Name: Dreidimensionale Bildgebung von Aortengewebe bei Atherosklerose (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-25T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 55 s
Description: Erfahren Sie, wie 3D-Bildgebung von Aortengewebe bei Atherosklerose mittels Gewebe-Clearing und Mehrphotonenmikroskopie funktioniert. Diese Methode ermöglicht die Visualisierung von Nerven-Plaque-Interaktionen in Mäusen.

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<meta charset="utf8"></head><body>Optimierte Gewebereinigungsprotokolle für die 3D-Bildgebung der murinen Aorta

<ol><li>Libby, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+changing+landscape+of+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The changing landscape of atherosclerosis.</a> Nature. 592 (7855), 524-533 (2021).</li>
<li>Mohanta, S., Yin, C., Weber, C., Hu, D., Habenicht, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aorta+atherosclerosis+lesion+analysis+in+hyperlipidemic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">Aorta atherosclerosis lesion analysis in hyperlipidemic mice.</a> Bio Protoc. 6 (11), e1833(2016).</li>
<li>Yin, C., Mohanta, S. K., Srikakulapu, P., Weber, C., Habenicht, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Artery+tertiary+lymphoid+organs%3A+Powerhouses+of+atherosclerosis+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Artery tertiary lymphoid organs: Powerhouses of atherosclerosis immunity.</a> Front Immunol. 7, 387(2016).</li>
<li>Mohanta, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Artery+tertiary+lymphoid+organs+contribute+to+innate+and+adaptive+immune+responses+in+advanced+mouse+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Artery tertiary lymphoid organs contribute to innate and adaptive immune responses in advanced mouse atherosclerosis.</a> Circ Res. 114 (11), 1772-1787 (2014).</li>
<li>Carmeliet, P., Tessier-Lavigne, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Common+mechanisms+of+nerve+and+blood+vessel+wiring%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Common mechanisms of nerve and blood vessel wiring.</a> Nature. 436 (7048), 193-200 (2005).</li>
<li>Mohanta, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroimmune+cardiovascular+interfaces+control+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Neuroimmune cardiovascular interfaces control atherosclerosis.</a> Nature. 605 (7908), 152-159 (2022).</li>
<li>Mohanta, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+brain+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular brain circuits.</a> Circ Res. 132 (11), 1546-1565 (2023).</li>
<li>Hu, D., Yin, C., Luo, S., Habenicht, A. J. R., Mohanta, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+smooth+muscle+cells+contribute+to+atherosclerosis+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Vascular smooth muscle cells contribute to atherosclerosis immunity.</a> Front Immunol. 10, 1101(2019).</li>
<li>Newland, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type-2+innate+lymphoid+cells+control+the+development+of+atherosclerosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Type-2 innate lymphoid cells control the development of atherosclerosis in mice.</a> Nat Commun. 8, 15781(2017).</li>
<li>Grabner, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphotoxin+beta+receptor+signaling+promotes+tertiary+lymphoid+organogenesis+in+the+aorta+adventitia+of+aged+Apoe-%2F-+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Lymphotoxin beta receptor signaling promotes tertiary lymphoid organogenesis in the aorta adventitia of aged Apoe-/- mice.</a> J Exp Med. 206 (1), 233-248 (2009).</li>
<li>Mai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-body+cellular+mapping+in+mouse+using+standard+igg+antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Whole-body cellular mapping in mouse using standard igg antibodies.</a> Nat Biotechnol. 42 (4), 617-627 (2024).</li>
<li>Molbay, M., Kolabas, Z. I., Todorov, M. I., Ohn, T. L., Erturk, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+guidebook+for+disco+tissue+clearing%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Syst+Biol%22%5BJournal%5D)">A guidebook for disco tissue clearing.</a> Mol Syst Biol. 17 (3), e9807(2021).</li>
<li>Tainaka, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-body+imaging+with+single-cell+resolution+by+tissue+decolorization%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Whole-body imaging with single-cell resolution by tissue decolorization.</a> Cell. 159 (4), 911-924 (2014).</li>
<li>Tian, T., Yang, Z., Li, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+clearing+technique%3A+Recent+progress+and+biomedical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anat%22%5BJournal%5D)">Tissue clearing technique: Recent progress and biomedical applications.</a> J Anat. 238 (2), 489-507 (2021).</li>
<li>Adolfs, Y., Raj, D. D. A., Brignani, S., Pasterkamp, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+tissue+clearing+and+3d+analysis+of+dopamine+neurons+in+the+developing+mouse+midbrain%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for tissue clearing and 3d analysis of dopamine neurons in the developing mouse midbrain.</a> STAR Protoc. 2 (3), 100669(2021).</li>
<li>Power, R. M., Huisken, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+guide+to+light-sheet+fluorescence+microscopy+for+multiscale+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">A guide to light-sheet fluorescence microscopy for multiscale imaging.</a> Nat Methods. 14 (4), 360-373 (2017).</li>
<li>Sun, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+clearing+approaches+in+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Tissue clearing approaches in atherosclerosis.</a> Methods Mol Biol. 2419, 747-763 (2022).</li>
<li>Chistiakov, D. A., Ashwell, K. W., Orekhov, A. N., Bobryshev, Y. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innervation+of+the+arterial+wall+and+its+modification+in+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Auton+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Innervation of the arterial wall and its modification in atherosclerosis.</a> Auton Neurosci. 193, 7-11 (2015).</li>
<li>Cao, Y., Wang, H., Wang, Q., Han, X., Zeng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+volume+fluorescence-imaging+of+vascular+plasticity+in+adipose+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Metab%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional volume fluorescence-imaging of vascular plasticity in adipose tissues.</a> Mol Metab. 14, 71-81 (2018).</li>
<li>Kirst, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+the+fine-scale+organization+and+plasticity+of+the+brain+vasculature%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Mapping the fine-scale organization and plasticity of the brain vasculature.</a> Cell. 180 (4), 780-795.e25 (2020).</li>
<li>Todorov, M. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Machine+learning+analysis+of+whole+mouse+brain+vasculature%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Machine learning analysis of whole mouse brain vasculature.</a> Nat Methods. 17 (4), 442-449 (2020).</li>
<li>Bhatia, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+proteomics+in+three-dimensional+intact+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Spatial proteomics in three-dimensional intact specimens.</a> Cell. 185 (26), 5040-5058.e19 (2022).</li>
<li>Mai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scalable+tissue+labeling+and+clearing+of+intact+human+organs%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Scalable tissue labeling and clearing of intact human organs.</a> Nat Protoc. 17 (10), 2188-2215 (2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2,2'-Thiodiethanol (TDE)</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>166782</td><td>Clearing-Reagenz</td></tr><tr><td>Amira</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td></td><td>3D-Visualisierungssoftware; Bildverarbeitungssoftware für die manuelle Segmentierung und Verfolgung in 3D-Bildern</td></tr><tr><td>Benzylalkohol</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>W213713</td><td>Clearing-Reagenz</td></tr><tr><td>Benzylbenzoat</td><td>Sigma</td><td>B6630</td><td>Clearing-Reagenz</td></tr><tr><td>CD16/32</td><td>eBioscience</td><td>14-0161-82</td><td>Blockierungslösung</td></tr><tr><td>Konfokales Laser-Scanning-Mikroskop</td><td>Leica Microsystems</td><td>TCS-SP8 3X</td><td>Bildgebungsgerät für die mehrdimensionale, hochauflösende Bildgebung von intakten biologischen Geweben oder Schnitten mit hoher Spezifität bei subzellulärer Auflösung.</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Invitrogen</td><td>D3571</td><td>Kernmarker</td></tr><tr><td>Dichlormethan (DCM)</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>270997</td><td>Klärendes Reagenz</td></tr><tr><td>zum Präparieren von pan-black wax&nbsp;</td><td>Thermo Scientific&nbsp;</td><td>S17432</td><td>Dissektion und Fixierung der Aorta</td></tr><tr><td>Präparier-Stereomikroskop</td><td>Leica Microsystems&nbsp;</td><td>Stemi 2000</td><td>Maus Organdissektion</td></tr><tr><td>Ethanol&nbsp;</td><td>Sigma</td><td>E7023</td><td>Überläufer&nbsp;</td></tr><tr><td>Ethylendiamintetraessigsäure (EDTA)</td><td>Roth&nbsp;</td><td>8040.1</td><td>Perfusionspuffer&nbsp;</td></tr><tr><td>Fidschi&nbsp;</td><td>(ImageJ, NIH)</td><td></td><td>Open-Source-Bildverarbeitungssoftware für 2D- und 3D-Bilder</td></tr><tr><td>Ziege Anti-Hamster IgG, Cy3</td><td>Dianova&nbsp;</td><td>127-165-099</td><td>Sekundärer Antikörper</td></tr><tr><td>Ziege Anti-Kaninchen IgG, Alexa Fluor 680</td><td>Thermo Fisher Scientific / Invitrogen</td><td>A-21109</td><td>Sekundärer Antikörper</td></tr><tr><td>Ziege Anti-Ratte IgG, Cy5</td><td>Dianova</td><td>712-175-150</td><td>Sekundärer Antikörper</td></tr><tr><td>Hamster Anti-CD3e&nbsp;</td><td>BD Bioscience</td><td>145-2C11&nbsp;</td><td>Pan-T-Zellmarker</td></tr><tr><td>Huygens Professional</td><td>Scientific Volume Imaging, Niederlande</td><td>Version 19.10</td><td>Software zur Bildrestaurierung; Bildverarbeitungssoftware, die hauptsächlich zur Entfaltung von 2D- und 3D-Bildern verwendet wird</td></tr><tr><td>Bildverarbeitungsarbeitsplatz</td><td>MIFCOM&nbsp;</td><td>MIFCOM X5</td><td>Bildverarbeitungs-Workstation ausgestattet mit der gesamten Bildverarbeitungssoftware, einschließlich Leica Application Suite X, Fiji und Imaris für die Nachbearbeitung von Bildern, die mit Konfokal-, Multiphotonen- und Lichtblattmikroskopen aufgenommen</td></tr> wurden <tr><td>Imaris</td><td>Bitplane</td><td>Version 8.4</td><td>Bildanalysesoftware; Bildverarbeitungssoftware für die automatisierte Segmentierung von 3D-Bildern</td></tr><tr><td>Inkubator und Rotator&nbsp;</td><td>Marshall Wissenschaftlich&nbsp;</td><td>Innova 4230</td><td>Inkubations- und Rotationsvorrichtung während der Gewebereinigung </td></tr><tr><td>iSpacer</td><td>Sunjin Lab</td><td>IS4020</td><td>Rechteckige Vertiefung sowie der Probenhalter</td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Livisto</td><td></td><td>Anästhetikum</td></tr><tr><td>Leica Application Suite X (LAS-X)&nbsp;</td><td>Leica Microsystems</td><td>Version 3.5</td><td>Bildverarbeitungssoftware für die mit dem Leica Mikroskop aufgenommenen Bilder</td></tr><tr><td>Lichtmikroskop</td><td>Leica Microsystems</td><td>DM LB</td><td>Bildgebungsgerät für die Bildgebung mit hellen Feldern</td></tr><tr><td>Lichtblattmikroskop</td><td>LaVision BioTech</td><td>Ultramicroscope II</td><td>Bildgebendes Verfahren für die schnelle, hochauflösende Bildgebung großer biologischer Proben oder ganzer Mäuse bei geringer Lichteinwirkung durch schnelle Aufnahme von Bildern dünner optischer Schnitte.</td></tr><tr><td>Multiphotonenmikroskopie</td><td>Leica Microsystems</td><td>TCS-SP5II MP&nbsp;</td><td>Bildgebungsmodalität für die mehrdimensionale, hochauflösende Bildgebung von intakten und lebensfähigen biologischen Geweben auf subzellulärer und molekularer Ebene über längere Zeiträume, tief in der Probe und mit minimaler Invasion.</td></tr><tr><td>Normales Ziegenserum</td><td>Sigma</td><td>G9023</td><td>Blockierungslösung</td></tr><tr><td>Paraformaldehyd (PFA)</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>P-6148&nbsp;</td><td>Fixierung&nbsp;</td></tr><tr><td>Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS)</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>P4417-100TAB&nbsp;</td><td>Puffer zum Waschen</td></tr><tr><td>Gelatine aus Schweinehaut</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>G1890</td><td>Inkubationspuffer</td></tr><tr><td>Quadrol</td><td></td><td>Sigma 122262</td><td>CUBIC Clearing-Reagenz</td></tr><tr><td>Kaninchen Anti-NF200</td><td>Sigma</td><td>N4142</td><td>Panneuronaler Marker</td></tr><tr><td>Ratte Anti-B220&nbsp;</td><td>BD Bioscience</td><td>RA3-6B2</td><td>Pan-B-Zellmarker</td></tr><tr><td>Saccharose</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>90M003524V&nbsp;</td><td>Dehydrierung&nbsp;</td></tr><tr><td>Sytox</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>S11380</td><td>Kernmarker</td></tr><tr><td>Tetrahydrofuran</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>401757</td><td>Clearing-Reagenz&nbsp;</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Roth&nbsp;</td><td>3051.1</td><td>Durchdringung</td></tr><tr><td>Harnstoff</td><td>Sigma&nbsp;</td><td>U5128</td><td>CUBIC Clearing-Reagenz</td></tr><tr><td>Xylol&nbsp;</td><td>Fisher Chemical&nbsp;</td><td>x/0250/17&nbsp;</td><td>Anästhetikum&nbsp;</td></tr></tbody></table>

dreidimensionale bildgebung von aortengewebe bei atherosklerose

Three-Dimensional Imaging of Aortic Tissues in Atherosclerosis

Um die Mikroanatomie der intakten gesunden und kranken Aorta zu demonstrieren und die physikalischen Verbindungen zwischen dem Immunsystem, dem Nervensystem und dem Herz-Kreislauf-System in Mausmodellen der Atherosklerose aufzudecken, verwendeten wir zwei komplementäre Gewebe-Clearing-Ansätze: TDE-Clearing der isolierten Aorta und iDISCO-Clearing der gesamten Maus (Abbildung 1). Nach der Immunfärbung des gesamten Mount wurde die Aorta mit einer Reihe von TDE-Arbeitslösungen gereinigt. Die RI wird je nach TDE-Konzentration des letzten Schritts bei 1,4-1,5 angepasst, um eine optimale Transparenz des Aortengewebes zu erreichen, ohne dessen Volumen zu verändern (Abbildung 1A). Im Gegensatz zum TDE-Clearing umfasst das iDISCO-Clearing-Protokoll Entfärbungs- und Permeabilisierungsschritte vor der Immunfärbung auf dem gesamten Mount, gefolgt von Delipidierung und Dehydratisierung mit verschiedenen chemischen Lösungsmitteln und dem RI-Matching bei 1,56 (Abbildung 1B). Das iDISCO-Clearing ermöglicht die Visualisierung von großformatigem Gewebe und aufgrund der Schrumpfung des Gewebes sogar des gesamten Mauskörpers.
Die konfokale und Multiphotonen-3D-Bildgebung der TDE-cleared Whole Mount en face Aorta ermöglicht die Visualisierung von Strukturen, einschließlich Intima-Plaques, Adventitia-Zellularität und neuronalen Adventitia-Projektionen, während die Lichtblatt-Bildgebung der iDISCO-geklärten Maus die Visualisierung und Rekonstruktion des Arterienbaums zusammen mit perivaskulärem Fettgewebe, Nierenlymphknoten und den zugehörigen neuronalen Komponenten einschließlich Nerven und Ganglien ermöglicht (Abbildung 1C). Zum Beispiel wurden bei der konfokalen Bildgebung von TDE-geklärten atherosklerotischen Aorten mehrere CD3e-gefärbte T-Zellen in Plaque und eine ausgedehnte Neogenese von NF200-gefärbten Nervenfasern unterschiedlicher Durchmesser in ATLOs nachgewiesen, während die Multiphotonenbildgebung von TDE-befreiten erkrankten Bauchaorten von gealterten Apoe-/- Mäusen die Territorialität der NF200-exprimierenden Axonsprossung in B220-negativen T-Zellbereichen innerhalb von ATLOs zeigte (Abbildung 2A). Umgekehrt visualisierte die Lichtblatt-Bildgebung des iDISCO-gereinigten gesamten Mausabdomens die räumliche Beziehung zwischen der Aorta und den angrenzenden sympathischen Ganglien. Die 3D-Bildsegmentierung und -verfolgung einzelner Axone von den Ganglien bis zur Aortenoberfläche zeigte eine robuste neuronale Umstrukturierung, einschließlich neu gebildeter NF200-gefärbter Axone in der Aorta adventitia neben atherosklerotischer Plaque (Abbildung 2B).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67400/67400fig01.jpg"> 
Abbildung 1: Ablauf der Studie. (A) TDE-Reinigung der vorderen Aorta auf wässriger Basis. (B) Lösungsmittelbasiertes iDISCO-Clearing der gesamten Maus. (C). 3D volumetrische Bildgebung und Bildverarbeitung von optisch geklärten isolierten Aorta oder ganzen Mausproben. Diese Abbildung wurde mit Genehmigung von Sun et al.17 geändert. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67400/67400fig01large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67400/67400fig02v2.jpg"> 
Abbildung 2: Beispiel für 3D-Bilder von TDE- und iDISCO-geklärtem Gewebe. (A) 3D-Bildgebung von TDE-gereinigter Aorta im Gesicht . Oberes Bild: Konfokale Bilder zeigten CD3e+ T-Zellen (rot, Pfeil) in intimalen Plaques und NF200+ Nervenaxone (grün) in atherosklerotischer Aorta adventitia (ATLO); Unteres Bild: Multiphotonenbilder zeigten NF200+ Nervenaxone (grün, Pfeilspitzen), B220+ B-Zellen (rot, offenes Dreieck), kollagenabgeleitete zweite harmonische Generation (SHG, weiß) in ATLOs von 78 Wochen alten männlichen Apoe-/- Mäusen. Sytox (blau) und DAPI (blau) zeigten die Zellkerne. (B) 3D-rekonstruierte und segmentierte Bilder von iDISCO, die den gesamten Abdomen der Maus gereinigt haben. Light-Sheet 3D-Rekonstruktion, Segmentierung und Verfolgung von NF200+ Nerven und Axonen (Pfeile, grün) und ihre räumliche Beziehung zu sympathischen Ganglien (Pfeilspitzen) der intakten Bauchaorta. Das offene Dreieck deutete auf ein neu gebildetes Axon an, das an atherosklerotische Plaques angrenzt. Die Autofluoreszenz (auto) wurde verwendet, um die Aorta und das Bindegewebe, einschließlich Plaque (cyan) und renalen Lymphknoten (RLN, blau), abzubilden. CG, Zöliakieganglien, SycG, sympathische Kettenganglien. Diese Abbildung wurde mit Genehmigung von Mohanta et al.6 und Sun et al.17 geändert. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67400/67400fig02largev2.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>

Dreidimensionale Bildgebung von Aortengewebe bei Atherosklerose

Recent research has advanced the understanding of atherosclerosis as a transmural chronic inflammatory disease involving all three layers of the arterial ...

three-dimensional-imaging-of-aortic-tissues-in-atherosclerosis

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Wir Detail eines neuen Nah-Infrarot-Fluoreszenz (NIRF) Katheter für die 2-dimensionale intravaskulären molekulare Bildgebung von Plaque...

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