Chronischer sozialer Niederlagenstress bei männlichen Mäusen im frühen Jugendalter

Unsere Forschung zielt darauf ab, Anomalien auf Schaltkreisebene zu identifizieren, die aus der Traumaexposition in verschiedenen Stadien der neurologischen Entwicklung resultieren. Wir haben ein Modell für frühe körperliche Traumata bei Jugendlichen entwickelt, um die Auswirkungen von Kindheitstraumata auf die Gehirnfunktion von Erwachsenen besser zu verstehen. Verhaltensmediziner sehen eine Zunahme von Patienten, die unter den dauerhaften Auswirkungen von Kindesmissbrauch leiden. Die meisten aktuellen Nagetierforschungen konzentrieren sich jedoch auf die Exposition gegenüber Traumata im Erwachsenenalter oder die Auswirkungen der Vernachlässigung von Säuglingen.

Keines dieser Probleme geht direkt auf die einzigartigen Herausforderungen ein, die bei Erwachsenen mit einer Vorgeschichte von Missbrauch in der Kindheit zu beobachten sind. Unser Protokoll führt bei über zwei Dritteln der besiegten Tiere im Erwachsenenalter zu einem konsistenten vermeidenden Phänotyp. Darüber hinaus ist unser Protokoll durch die Verwendung jüngerer Männchen ohne Zuchterfahrung mit Weibchen in der Lage, robust aggressive CFW-Männchen zu produzieren, ohne dass zusätzliche adulte B6-Mäuse verwendet werden müssen, um Aggressionen zu schüren, was die Leichtigkeit und Gründlichkeit des Protokolls erhöht.

Unsere Forschung wird dazu beitragen, das Verständnis dafür zu erweitern, wie die Exposition gegenüber Traumata in verschiedenen Entwicklungsstadien einen einzigartigen biologischen, verhaltensbezogenen und anatomischen Einfluss auf das Gehirn hat, und hoffentlich bei der Entwicklung neuer Behandlungstechnologien für Menschen helfen, die Missbrauch in der Kindheit erlebt haben. Zu Beginn sollten Sie eine Woche lang CFW-Männchen mit CFW-OVX-Hündinnen paaren, um sexuelle Erfahrungen zu ermöglichen und die territoriale Aggression des Männchens zu erhöhen. Nach einer Woche nehmen Sie das CFW OVX-Weibchen aus dem Käfig und setzen Sie es in einen sauberen, leeren Käfig.

Führen Sie dann den Stimulus-C57-Rüden für eine Minute in den Käfig mit dem CFW-Männchen ein und zeichnen Sie die Latenz der Attacke auf. Entfernen Sie anschließend den Stimulus C 57-Männchen und setzen Sie das CFW-OVX-Weibchen wieder in den Käfig mit dem CFW-Männchen, bevor Sie es in den Haltungsraum zurückbringen Gruppenhaus CFW-Männchen, die entweder nicht angreifen oder an zwei oder mehr Tagen eine Angriffslatenz von mehr als 30 Sekunden zeigen. Verwenden Sie diese nicht-aggressiven CFW-Männchen als Stimulustiere bei Tests der sozialen Interaktion im Freiland.

Wenn jugendliche C57-Männchen vier Wochen alt sind, wiegen Sie jedes Tier und notieren Sie das Gewicht. Teilen Sie die Tiere in zwei gleiche Kohorten auf, kontrollieren und besiegen, und stellen Sie sicher, dass sich die Gewichte zwischen den beiden Kohorten nicht signifikant unterscheiden. Beherbergen Sie einen Kontrolljugendlichen C57 auf der einen Seite einer Plexiglastrennwand und einen anderen Kontrolljugendlichen C57 auf der anderen Seite der Trennwand.

Im 11. Tageshaus stand jeder Kontrolljugendliche neben einem anderen Kontrolljugendlichen mit einer Plexiglastrennwand zwischen den beiden für den Rest des Experiments. Wiegen und notieren Sie das Gewicht des jugendlichen C57, der besiegt werden soll. Wunden mit einem Durchmesser von mehr als vier Millimetern, die hier maßstabsgetreu gezeigt werden, erfordern eine sofortige Euthanasie des Versuchstieres.

Nehmen Sie dann das CFW-OVX-Weibchen aus dem Käfig mit dem ansässigen CFW-Rüden und setzen Sie es mit anderen OVX-Hündinnen unter. Führen Sie anschließend den Jugendlichen C 57 in den Käfig des ansässigen CFW-Männchens ein und starten Sie die Stoppuhr. Nehmen Sie den Jugendlichen nach 30 Bissen oder fünf Minuten aus dem Käfig, je nachdem, was zuerst eintritt, und notieren Sie die Angriffsdaten.

Platzieren Sie dann die Plexiglastrennwand in der Mitte des Käfigs des männlichen CFW-Bewohners und stellen Sie sicher, dass der CFW-Bewohner auf der einen Seite und der besiegte Jugendliche auf der anderen Seite ist. Am 11. Tag beherbergen Sie die besiegten Jugendlichen neben anderen besiegten Jugendlichen für die Dauer des Experiments mit einer Plexiglastrennwand zwischen ihnen. Gewöhnen Sie die Kontrolle und besiegte Tiere für eine Stunde in den Untersuchungsraum.

Zeichnen Sie alle Sitzungen mit einer Tierverfolgungssoftware auf. Platzieren Sie den Drahtbecher an der linken Wand der 44 x 44 x 44 Zentimeter großen Acrylarena in der Mitte der Wand. Zeichnen Sie eine zwei Zentimeter große kreisförmige Wechselwirkungszone um die Tasse.

Lege nun den C 57 mit einem leeren Drahtbecher für 150 Sekunden in die Ecke der Arena. Nehmen Sie dann den C 57 aus der Arena und stellen Sie ihn in einen sauberen, leeren Käfig. Setze einen nicht aggressiven, unbekannten erwachsenen CFW-Mann in den Drahtbecher und platziere den Drahtbecher in der Arena.

Bringen Sie den C 57 mit dem CFW-Drahtbecher für 150 Sekunden wieder in die Arena. Nachdem Sie beide Tiere in ihre jeweiligen Käfige zurückgebracht haben, reinigen Sie den Reitplatz mit Wasser und 70 % Ethanol, um alle Bereiche mit Urin oder Kot zu reinigen, bevor Sie den nächsten C 57 testen. Berechnen Sie die Zeitspanne, die sich ein Körperpunkt innerhalb der Interaktionszone befindet, sowohl für die Sitzung mit dem leeren Becher als auch für die Sitzung mit dem CFW-Becher, der den Becher enthält.

Teilen Sie die Zeit, die Sie in der Interaktionszone mit dem CFW-haltigen Becher verbringen, durch die Zeit, die Sie in der Interaktionszone mit dem leeren Becher verbringen, um das soziale Interaktionsverhältnis zu erzeugen. Führen Sie die soziale Interaktion auf dem offenen Feld jederzeit nach der 10-tägigen Niederlagenperiode durch, abhängig vom Entwicklungsfenster von Interesse. Besiegte Tiere zeigten eine signifikante Verringerung sowohl des sozialen Interaktionsverhältnisses als auch der rohen sozialen Interaktionszeit im Vergleich zu Kontrollen zu allen getesteten Zeitpunkten.

Die ausgeprägteste Verkürzung des Verhältnisses der sozialen Interaktion und der Zeit trat zwei Wochen nach der Niederlage auf, wobei besiegte Tiere mehr Zeit mit einem leeren Becher verbrachten. Heatmaps bestätigten, dass besiegte Mäuse über alle Zeitpunkte hinweg mehr Zeit in den Ecken und weniger Zeit in der Interaktionszone verbrachten.