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DOI: 10.3791/67368-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Das Protokoll beschreibt eine Studie über die systemischen und lokalen Auswirkungen der Exposition gegenüber ultraviolettem B auf die Haut bei Mäusen.
Wir untersuchen die systemischen Auswirkungen der Exposition der Haut gegenüber niedrig dosierter UVB-Strahlung, insbesondere bei Konzentrationen unterhalb der Menge, die Erytheme verursacht. Unser Protokoll wird es ermöglichen, die systemischen Auswirkungen einer niedrig dosierten UVB-Exposition zu verstehen, die über die direkten oder lokalen Auswirkungen auf die Haut hinausgeht. Unsere Methode ahmt die chronische UVB-Exposition unterhalb des Erythemniveaus sehr gut nach. Auf diese Weise sind wir in der Lage, die endogenen Effekte von UVB zu untersuchen.
[Erzähler] Platzieren Sie zunächst die betäubte Maus auf einer Arbeitsplattform und rasieren Sie 50 bis 60 % ihres Rückenbereichs. Nachdem Sie das Fell mit Enthaarungscreme entfernt haben, setzen Sie die Maus in einen sauberen, trockenen Auffangkäfig mit Käfigeinstreu. Lassen Sie die Maus im Käfig zu Hause mit Futter und Wasser nach Belieben ruhen. Tragen Sie zu Beginn ein langärmeliges Hemd, eine Hose, einen Laborkittel, geschlossene Schuhe, Doppelhandschuhe und einen Gesichtsschutz, um die persönliche Sicherheit zu gewährleisten. Führen Sie die UV-B-Bestrahlung in einer biologischen Haube durch, wobei die 10-Millimeter-Plexiglasabdeckung abgesenkt und ein Schutzschirm angebracht ist. Platzieren Sie die Ultraviolett-B-Lampe auf der transparenten Plexiglaskammer. Schalten Sie die Ultraviolett-B-Lampe ein und lassen Sie sie laufen, bis sich die Intensität stabilisiert hat. Schalten Sie dann das Ultraviolet X-Radiometer ein, das mit einem Ultraviolet-B-Messkopf ausgestattet ist, um die Intensität zu überwachen. Platzieren Sie die gereinigte Belichtungskammer in der transparenten Plexiglaskammer mit zwei Kammern, während die UV-Lampe für die jeweiligen UV- oder Scheinbelichtungen ein- oder ausgeschaltet ist. Verwenden Sie einen Taschenrechner, um die erforderliche Zeit zu bestimmen, um die Maus der gewünschten Intensität von Ultraviolett B auszusetzen. Übertragen Sie die Maus für die gewünschte Belichtungszeit aus dem Home-Käfig in die Belichtungskammer. Setzen Sie die Maus einer ultravioletten B-Dosis von 50 Millijoule pro Quadratzentimeter aus, was einer suberythematischen Dosis entspricht. Um die Strahlungseffizienz zu validieren, messen Sie die Ohr- und Schwanzpigmentierung mit einem dermalen Spektrophotometer. Kalibrieren Sie das Spektralphotometer, indem Sie die Grundlinie mit sauberem, weißem Papier einstellen. Sobald die Kalibrierung abgeschlossen ist, positionieren Sie den Messsensor am Ohr oder Schwanz der Maus und zeichnen Sie die Melaninintensitätsmesswerte auf. Sowohl bei männlichen als auch bei weiblichen Mäusen, die über einen Zeitraum von vier Wochen ultravioletter B-Strahlung ausgesetzt waren, wurde ein allmählicher und signifikanter Anstieg der Melaninspiegel im Vergleich zu Kontrollen beobachtet, was eine erfolgreiche Induktion der Hautpigmentierung bestätigt.
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