deutet darauf hin, dass die CCA-Region hauptsächlich von den Muskeln sternocleidomastoideus und der Halsmuskulatur bedeckt ist, wobei die ICA und ECA von der CCA abgeleitet sind. Nachdem die Trennung den CCA freigelegt hat, ist eine Y-förmige Gabel entlang des CCA zu sehen, die den ICA und den ECA darstellt. Seien Sie vorsichtig, um den Vagusnerv, der parallel zum CCA verläuft, nicht zu beschädigen.</li>
</ol>2. Okklusion des MCA
<ol><li>Binden Sie einen leicht zu entwirrenden Knoten über die Arteria carotis externa (ECA) und die Arteria carotis communis (CCA) mit einem 3-0 Seidenfaden, um den Blutfluss vorübergehend zu blockieren. Positionieren Sie einen Gefäßclip ca. 0,5 cm vom ersten Knoten entfernt auf dem CCA.<ol><li>Färben Sie die Nadel einer 5-ml-Spritze schwarz. Machen Sie mit der schwarz gefärbten Nadel einen kleinen Einstich in den CCA und markieren Sie die Nadellöcher in schwarz.</li>
	</ol></li>
	<li>Führen Sie das monofile Nylonnaht durch die schwarze Markierung in das CCA ein. Öffnen Sie den Gefäßclip und führen Sie den Nylondraht in die Arteria carotis interna (ICA), bis er mit leichtem Widerstand anhält. Ziehen Sie den zweiten Knoten fest an, um die monofile Nylonnaht in der Arterie an Ort und Stelle zu halten und ein Verschieben aus der Blockierposition zu verhindern.</li>
	<li>Notieren Sie sich zu diesem Zeitpunkt den Zeitpunkt der Ischämie und messen Sie den Blutflusswert auf der ischämischen Seite mittels LSCI. Verabreichen Sie Tropfen Bupivacain auf die Halswunde zur Analgesie und zum Wundverschluss. Entfernen Sie die Anästhesiemaske und lassen Sie die Ratte sich erholen. HINWEIS: Wenn das monofile Nylon-Nahtmaterial Schwierigkeiten beim Eindringen in das ICA hat, ziehen Sie es leicht zurück und versuchen Sie erneut, es einzuführen.</li>
</ol>3. Reperfusion von MCAO
<ol><li>Nach 90 Minuten Ischämie betäuben Sie die Ratten erneut mit Isofluran. Messen Sie den zerebralen Blutfluss von der ischämischen Seite mit LSCI und stellen Sie sicher, dass sich die monofile Nylonnaht nicht verschoben hat.</li>
	<li>Löse die Knoten an der Arteria carotis externa (ECA), um eine Blutreperfusion zu ermöglichen. Lösen Sie den Knoten an der Arteria carotis communis (CCA), befestigen Sie die monofile Naht und ziehen Sie die Naht zurück. Legen Sie einen Gefäßclip vor die feste monofile Naht, um Blutungen zu vermeiden.</li>
	<li>Ersetzen Sie den ersten CCA-Knoten durch einen Gefäßclip. Drehen Sie den Gefäßschnitt mit einer Pinzette seitlich (Abbildung 1). Klemmen Sie den Schnitt mit einer Pinzette und ligieren Sie ihn mit einem 6-0-Faden, um den Schnitt zu reparieren. Entfernen Sie den Gefäßclip, prüfen Sie, ob er undicht ist, und bestätigen Sie die vollständige Reperfusion (Video 1). HINWEIS: Führen Sie eine Ligatur durch, um den Schnitt zu reparieren und eine übermäßige Gefäßklemmung zu vermeiden, die zu einer CCA-Stenose führen könnte.</li>
	<li>Zeichnen Sie die Werte des zerebralen kortikalen Blutflusses mit LSCI nach der Inzisionsligatur auf, um eine erfolgreiche Reperfusion zu bestätigen. Schließen Sie den Halsschnitt mit Nähten und verabreichen Sie 1.00.000 Einheiten Penicillin und 2 ml Kochsalzlösung, um Infektionen und Dehydrierung zu verhindern.</li>
	<li>Halten Sie die Wärme aufrecht, bis die Ratten wieder zu Bewusstsein kommen. Bieten Sie nach der Operation weiches Futter an und überwachen Sie die Vitalfunktionen der Tiere.</li>
</ol>4. Beurteilung der Nervenfunktion und der zerebralen ischämischen Schädigung
<ol><li>Sobald die Ratten vollständig erwacht sind, wird ihre neuronale Funktion von Forschern bewertet, die die Tiergruppe nicht kennen. Verwenden Sie die Longa-Score-Skala (Tabelle 1) und die modifizierte mNSS-Skala (Severity Score) (Tabelle 2), um die neurologische Funktion aller Ratten zu bewerten.</li>
	<li>Nach 24 Stunden nach der Operation werden die Ratten unter Isofluran-induzierter Anästhesie (4 % Isofluran bei 4 l/min Sauerstoff) mittels Zervixdislokation16 eingeschläfert (gemäß den institutionell anerkannten Protokollen). Spülen Sie das Gehirn mit Eiswasser ab, um das restliche Blut zu entfernen.</li>
	<li>Teilen Sie das Hirngewebe in 5 Abschnitte und färben Sie diese mit TTC. Nehmen Sie Bilder von beiden Seiten der Hirngewebeschnitte auf, messen Sie den ischämischen Bereich der Vorder- und Rückseite mit der Image J-Software und berechnen Sie die Infarktrate mit der folgenden Formel: <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/67060/67060eq01.jpg" style="margin: auto;"> HINWEIS: S1 und S2 stellen den Infarktbereich des proximalen Vorderhirns bzw. der proximalen Hirnstammseite der Hirnschnitte dar. Die Infarktfläche jedes Hirnschnitts wird mit der Swanson-Formel korrigiert, wobei h die Dicke des Hirnschnitts darstellt. Diese Formel, die der Autor bereits in früheren Forschungen17 skizziert hat, ermöglicht eine genauere Berechnung der Größe der Infarktläsion.</li>
	<li>Analysieren Sie die Daten mit Hilfe von Statistik- und Grafiksoftware, um die Erfolgsquote und Stabilität des Modells zu bewerten.</li>
	<li>Die Immunfluoreszenzmethode wird zur Markierung kortikaler Neuronen bei Ratten eingesetzt, um die durch diese Methode verursachten neuronalen Schäden weiter zu validieren. Nach 24 Stunden Ischämie-Reperfusion bei Ratten wurde eine Herzperfusion mit vorgekühltem PBS durchgeführt, um Hirngewebe zu gewinnen.</li>
	<li>Betten Sie das Hirngewebe ein und frieren Sie es in Abschnitte ein. Verwenden Sie neuronale Antikörper wie den unreifen neuronalen Marker Doublecortin (DCX)18, den neuronalen Kernmarker Neuronale Kerne (NeuN)18 und den dendritischen Neuronenmarker Microtubuli-associated protein-2 (MAP-2)19. Beobachten Sie die Expression ischämischer Neuronen mit der konfokalen Lasermikroskopie.</li>
</ol>

Modifiziertes MCAO/R-Modell mit erhaltener ECA für verbesserte Reperfusion und Stabilität

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<li>Feigin, V. L., Owolabi, M. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pragmatic+solutions+to+reduce+the+global+burden+of+stroke%3A+a+World+Stroke+Organization-Lancet+Neurology+Commission%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Neurol%22%5BJournal%5D)">Pragmatic solutions to reduce the global burden of stroke: a World Stroke Organization-Lancet Neurology Commission.</a> Lancet Neurol. 22 (12), 1160-1206 (2023).</li>
<li>Putaala, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+Stroke+in+Young+Adults%5BTitle%5D)+AND+%22Continuum+%28Minneapolis%2C+Minn%29%22%5BJournal%5D)">Ischemic Stroke in Young Adults.</a> Continuum (Minneapolis, Minn). 26 (2), 386-414 (2020).</li>
<li>Girotra, T., Lekoubou, A., Bishu, K. G., Ovbiagele, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+contemporary+and+comprehensive+analysis+of+the+costs+of+stroke+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Sci%22%5BJournal%5D)">A contemporary and comprehensive analysis of the costs of stroke in the United States.</a> J Neurol Sci. 410, 116643(2020).</li>
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<li>Pitoulis, F. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remodelling+of+adult+cardiac+tissue+subjected+to+physiological+and+pathological+mechanical+load+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Remodelling of adult cardiac tissue subjected to physiological and pathological mechanical load in vitro.</a> Cardiovasc Res. 118 (3), 814-827 (2022).</li>
<li>Ma, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+cerebral+ischemia%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Animal models of cerebral ischemia: A review.</a> Biomed Pharmacother. 131, 110686(2020).</li>
<li>Belayev, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Docosanoids+promote+neurogenesis+and+angiogenesis%2C+blood-brain+barrier+integrity%2C+penumbra+protection%2C+and+neurobehavioral+recovery+after+experimental+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Docosanoids promote neurogenesis and angiogenesis, blood-brain barrier integrity, penumbra protection, and neurobehavioral recovery after experimental ischemic stroke.</a> Mol Neurobiol. 55 (8), 7090-7106 (2018).</li>
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</ol>

Das Modell des Verschlusses der mittleren Hirnarterie (MCAO), das durch eine monofile Nylonnaht induziert wird, ist die gebräuchlichste Methode zur Vorbereitung von MCAO-Modellen. Dieser Ansatz wird in präklinischen Studien häufig übernommen und hat aufgrund seiner Einfachheit, der fehlenden Notwendigkeit einer Kraniotomie, des minimalen chirurgischen Traumas und der Fähigkeit, eine Reperfusion zu erreichen, von vielen Praktikern Anerkennung gefunden.
Es gibt zwei klassische Operationstechnike...

Nach Angaben der Weltgesundheitsorganisation ist der Schlaganfall in den letzten zehn Jahren die zweithäufigste Todesursache weltweit geblieben, mit einer hohen Inzidenzrate, einer hohen Sterblichkeit und einer hohen Behinderungsrate 1,2. Mit der Alterung der Weltbevölkerung wird erwartet, dass die Inzidenz von Schlaganfällen in den Entwicklungsländern zunehmen wird und möglicherweise zur Hauptursache für vorzeitigen Tod und Behinderung bei Erwachsenen wird. Darüber hinaus gibt es einen Trend, dass Schlaganfälle in einem jüngeren Alter auftreten3 Jahre. Auch der Verlust der Erwerbsbevölkerung nach einem Schlaganfall stellt eine schwere Belastung für Familien und die Gesellschaftdar 4. Daher stellt die Entwicklung sicherer und wirksamer Therapien eine große Herausforderung in der Schlaganfallforschung dar.
Tiermodelle dienen als wichtige Werkzeuge für die Untersuchung der Prävention und Behandlung menschlicher Krankheiten. Die erfolgreiche Umsetzung von Schlaganfallbehandlungsstrategien hängt von der Reproduzierbarkeit und Zuverlässigkeit von Schlaganfall-Tiermodellen ab 5,6. Die mittlere Hirnarterie (MCA) ist eine häufige Stelle für klinische Schlaganfälle, was das MCAO-Modell zum Modell macht, das dem menschlichen ischämischen Schlaganfall am nächsten kommt. Das MCAO-Modell, das mit der Nahtmethode hergestellt wurde, wurde von Forschern aufgrund von Vorteilen wie dem Fehlen eines Kraniotomie und der einfachen Kontrolle der ischämischen Zeit bevorzugt. Es wurde in über 40 % der neuroprotektiven Experimente eingesetzt7. Trotz seiner zahlreichen Vorteile bleiben die operationellen Details dieses Modells für viele Forscher ein umstrittenes Thema.
Beim Modell des nahtinduzierten Verschlusses der mittleren Hirnarterie (MCAO) erfolgt die Reperfusion durch Zurückziehen der Naht. Derzeit werden zwei Hauptmethoden für das Einführen von Nähten verwendet: Koizumis Methode8 und die Methode9 von Longa. Bei der Koizumi-Methode tritt die Naht hauptsächlich durch den Schnitt der Arteria carotis communis (CCA) in die Arteria carotis interna (ICA) ein, während sie bei der Longa-Methode durch die durchtrennte Arteria carotis externa (ECA) in die ICA gelangt. Während der Reperfusion erfordert die Koizumi-Methode eine dauerhafte Ligatur der CCA-Inzision und stützt sich für die Reperfusion auf den Willis-Kreis10. Einige Studien deuten jedoch darauf hin, dass eine effektive Reperfusion nicht allein durch die kompensatorische Versorgung des Willis-Kreises nach Verlust der CCA-Versorgung erreicht werden kann. Darüber hinaus weist der Willis-Kreis eine hohe anatomische Variabilität auf, insbesondere bei C57Bl/6-Mäusen, was die Infarktvariabilität erhöht und die Zuverlässigkeit der experimentellen Daten verringert. Infolgedessen wurde diese Methode von Forschern zunehmend in Frage gestellt11.
Bei der Longa-Methode wird eine Naht durch die durchtrennte ECA eingeführt und dann die Arteria carotis interna (ICA) dauerhaft ligiert, sobald die Naht gezogen wird. Dadurch bleibt die CCA-Durchgängigkeit erhalten und eine Blutperfusion von bis zu 100 % der Ausgangswerte möglich. Bei dieser Methode müssen jedoch die Arteria carotis externa und die kleinen arteriellen Äste getrennt, abgeschnitten oder elektrokoaguliert werden, was den Eingriff zu einer Herausforderung macht. Es stört auch die gesamte Blutflussstruktur des Gehirns, die sich vom klinischen Zustand des Patienten unterscheidet12. Wichtig ist, dass Studien darauf hinweisen, dass das Schneiden oder Ligatieren der ECA ischämische Läsionen in den Muskeln verursachen kann, die das Kauen und Schlucken steuern, die Ernährung der Tiere beeinträchtigen und bei Ratten zum postoperativen Tod der Tiere und zu schweren sensorischen und motorischen Schäden führenkönnen 13,14.
Daher ist eine modifizierte Modellvorbereitungsmethode dringend erforderlich, um diese Probleme zu lösen. In dieser Studie wird eine modifizierte MCAO-Modellierungsmethode vorgestellt, die den CCA-Insertionsschnitt repariert und eine effektive Reperfusion erzielt. Das Verfahren ist einfach, praktisch und durchführbar, führt zu erheblichen neurologischen Schäden und replizierbaren Infarktläsionen und bietet Schlaganfallforschern eine wertvolle Orientierungshilfe.

<table><tbody><tr><td>Tieranästhesiesystem</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>R500IE</td><td></td></tr><tr><td>Tiertemperaturhalter</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>69020</td><td></td></tr><tr><td>Cy3 Sekundärantikörper</td><td>Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd</td><td>GB21303</td><td></td></tr><tr><td>DAP1 Antikörper</td><td>Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd</td><td>G1012</td><td></td></tr><tr><td>DCX Antikörper</td><td>Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd</td><td>GB13434</td><td></td></tr><tr><td>Ziegenserum</td><td>Beyotime Biotechnology Co., Ltd</td><td>C0265</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism</td><td>GraphPad Software</td><td>GraphPad Prism 8.0</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>National Institutes of Health</td><td>ImageJ Software</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>R510-22</td><td></td></tr><tr><td>Laser Speckle Blut Flow-Imaging-System</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>PeriCam PSI NR</td><td></td></tr><tr><td>MAP-2 Antikörper</td><td>Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd</td><td>GB11128</td><td></td></tr><tr><td>Miniatur-Handheld Schädelbohrer</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>87001</td><td></td></tr><tr><td>monofile Naht</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>250-280g</td><td></td></tr><tr><td>NeuN Antikörper</td><td>Wuhan Saiweier Biotechnology Co., Ltd</td><td>GB11138</td><td></td></tr><tr><td>OCT Einbettungsmittel</td><td>BIOSHARP</td><td>BL557A</td><td></td></tr><tr><td>Penicillin-Natrium</td><td>Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd.</td><td>17121709-2</td><td></td></tr><tr><td>Schnelle Antigen-Entnahmelösung für Frozen Sections</td><td>Beyotime Biotechnology Co., Ltd</td><td>P0090</td><td></td></tr><tr><td>SD Ratten</td><td>SPF ( Peking ) Biotechnology Co., Ltd.</td><td>250-280g</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Beyotime Biotechnology Co., LTD</td><td>ST795</td><td></td></tr><tr><td>TTC</td><td>Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd.</td><td></td><td></td>2019030101</tr></tbody></table>

eine modifizierte modellpräparation für die reperfusion des verschlusses der mittleren hirnarterie

A Modified Model Preparation for Middle Cerebral Artery Occlusion Reperfusion

Das Modell der Reperfusion des Verschlusses der mittleren Hirnarterie (MCAO/R) ist entscheidend für das Verständnis der pathologischen Mechanismen des Schlaganfalls und für die Entwicklung von Medikamenten. Unter den häufig verwendeten Modellierungsmethoden wird die Koizumi-Methode jedoch häufig unter die Lupe genommen, da sie die Halsschlagader (CCA) ligiert und nicht in der Lage ist, eine angemessene Reperfusion zu erreichen. In ähnlicher Weise wurde die Longa-Methode dafür kritisiert, dass sie die Arteria carotis externa (ECA) trennt und ligiert. Diese Studie zielt darauf ab, eine modifizierte Modellvorbereitungsmethode einzuführen, die die Integrität der ECA bewahrt, das Einführen einer monofilen Nylonnaht durch die CCA, die Reparatur des ligierten CCA-Schnitts und die Aufrechterhaltung der Reperfusion aus der CCA beinhaltet. Die Reperfusion des Blutflusses wurde mit Hilfe der Laser-Speckle-Flow-Bildgebung bestätigt. Bewertungsmethoden wie die Longa-Skala, der Modified Neurological Severity Score, die Färbung von Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC) und die Immunfluoreszenzmarkierung von Neuronen zeigten, dass dieser Ansatz eine stabile Schädigung des ischämischen Nervs induzieren kann. Dieses modifizierte MCAO/R-Modellprotokoll ist einfach und stabil und bietet Praktikern eine wertvolle Orientierungshilfe auf dem Gebiet der zerebralen Ischämie.

Die Laser-Speckle-Flow-Bildgebung zeigte, dass vor dem Verschluss der monofilen Nylonnaht ein reichlicher Blutfluss im Bereich der mittleren Hirnarterie (MCA) vorhanden war, und die Ausgangswerte des Blutflusses der Ratten wurden aufgezeichnet. Nach dem Verschluss des MCA nahm der Blutflusswert auf der ischämischen Seite des Gehirns rapide ab. Vor dem Ziehen der Naht wurden die Blutflusswerte auf der ischämischen Seite erneut überprüft, um zu bestätigen, ob die Naht das MCA verschließt. Die Ergebnisse zeigten nur eine ge...

Dieses Protokoll beschreibt den Prozess der Vorbereitung auf die Reperfusion des Verschlusses der mittleren Hirnarterie über die Arteria carotis communis.

Eine modifizierte Modellpräparation für die Reperfusion des Verschlusses der mittleren Hirnarterie

The middle cerebral artery occlusion reperfusion (MCAO/R) model is crucial for understanding the pathological mechanisms of stroke and for drug ...

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Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Filamentous Verschluss der mittleren Hirnarterie ist ein gemeinsames Modell für die Untersuchung einen ischämischen Schlaganfall bei Mäusen.

Modeling Stroke in Mice - Middle Zerebralarterie mit dem Filament-Modell

Hier präsentieren wir ein Protokoll permanent distalen mittleren Hirnarterie bei älteren weiblichen Ratten bei gleichzeitiger Verschluss der Halsschlagadern zu produzieren große kortikale Infarkte und anhaltende Defizite zu erzeugen. Wir zeigen die Bestätigung der Größe der Läsion mit strukturellen MRT bei 24 Stunden und 8 Wochen nach dem Schlaganfall.

Darstellende Permanent Distal cerebri mit Arteria carotis communis Occlusion bei alten Ratten zu studieren kortikale Ischämie mit anhaltenden Behinderungs

Um die Pathophysiologie des Schlaganfalls zu verstehen, ist es wichtig, zuverlässige Modelle zu verwenden. Dieses Papier wird eine der am häufigsten verwendeten Taktmodelle bei Mäusen beschreiben, die Arteria cerebri media Okklusion (MCAo) Modell genannt (auch bezeichnet als die intraluminale Faden oder Naht Modell) mit Reperfusion.

Chirurgische Ansatz für Arteria cerebri media Occlusion und Reperfusion fokaler zerebraler Ischämie bei Mäusen

Wir beschreiben ein Mausmodell für einen Schlaganfall, der durch den Verschluss der mittleren Hirnarterie mit einer silikonbeschichteten Naht induziert wird. Das Protokoll kann angewendet werden, um einen dauerhaften Verschluss oder eine vorübergehende Ischämie mit anschließender Reperfusion zu induzieren.

Die Induktion von ischämischem Schlaganfall und Ischämie-Reperfusion bei Mäusen die Mittel Artery Occlusion Technik und Visualisierung von Infarktbereich verwenden

Neonataler Schlaganfall ist eine signifikante Ursache für frühe Hirnverletzungen, die ein translationales Modell mit konsistenten fokalen Verletzungsmustern und hoher Reproduzierbarkeit erfordern, um eine Studie zu ermöglichen. Diese Studie beschreibt das detaillierte chirurgische Verfahren zur Schaffung einer nicht-hämorrhagischen, einseitigen fokalen Ischämie-Reperfusionsverletzung bei langzeitäquivalenten Nagetieren.

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Modell von Neugeborenen Stroke in P10 Ratten

Intraluminal Filament Okklusion der mittleren zerebralen Arterie ist das am häufigsten verwendete in Vivo Modell der experimentellen Schlaganfall bei Nagetieren. Ein alternativer chirurgischer Ansatz ermöglichen gemeinsame Halsschlagader Reparatur erfolgt hier, wodurch der Reperfusion der gemeinsame Halsschlagader und eine vollständige Reperfusion auf das mittlere zerebrale Arterie-Gebiet.

Mittlere zerebrale Arterie Okklusion so dass Reperfusion über gemeinsame Halsschlagader Reparatur bei Mäusen

Ein Maus-Modell der zerebralen Ischämie-Reperfusion wird gegründet, um die Pathophysiologie des Schlaganfalls zu untersuchen. Wir nach distal verbinden rechts mittlere zerebrale Arterie und rechts gemeinsame Halsschlagader und Blutfluss nach 10 oder 40 min der Ischämie wiederherstellen.

Zwei-Schiff Okklusion Mausmodell der zerebralen Ischämie-reperfusion

Dieses Protokoll demonstriert ein einzigartiges Mausschlagmodell mit einem mittelgroßen Infarkt und einer ausgezeichneten Überlebensrate. Dieses Modell ermöglicht es präklinischen Schlaganfallforschern, die Dauer der Ischämie zu verlängern, gealterte Mäuse zu verwenden und langfristige funktionelle Ergebnisse zu bewerten.

Ein modifiziertes transkranielles Modell für den Verschluss der mittleren Hirnarterie zur Untersuchung von Schlaganfallergebnissen bei gealterten Mäusen

Dieses Protokoll beschreibt das Modell der transienten fokalen zerebralen Ischämie bei Mäusen durch intraluminalen Verschluss der mittleren Hirnarterie. Darüber hinaus werden Beispiele für die Ergebnisbewertung mit Hilfe von Magnetresonanztomographie und Verhaltenstests gezeigt.

Transienter mittlerer Hirnarterienverschluss Modell des Schlaganfalls

Das aktuelle Protokoll beschreibt ein Rattenmodell des Verschlusses/der Reperfusion der mittleren Hirnarterien, das die anatomische Struktur der Hirngefäße bewahrt, ohne Schäden zu verursachen.

Ein Rattenmodell für den Verschluss/die Reperfusion der mittleren Hirnarterie ohne Beschädigung der anatomischen Struktur der Hirngefäße

Dieses Protokoll stellt eine Schritt-für-Schritt-Anleitung für Forscher dar, um den Verschluss der mittleren Hirnarterie an Mäusen mit der modifizierten Longa-Methode der Arteria carotis externa durchzuführen. Die in diesem Artikel vorgestellten Modifikationen zielen darauf ab, die Genauigkeit des Verschlusses der mittleren Hirnarterie zu erhöhen und eine vollständige Reperfusion zu gewährleisten.

Optimierung der Methode des Verschlusses der Arteria cerebralis longa für eine vollständige Reperfusion

Erfahren Sie eine modifizierte Präparation für die Reperfusion nach Verschluss der mittleren Hirnarterie über die Arteria carotis communis. Diese Methode vereinfacht den komplexen Eingriff und erleichtert die Erforschung von Hirnischämie und neuroprotektiven Wirkstoffen.

Eine modifizierte Modellpräparation für die Reperfusion des Verschlusses der mittleren Hirnarterie

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