Name: Quantifizierung der Modulation der Elastase-Enzymaktivität durch kolorimetrische Analyse (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 30 s
Description: Lernen Sie eine kolorimetrische Methode zur Quantifizierung der Elastase-Aktivität für biochemische Forschung. Dieses empfindliche Verfahren ermöglicht die schnelle Analyse natürlicher Pflanzenextrakte trotz starker Färbung.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Messung der Elastase-Modulation: Ein kolorimetrischer Assay für therapeutische Erkenntnisse

<ol><li>Imokawa, G., Ishida, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+mechanisms+underlying+the+ultraviolet+radiation-induced+formation+of+skin+wrinkling+and+sagging+I%3A+Reduced+skin+elasticity%2C+highly+associated+with+enhanced+dermal+elastase+activity%2C+triggers+wrinkling+and+sagging%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Biological mechanisms underlying the ultraviolet radiation-induced formation of skin wrinkling and sagging I: Reduced skin elasticity, highly associated with enhanced dermal elastase activity, triggers wrinkling and sagging.</a> Int J Mol Sci. 16 (4), 7753-7775 (2015).</li>
<li>Voynow, J. A., Shinbashi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+elastase+and+chronic+lung+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Biomolecules%22%5BJournal%5D)">Neutrophil elastase and chronic lung disease.</a> Biomolecules. 11 (8), 11081065(2021).</li>
<li>Whitcomb, D. C., Lowe, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+pancreatic+digestive+enzymes%5BTitle%5D)+AND+%22Dig+Dis+Sci%22%5BJournal%5D)">Human pancreatic digestive enzymes.</a> Dig Dis Sci. 52 (1), 1-17 (2007).</li>
<li>Heinz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elastic+fibers+during+aging+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Ageing+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">Elastic fibers during aging and disease.</a> Ageing Res Rev. 66, 101255(2021).</li>
<li>Antonicelli, F., Bellon, G., Debelle, L., Hornebeck, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elastin-elastases+and+inflamm-aging%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Top+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Elastin-elastases and inflamm-aging.</a> Curr Top Dev Biol. 79, 99-155 (2007).</li>
<li>Desmiaty, Y., Faizatun, F., Noviani, Y., Ratih, H., Ambarwati, N. S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+of+natural+products+in+inhibiting+premature+skin+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Appl+Pharm%22%5BJournal%5D)">Potential of natural products in inhibiting premature skin aging.</a> Int J Appl Pharm. 14 (Special Issue 3), 1-5 (2022).</li>
<li>Bhatiya, M., Pathak, S., Jothimani, G., Duttaroy, A. K., Banerjee, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comprehensive+study+on+the+anti-cancer+effects+of+quercetin+and+its+epigenetic+modifications+in+arresting+progression+of+colon+cancer+cell+proliferation%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Immunol+Ther+Exp+%28Warsz%29%22%5BJournal%5D)">A comprehensive study on the anti-cancer effects of quercetin and its epigenetic modifications in arresting progression of colon cancer cell proliferation.</a> Arch Immunol Ther Exp (Warsz). 71 (1), 6(2023).</li>
<li>Shen, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computational+analysis+of+curcumin-mediated+alleviation+of+inflammation+in+periodontitis+patients+with+experimental+validation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Periodontol%22%5BJournal%5D)">Computational analysis of curcumin-mediated alleviation of inflammation in periodontitis patients with experimental validation in mice.</a> J Clin Periodontol. 51 (6), 787-799 (2024).</li>
<li>Yücel, Ç, Karatoprak, G. Ş, Yalçıntaş, S., Böncü, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethosomal+%28%E2%88%92%29-epigallocatechin-3-gallate+as+a+novel+approach+to+enhance+antioxidant%2C+anti-collagenase+and+anti-elastase+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Beilstein+J+Nanotechnol%22%5BJournal%5D)">Ethosomal (−)-epigallocatechin-3-gallate as a novel approach to enhance antioxidant, anti-collagenase and anti-elastase effects.</a> Beilstein J Nanotechnol. 13, 491-502 (2022).</li>
<li>Wojtkiewicz, A. M., Oleksy, G., Malinowska, M. A., Janeczko, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enzymatic+synthesis+of+a+skin+active+ingredient+-+glochidone+by+3-ketosteroid+dehydrogenase+from+Sterolibacterium+denitrificans%5BTitle%5D)+AND+%22J+Steroid+Biochem+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Enzymatic synthesis of a skin active ingredient - glochidone by 3-ketosteroid dehydrogenase from Sterolibacterium denitrificans.</a> J Steroid Biochem Mol Biol. 241, 106513(2024).</li>
<li>Amnuaykan, P., Juntrapirom, S., Kanjanakawinkul, W., Chaiyana, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+antioxidant%2C+anti-aging%2C+anti-tyrosinase%2C+and+anti-inflammatory+properties+of+Vanda+coerulea+griff.+ex+lindl.+protocorm+through+elicitations+with+chitosan%5BTitle%5D)+AND+%22Plants%22%5BJournal%5D)">Enhanced antioxidant, anti-aging, anti-tyrosinase, and anti-inflammatory properties of Vanda coerulea griff. ex lindl. protocorm through elicitations with chitosan.</a> Plants. 13 (13), 13131770(2024).</li>
<li>Petcharaporn, K., Thongkao, K., Thongmuang, P., Sudjaroen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nutritional+composition%2C+capsaicin+content+and+enzyme+inhibitory+activities+from+%26%2334%3BBang+Chang%26%2334%3B+thai+cultivar+chili+pepper+%28capsicum+annuum+var.+acuminatum%29+after+drying+process%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm+Qual+Assur%22%5BJournal%5D)">Nutritional composition, capsaicin content and enzyme inhibitory activities from &#34;Bang Chang&#34; thai cultivar chili pepper (capsicum annuum var. acuminatum) after drying process.</a> Int J Pharm Qual Assur. 14 (3), 707-711 (2023).</li>
<li>Jeon, D. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antioxidant+activity+and+inhibitory+effects+of+whitening+and+wrinkle-related+enzymes+of+Polyozellus+multiplex+extracts%5BTitle%5D)+AND+%22J+Food+Meas+Charact%22%5BJournal%5D)">Antioxidant activity and inhibitory effects of whitening and wrinkle-related enzymes of Polyozellus multiplex extracts.</a> J Food Meas Charact. 17 (2), 1279-1288 (2023).</li>
<li>Putri, I. R., Handayani, R., Elya, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-elastase+activity+of+rumput+teki+%28Cyperus+rotundus+L.%29+rhizome+extract%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacogn+J%22%5BJournal%5D)">Anti-elastase activity of rumput teki (Cyperus rotundus L.) rhizome extract.</a> Pharmacogn J. 11 (4), 754-758 (2019).</li>
<li>Liyanaarachchi, G. D., Samarasekera, J. K. R. R., Mahanama, K. R. R., Hemalal, K. D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tyrosinase%2C+elastase%2C+hyaluronidase%2C+inhibitory+and+antioxidant+activity+of+Sri+Lankan+medicinal+plants+for+novel+cosmeceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Ind+Crops+Prod%22%5BJournal%5D)">Tyrosinase, elastase, hyaluronidase, inhibitory and antioxidant activity of Sri Lankan medicinal plants for novel cosmeceuticals.</a> Ind Crops Prod. 111, 597-605 (2018).</li>
<li>Apraj, V. D., Pandita, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+skin+anti-aging+potential+of+Citrus+reticulata+blanco+peel%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacogn+Res%22%5BJournal%5D)">Evaluation of skin anti-aging potential of Citrus reticulata blanco peel.</a> Pharmacogn Res. 8 (3), 160-168 (2016).</li>
<li>Pandey, B. P., Pradhan, S. P., Adhikari, K., Nepal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bergenia+pacumbis+from+Nepal%2C+an+astonishing+enzymes+inhibitor%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Complement+Med+Ther%22%5BJournal%5D)">Bergenia pacumbis from Nepal, an astonishing enzymes inhibitor.</a> BMC Complement Med Ther. 20 (1), 198(2020).</li>
<li>Dharwal, V., Sandhir, R., Naura, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PARP-1+inhibition+provides+protection+against+elastase-induced+emphysema+by+mitigating+the+expression+of+matrix+metalloproteinases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">PARP-1 inhibition provides protection against elastase-induced emphysema by mitigating the expression of matrix metalloproteinases.</a> Mol Cell Biochem. 457 (1-2), 41-49 (2019).</li>
<li>Jugniot, N., Voisin, P., Bentaher, A., Mellet, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+elastase+activity+imaging%3A+Recent+approaches+in+the+design+and+applications+of+activity-based+probes+and+substrate-based+probes%5BTitle%5D)+AND+%22Contrast+Media+Mol+Imaging%22%5BJournal%5D)">Neutrophil elastase activity imaging: Recent approaches in the design and applications of activity-based probes and substrate-based probes.</a> Contrast Media Mol Imaging. 2019, (2019).</li>
<li>Stone, P. J., Morris, S. M., Thomas, K. M., Schuhwerk, K., Mitchelson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repair+of+elastase-digested+elastic+fibers+in+acellular+matrices+by+replating+with+neonatal+rat-lung+lipid+interstitial+fibroblasts+or+other+elastogenic+cell+types%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Repair of elastase-digested elastic fibers in acellular matrices by replating with neonatal rat-lung lipid interstitial fibroblasts or other elastogenic cell types.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 17 (3), 289-301 (1997).</li>
<li>Weiss, F. U., Budde, C., Lerch, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specificity+of+a+polyclonal+fecal+elastase+ELISA+for+CELA3%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Specificity of a polyclonal fecal elastase ELISA for CELA3.</a> PLoS ONE. 11 (7), 0159363(2016).</li>
<li>Thring, T. S. A., Hili, P., Naughton, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-collagenase%2C+anti-elastase+and+anti-oxidant+activities+of+extracts+from+21+plants%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Complement+Altern+Med%22%5BJournal%5D)">Anti-collagenase, anti-elastase and anti-oxidant activities of extracts from 21 plants.</a> BMC Complement Altern Med. 9 (1), 27(2009).</li>
<li>Donà, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil+restraint+by+green+tea%3A+Inhibition+of+inflammation%2C+associated+angiogenesis%2C+and+pulmonary+fibrosis+1%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Neutrophil restraint by green tea: Inhibition of inflammation, associated angiogenesis, and pulmonary fibrosis 1.</a> J Immunol. 170, 4335-4341 (2003).</li>
<li>Michailidis, D., Angelis, A., Nikolaou, P. E., Mitakou, S., Skaltsounis, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploitation+of+vitis+vinifera%2C+foeniculum+vulgare%2C+cannabis+sativa+and+punica+granatum+by-product+seeds+as+dermo-cosmetic+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Exploitation of vitis vinifera, foeniculum vulgare, cannabis sativa and punica granatum by-product seeds as dermo-cosmetic agents.</a> Molecules. 26 (3), 26030731(2021).</li>
<li>Suzuki, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Curcumin+attenuates+elastase-+and+cigarette+smoke-induced+pulmonary+emphysema+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Curcumin attenuates elastase- and cigarette smoke-induced pulmonary emphysema in mice.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 296 (4), L614-L623 (2009).</li>
<li>Brás, N. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+pancreatic+elastase+by+polyphenolic+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22J+Agric+Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Inhibition of pancreatic elastase by polyphenolic compounds.</a> J Agric Food Chem. 58 (19), 10668-10676 (2010).</li>
<li>Álvarez-Martínez, F. J., Díaz-Puertas, R., Barrajón-Catalán, E., Micol, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plant-derived+natural+products+for+the+treatment+of+bacterial+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Handbook+of+Experimental+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Plant-derived natural products for the treatment of bacterial infections.</a> Handbook of Experimental Pharmacology. , (2024).</li>
<li>Álvarez-Martínez, F. J., Barrajón-Catalán, E., Herranz-López, M., Micol, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibacterial+plant+compounds%2C+extracts+and+essential+oils%3A+An+updated+review+on+their+effects+and+putative+mechanisms+of+action%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">Antibacterial plant compounds, extracts and essential oils: An updated review on their effects and putative mechanisms of action.</a> Phytomedicine. 90, 153626(2021).</li>
<li>Saganuwan, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+modified+Michaelis-Menten+equations+for+determination+of+enzyme+inducing+and+inhibiting+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Pharmacol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Application of modified Michaelis-Menten equations for determination of enzyme inducing and inhibiting drugs.</a> BMC Pharmacol Toxicol. 22 (1), 57(2021).</li>
<li>AlShaikh-Mubarak, G. A., Kotb, E., Alabdalall, A. H., Aldayel, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+survey+of+elastase-producing+bacteria+and+characteristics+of+the+most+potent+producer%2C+Priestia+megaterium+gasm32%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">A survey of elastase-producing bacteria and characteristics of the most potent producer, Priestia megaterium gasm32.</a> PLoS ONE. 18, 0282963(2023).</li>
<li>Sánchez-Moreiras, A. M., Reigosa, M. J. Advances in plant ecophysiology techniques. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aS%C3%A1nchez-Moreiras%2C+AM+%22Adv+Plant+Ecophysiol+Tech%22">Adv Plant Ecophysiol Tech</a>. , Springer International Publishing. (2018).</li>
<li>Dharwal, V., Sandhir, R., Naura, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PARP-1+inhibition+provides+protection+against+elastase-induced+emphysema+by+mitigating+the+expression+of+matrix+metalloproteinases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">PARP-1 inhibition provides protection against elastase-induced emphysema by mitigating the expression of matrix metalloproteinases.</a> Mol Cell Biochem. 457 (1-2), 41-49 (2019).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+molecular+probes+for+in+vivo+near-infrared+fluorescence%2Fphotoacoustic+duplex+imaging+of+human+neutrophil+elastase%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Engineering molecular probes for in vivo near-infrared fluorescence/photoacoustic duplex imaging of human neutrophil elastase.</a> Anal Chem. 94 (7), 3227-3234 (2022).</li>
<li>Ahn, C. M., Sandler, H., Saldeen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+lung+hyaluronan+in+a+model+of+ARDS+in+the+rat%3A+Effect+of+an+inhibitor+of+leukocyte+elastase%5BTitle%5D)+AND+%22Ups+J+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Decreased lung hyaluronan in a model of ARDS in the rat: Effect of an inhibitor of leukocyte elastase.</a> Ups J Med Sci. 117 (1), 1-9 (2012).</li>
<li>Vanga, R. R., Tansel, A., Sidiq, S., El-Serag, H. B., Othman, M. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+performance+of+measurement+of+fecal+elastase-1+in+detection+of+exocrine+pancreatic+insufficiency%3A+Systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Diagnostic performance of measurement of fecal elastase-1 in detection of exocrine pancreatic insufficiency: Systematic review and meta-analysis.</a> Clin Gastroenterol Hepatol. 16 (8), 1220-1228 (2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>96-Well-Zellkulturplatte</td><td>Corning Incorporated</td><td>3599</td><td>Flacher Boden mit Deckel, Polystyrol</td></tr><tr><td>Cell Imaging Multimode Reader</td><td>Agilent</td><td>BioTek Cytation 1</td><td>Verwendet mit Gen5-Software</td></tr><tr><td>Elastase aus der Bauchspeicheldrüse des Schweins</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E7885</td><td>CAS 39445-21-1; 25,9 kDa</td></tr><tr><td>Isopropanol 99,5%</td><td>Fisher</td><td>Scientific AC184130010</td><td>CAS 67-63-0; C3H8O; 60,10 g/mol</td></tr><tr><td>N-Succinil-(Ala)3-nitroanilid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S4760</td><td>CAS 52299-14-6; C19H25N5O8 ; 451,43 g/mol</td></tr><tr><td>pH-Messgerät</td><td>Hach Lange</td><td>sensION+ PH31</td><td>Mit Magnetrührer und Sensorhalter</td></tr><tr><td>Phenylmethansulfonylfluorid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P7626</td><td>CAS 329-98-6; C7H7FO2S; 174,19 g/mol</td></tr><tr><td>Tris für die Molekularbiologie</td><td>PanReac AppliChem</td><td>A2264</td><td>CAS 77-86-1; C4H11NO3; 121,14 g/mol</td></tr></tbody></table>

quantifizierung der modulation der elastase-enzymaktivität durch kolorimetrische analyse

Quantifying the Modulation of Elastase Enzyme Activity Through Colorimetric Analysis

Sobald das Protokoll abgeschlossen ist, können die Absorptionsdaten erhalten werden, die erforderlich sind, um die entsprechenden Berechnungen durchzuführen und die Kapazität der Proben zur Modulation der Elastaseaktivität zu quantifizieren. Abbildung 3 zeigt die Lage der Bohrlöcher mit den verschiedenen Kontrollen und Proben. Im Falle von farbigen Proben, wie der in diesem Beispiel verwendeten, ist es notwendig, Farbsteuerungen hinzuzufügen, um spektrophotometrische Interferenzen zu minimie...

Quantifizierung der Modulation der Elastase-Enzymaktivität durch kolorimetrische Analyse

Elastase, a serine protease, plays an essential role in elastin degradation. Elastin is an extracellular protein that helps maintain tissue elasticity in ...

quantifying-modulation-elastase-enzyme-activity-through-colorimetric

Research

Forschung

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemie

Die Protease Fluorescent Detection Kit ist für die Messung der Protease-Aktivität mit Fluorometrie konzipiert. Es eignet sich auch zum Nachweis von Spuren von Protease-Kontamination. Die Methode basiert auf der proteolytischen hydroysis von einer proprietären Rezeptur eines FITC-markiertem Casein Substrat.

Die Nutzung der Protease Fluorescent Detection Kit für Protease-Aktivität zu bestimmen

Ein Protokoll, um Trichothecene (Mykotoxine, die für die menschliche Gesundheit) mit einem neu entwickelten Screening-Methode auf einem wettbewerbsfähigen immunchemischen Verfahren und eine endgültige elektrochemischer Detektion basierte Erkennung demonstriert.

ELIME (Enzyme Linked Immuno Magnetic Elektrochemische) Verfahren zur Mykotoxin-Erkennung

In diesem Video führen wir Zymographie durch, eine elektrophoretische Technik, um die proteolytische Aktivität in biologischen Proben zu analysieren.

Fluoreszierende Peptid-Zymographie: Eine modifizierte Technik zum Nachweis der Proteaseaktivität unter Verwendung fluorogener Substrate in Zymogramm-Gelen

Dieses Video zeigt einen in vitro Assay zur Quantifizierung der Serinproteaseaktivität von Neutrophilen in Sputumproben. Die Probe, die sezernierte Protease enthält, wird mit einem fluoreszierenden Reporter inkubiert, der ein Erkennungsmotiv trägt. Die Spaltung des Motivs durch die Protease ermöglicht eine individuelle Fluoreszenzemission durch das Donor- und Akzeptorfluorophor des Reporters, was auf die Proteaseaktivität in der Probe hinweist.

Ein In-vitro-Assay zur Messung der Serinproteaseaktivität von Neutrophilen unter Verwendung eines fluoreszierenden Reporters

Dieses Video zeigt den Farbstofffreisetzungsassay zur Quantifizierung der enzymatischen Aktivität von antimikrobiellen Proteinen. Das antimikrobielle Protein baut die farbstoffmarkierte Zellwand der Bakterien ab und setzt die Farbstoffmoleküle frei, wodurch die Lösung blau wird. Die Absorption der Lösung korreliert mit der enzymatischen Aktivität des antimikrobiellen Proteins.

Ein Farbstofffreisetzungsassay zur Quantifizierung der enzymatischen Aktivität von antimikrobiellen Proteinen

Wir beschreiben einen einfachen, quantitativen kolorimetrischen Assay, der speziell die proteolytische Aktivität von Granzym B (GzmB) bei Mensch, Maus oder Ratte misst. Dieses Protokoll kann leicht angepasst werden, um die Proteaseaktivität anderer granulierter Serinproteasen durch die Hydrolyse anderer synthetischer Peptidsubstrate mit einer geeigneten Erkennungssequenz zu bestimmen.

Ein Farbtest, die speziell Maßnahmen Granzyme B Proteolytische Aktivität: Hydrolyse von Boc-Ala-Ala-Asp-S-Bzl

Hier präsentieren wir Protokolle zum schnellen Screening und zur Charakterisierung von Enzymen auf antimikrobielle Aktivität. Der Mikroschiebe-Diffusionsassay und der Farbstofffreisetzungsassay verwenden bakterielle Zielsubstrate für die qualitative und quantitative Bewertung der enzymatischen Aktivität.

Qualitative und quantitative Assays zur Detektion und Charakterisierung von Protein Antimikrobielle

Hier präsentieren wir Ihnen ein detailliertes Protokoll für eine modifizierte Zymographic-Technik in der fluoreszierenden Peptide als abbaubare Substrat anstelle von native Proteine verwendet werden. Elektrophorese von biologischen Proben in fluoreszierenden Peptid-Zymogramme ermöglicht die Detektion eines breiteren Spektrums von Proteasen als frühere Zymographic Techniken.

Erkennung von Protease-Aktivität durch fluoreszierende Peptid Zymography

Die hier beschriebenen Protokolle bieten einen Leitfaden zur Visualisierung und Quantifizierung der Aktivität von Neutrophilenproteasen im menschlichen Sputum. Die Anwendungen einer solchen Analyse reichen von der Bewertung entzündungshemmender Behandlungen über die Validierung von Biomarkern, das Screening von Medikamenten bis hin zu klinischen Studien mit großen Kohorten.

Überwachung der NeutrophilenElastase- und Cathepsin-G-Aktivität in menschlichen Sputumproben

In dieser Arbeit werden standardisierte ökotoxikologische Methoden zur Bewertung von Biomarkern in neotropischen Anura-Arten vorgestellt. Insbesondere werden in diesem Artikel verschiedene Methoden auf verschiedenen Ebenen der ökotoxikologischen Bewertung beschrieben, wie z. B. auf genetischer, zellulär-histologischer, biochemischer, morphologischer und individueller Ebene.

Ökotoxikologische Methoden zur Bewertung von Biomarkern auf verschiedenen Skalen in neotropischen Anuren

In dieser Studie wird ein einfacher, benutzerfreundlicher ratiometrischer FRET-Assay für den Nachweis und die quantitative Beurteilung der DNase-Aktivität vorgestellt und seine Anwendung bei der Analyse einer schwachen Nuklease demonstriert.

Beurteilung der DNase-Aktivität durch ratiometrischen Fluoreszenz-Resonanz-Energietransfer

Lernen Sie eine kolorimetrische Methode zur Quantifizierung der Elastase-Aktivität für biochemische Forschung. Dieses empfindliche Verfahren ermöglicht die schnelle Analyse natürlicher Pflanzenextrakte trotz starker Färbung.

Quantifizierung der Modulation der Elastase-Enzymaktivität durch kolorimetrische Analyse

Weitere Videos entdecken