Name: 3D-Visualisierung von retinalen vaskulären Perizyten bei Mäusen durch Immunfärbung (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-01T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 22 s
Description: Erfahren Sie die 3D-Visualisierung retinaler Perizyten bei Mäusen durch Immunfärbung und Gewebe-Clearing. Diese Methode ermöglicht präzise räumliche Analysen der Gefäßmorphologie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Visualisierung von retinalen Perizyten mittels Gewebeclearing und Fluoreszenzmarkierung

<ol><li>Dreisig, K., Blixt, F. W., Warfvinge, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+cryo-sections%2C+whole-mounts%2C+and+hypotonic+isolated+vasculature+preparations+for+immunohistochemical+visualization+of+microvascular+pericytes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Retinal cryo-sections, whole-mounts, and hypotonic isolated vasculature preparations for immunohistochemical visualization of microvascular pericytes.</a> J Vis Exp. (140), e57733(2018).</li>
<li>Tual-Chalot, S., Allinson, K. R., Fruttiger, M., Arthur, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole+mount+immunofluorescent+staining+of+the+neonatal+mouse+retina+to+investigate+angiogenesis+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Whole mount immunofluorescent staining of the neonatal mouse retina to investigate angiogenesis in vivo.</a> J Vis Exp. (77), e50546(2013).</li>
<li>Park, D. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plastic+roles+of+pericytes+in+the+blood-retinal+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Plastic roles of pericytes in the blood-retinal barrier.</a> Nat Commun. 8, 15296(2017).</li>
<li>Hughes, S., Chan-Ling, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+smooth+muscle+cell+and+pericyte+differentiation+in+the+rat+retina+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Characterization of smooth muscle cell and pericyte differentiation in the rat retina in vivo.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 45 (8), 2795-2806 (2004).</li>
<li>Puro, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinovascular+physiology+and+pathophysiology%3A+New+experimental+approach%2Fnew+insights%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Retinovascular physiology and pathophysiology: New experimental approach/new insights.</a> Prog Retin Eye Res. 31 (3), 258-270 (2012).</li>
<li>Hutter-Schmid, B., Humpel, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet-derived+growth+factor+receptor-beta+is+differentially+regulated+in+primary+mouse+pericytes+and+brain+slices%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Neurovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Platelet-derived growth factor receptor-beta is differentially regulated in primary mouse pericytes and brain slices.</a> Curr Neurovasc Res. 13 (2), 127-134 (2016).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Demonstrating+hairy+and+glabrous+skin+innervation+in+a+3d+pattern+using+multiple+fluorescent+staining+and+tissue+clearing+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Demonstrating hairy and glabrous skin innervation in a 3d pattern using multiple fluorescent staining and tissue clearing approaches.</a> J Vis Exp. (183), e63807(2022).</li>
<li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+the+calcitonin+gene-related+peptide+immunoreactive+innervation+of+the+rat+cranial+dura+mater+with+immunofluorescence+and+neural+tracing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Visualizing the calcitonin gene-related peptide immunoreactive innervation of the rat cranial dura mater with immunofluorescence and neural tracing.</a> J Vis Exp. (167), e61742(2021).</li>
<li>Batista, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normative+mice+retinal+thickness%3A+16-month+longitudinal+characterization+of+wild-type+mice+and+changes+in+a+model+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Aging+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Normative mice retinal thickness: 16-month longitudinal characterization of wild-type mice and changes in a model of Alzheimer's disease.</a> Front Aging Neurosci. 15, 1161847(2023).</li>
<li>Huang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pericyte-endothelial+interactions+in+the+retinal+microvasculature%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Pericyte-endothelial interactions in the retinal microvasculature.</a> Int J Mol Sci. 21 (19), 7413(2020).</li>
<li>Dong, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exosome-mediated+delivery+of+an+anti-angiogenic+peptide+inhibits+pathological+retinal+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Exosome-mediated delivery of an anti-angiogenic peptide inhibits pathological retinal angiogenesis.</a> Theranostics. 11 (11), 5107-5126 (2021).</li>
<li>Li, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retro-orbital+injection+of+fitc-dextran+is+an+effective+and+economical+method+for+observing+mouse+retinal+vessels%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Vis%22%5BJournal%5D)">Retro-orbital injection of fitc-dextran is an effective and economical method for observing mouse retinal vessels.</a> Mol Vis. 17, 3566-3573 (2011).</li>
<li>Riew, T. R., Jin, X., Kim, S., Kim, H. L., Lee, M. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+dynamics+of+cells+expressing+ng2+and+platelet-derived+growth+factor+receptor-%CE%B2+in+the+fibrotic+scar+formation+after+3-nitropropionic+acid-induced+acute+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tissue+Res%22%5BJournal%5D)">Temporal dynamics of cells expressing ng2 and platelet-derived growth factor receptor-β in the fibrotic scar formation after 3-nitropropionic acid-induced acute brain injury.</a> Cell Tissue Res. 385 (3), 539-555 (2021).</li>
<li>Susaki, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+cubic+protocols+for+whole-brain+and+whole-body+clearing+and+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Advanced cubic protocols for whole-brain and whole-body clearing and imaging.</a> Nat Protoc. 10 (11), 1709-1727 (2015).</li>
<li>Liang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cubic+protocol+visualizes+protein+expression+at+single+cell+resolution+in+whole+mount+skin+preparations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Cubic protocol visualizes protein expression at single cell resolution in whole mount skin preparations.</a> J Vis Exp. (114), e54401(2016).</li>
<li>Burns, S. A., Elsner, A. E., Gast, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+the+retinal+vasculature%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Imaging the retinal vasculature.</a> Annu Rev Vis Sci. 7, 129-153 (2021).</li>
<li>Tomer, R., Ye, L., Hsueh, B., Deisseroth, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+clarity+for+rapid+and+high-resolution+imaging+of+intact+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Advanced clarity for rapid and high-resolution imaging of intact tissues.</a> Nat Protoc. 9 (7), 1682-1697 (2014).</li>
<li>Cai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Panoptic+imaging+of+transparent+mice+reveals+whole-body+neuronal+projections+and+skull-meninges+connections%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Panoptic imaging of transparent mice reveals whole-body neuronal projections and skull-meninges connections.</a> Nat Neurosci. 22 (2), 317-327 (2019).</li>
<li>Richardson, D. S., Lichtman, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clarifying+tissue+clearing%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Clarifying tissue clearing.</a> Cell. 162 (2), 246-257 (2015).</li>
<li>Alarcon-Martinez, L., Yemisci, M., Dalkara, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pericyte+morphology+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Histol+Histopathol%22%5BJournal%5D)">Pericyte morphology and function.</a> Histol Histopathol. 36 (6), 633-643 (2021).</li>
<li>Dessalles, C. A., Babataheri, A., Barakat, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pericyte+mechanics+and+mechanobiology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Pericyte mechanics and mechanobiology.</a> J Cell Sci. 134 (6), jcs240226(2021).</li>
<li>Alarcon-Martinez, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurovascular+dysfunction+in+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Neurovascular dysfunction in glaucoma.</a> Prog Retin Eye Res. 97, 101217(2023).</li>
<li>Uemura, M. T., Maki, T., Ihara, M., Lee, V. M. Y., Trojanowski, J. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+microvascular+pericytes+in+vascular+cognitive+impairment+and+dementia%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Aging+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Brain microvascular pericytes in vascular cognitive impairment and dementia.</a> Front Aging Neurosci. 12, 80(2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>4',6-Diamidino-2-phenylindol (DAPI)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>D3571</td><td>Schutz vor Licht</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 Esel Anti-Ziegen IgG (H+L)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A-11055</td><td>Schutz vor Licht</td></tr><tr><td>C57BL/6 Maus</td><td>Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.</td><td>SCXK (Jing) 2021-0006</td><td></td></tr><tr><td>Konfokales Bildgebungssystem</td><td>Olympus</td><td>FV1200</td><td></td></tr><tr><td>Ziege anti-PDGFR-&beta;</td><td>Forschung und Entwicklung</td><td>AF1042</td><td>25 &micro; g&nbsp;</td></tr><tr><td>Imaris software</td><td>Oxford Instruments</td><td>v.9.0.1</td><td></td></tr><tr><td>Lycopersicon esculentum (Tomate) Lektin, DyLight594</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>L32471</td><td>1 mg</td></tr><tr><td>Mikrozentrifugenröhrchen</td><td>Axygen</td><td>MCT-150-C</td><td>1,5 mL</td></tr><tr><td>Normales Eselsserum</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>017-000-121</td><td>10 mL</td></tr><tr><td>Panorama-Gewebescheibenscanner</td><td>Olympus</td><td>VS120-S6-W</td><td></td></tr><tr><td>Photoshop und&nbsp; Abbildung</td><td>Adobe</td><td>CS6</td><td></td></tr><tr><td>RapiClear 1.52 Lösung</td><td>SunJin Lab</td><td>RC152001</td><td>10 mL</td></tr><tr><td>Sechs-Well-Platte</td><td>Costar</td><td>3335</td><td></td></tr><tr><td>Federschere&nbsp;</td><td>Fine Science Tools</td><td>15003-08</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost Plus Objektträger</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4951PLUS-001</td><td>25 mm x 75 mm x 1 mm</td></tr></tbody></table>

3d-visualisierung von retinalen vaskulären perizyten bei mäusen durch immunfärbung 

3D Visualization of Retinal Vascular Pericytes in Mice by Immunostaining

Aus der Außenansicht der Whole-Mount-Retina war die Gewebetransparenz der Whole-Mount-Retina durch die Tissue-Clearing-Behandlung im Vergleich zu der der Netzhaut ohne Tissue-Clearing erhöht (Abbildung 1).
Für die histologische Untersuchung der Whole-Mount-Netzhaut wurde das retinale Gefäßsystem durch die retroorbitale Injektion mit fluoreszierendem Tomatenlektin rot markiert, und die retinalen Perizyten sind mit PDGFR-β grün dargestellt (Abbildung 2, Abbildung 3 und Abbildung 4). Obwohl diese Markierung an der Probe vor und nach der Gewebereinigung beobachtet werden konnte, wurde zum Vergleich das Hintergrundrauschen der Netzhautprobe durch die Gewebereinigungsbehandlung reduziert (Abbildung 2). Die Behandlung machte auch die markierten retinalen Perizyten und Gefäße unter dem Panorama-Gewebescheibenscanner (Abbildung 2) und dem konfokalen Laserscanning-Mikroskop (Abbildung 3) klarer.
Auch hier wird die graduelle Verteilung der retinalen Perizyten entlang des retinalen Gefäßbaums demonstriert (Abbildung 3). Vom zentralen Teil der Netzhaut bis zu ihrer peripheren Region befinden sich die Perizyten auf der Basalmembran des retinalen Gefäßsystems, einschließlich des Gefäßstamms und der Äste sowie der Kapillaren (Abbildung 3).
Basierend auf der obigen Beobachtung wurde die räumliche Korrelation von Perizyten und retinalem Gefäßsystem mit den stärker vergrößerten Z-Stack-Bildern aus der geklärten Netzhautprobe weiter untersucht (Abbildung 4). Mit Hilfe des Bildverarbeitungssystems stellten wir außerdem die 3D-Ansichten zur Verfügung, um zu zeigen, dass Perizyten in unterschiedlichen Durchmessern eng um das retinale Gefäßsystem gewickelt waren (Abbildung 4). Abbildung 4A0-D0 zeigt die hierarchische Verzweigung der retinalen Gefäße von der höchsten zur untersten. Da Perizyten häufiger in den Kapillaren verteilt sind, zeigt die PDGFRβ-Färbung in Abbildung 4D0 im Vergleich zu Abbildung 4A0-C0 eine stärkere Intensität und ein stärkeres Signal.
Im Gegensatz zur Maus-Netzhaut ohne Gewebe-Clearing-Behandlung (Abbildung 1A, Abbildung 2A, Abbildung 3A0-D0) hat der vorliegende Ansatz die retinalen Hintergrundsignale zur Darstellung der räumlichen Beziehung zwischen Perizyten und Blutgefäßen von der gesamten Netzhaut effektiv reduziert (Abbildung 1B, Abbildung 2B, Abbildung 3A1-D1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67436/67436fig01.jpg"> 
Abbildung 1: Vergleich der optischen Transparenz der gesamten Mount-Netzhaut ohne und mit einer Gewebereinigungsbehandlung. (A, B) Die Außenansichten der gesamten Mount-Netzhaut vor (A) und nach (B) Gewebereinigungsbehandlung. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67436/67436fig01large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67436/67436fig02.jpg"> 
Abbildung 2: Vergleich der Markierungsmerkmale von retinalen Perizyten und Gefäßen aus der gesamten Mount-Retina ohne und mit Tissue-Clearing-Behandlung. (A, B) Repräsentative Montageansichten der gesamten Mount-Retina vor (A) und nach (B) Tissue-Clearing-Behandlung wurden unter dem Virtual Slide System aufgenommen. Das Gefäßsystem ist rot (fluoreszierendes Tomatenlektin), die Perizyten sind grün (PDGFR-β) und der Zellkern blau (DAPI). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67436/67436fig02large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67436/67436fig03.jpg"> 
Abbildung 3: Vergleich der bildgebenden Auflösung der retinalen Perizyten graduell entlang des retinalen Gefäßbaums vor und nach der Tissue-Clearing-Behandlung. (A-D) Die repräsentativen Bilder der markierten Netzhaut vor der Tissue-Clearing-Behandlung (A0-D0) und nach der Tissue-Clearing-Behandlung (A1-D1) zeigen die Verteilung der Perizyten, die das retinale Gefäßsystem umgeben, in der Reihenfolge des Gefäßstamms (A0, A1), die Äste erster Ordnung (B0, B1), die Zweige zweiter Ordnung (C0, C1) und die Kapillare (D0, D1). Das Gefäßsystem ist rot (fluoreszierendes Tomatenlektin), die Perizyten sind grün (PDGFR-β) und der Zellkern blau (DAPI). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67436/67436fig03large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67436/67436fig04.jpg"> 
Abbildung 4: Räumliche Korrelation von Perizyten mit retinalen Gefäßen in unterschiedlichen Durchmessern. (A-D) Repräsentative hochauflösende Bilder der markierten Netzhaut entlang des retinalen Gefäßbaums, die die Verteilung der Perizyten um das retinale Gefäßsystem in verschiedenen Durchmessern zeigen, einschließlich des Gefäßstamms (A0, A1), der Äste erster Ordnung (B0, B1), der Äste zweiter Ordnung (C0, C1) und der Kapillare (D0, D1). A1-D1: Entsprechende Bilder der Tafeln A0-D0 wurden rekonstruiert, um die räumliche Korrelation von Perizyten mit retinalen Gefäßen in unterschiedlichen Durchmessern in den dreidimensionalen Ansichten zu zeigen und die vergrößerten Ansichten der lokalen Regionen in den Tafeln A1-D1 (Pfeile) mit Einschüben weiter zu demonstrieren. Das Gefäßsystem ist rot (fluoreszierendes Tomatenlektin), die Perizyten sind grün (PDGFR-β) und der Zellkern blau (DAPI). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67436/67436fig04large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>

3D-Visualisierung von retinalen vaskulären Perizyten bei Mäusen durch Immunfärbung 

Retinal pericytes are essential for vascular development and stability of the retina, playing a key role in maintaining the integrity of the retinal ...

3d-visualization-retinal-vascular-pericytes-mice

Research

Forschung

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemie

Quelle: Wang, Z., et al. Transpupilläre Zwei-Photonen-In-vivo-Bildgebung der Netzhaut der Maus.  J. Vis. Exp. (2021). Dieses Video zeigt eine Technik für die in vivo Netzhautbildgebung mittels Zwei-Photonen-Mikroskopie. Anästhesierte Mäuse werden auf die Bildgebung vorbereitet, indem sie ihren Kopf sichern, Augenschmiermittel auftragen und ein Deckglas über das Auge legen. Retinale Ganglienzellen (RGCs), die fluoreszierende Proteine exprimieren, werden zunächst mittels Epifluoreszenz zur...

Zwei-Photonen-In-vivo-Bildgebung der Netzhaut der Maus

Die Neugeborenen Mausretina bietet eine gut charakterisiert physiologisches Modell der Angiogenese, die Untersuchungen der Rolle der verschiedenen Gene oder Medikamente, die Angiogenese modulieren in eine...

Ganze Berge Immunfluoreszenzfärbung der Neonatal Maus Retina zu untersuchen Angiogenese<em&gt; In vivo</em

Intravitalmikroskopie kann bei Tieren verwendet werden, um retinale Gefäßdurchmesser, Blutbahngeschwindigkeiten und den gesamten retinalen Blutfluss sichtbar zu machen und zu messen.

Intravitale Videomikroskopie-Messungen des retinalen Blutflusses bei Mäusen

Das Nagetier Retina wurde lange als eine zugängliche Fenster zum Gehirn erkannt. In diesem Fachbeitrag stellen wir ein Protokoll, das die Maus-Modell der Sauerstoff-induzierten Retinopathie, die Mechanismen, die zum Versagen der vaskulären Regeneration im zentralen Nervensystem nach einem ischämischen Verletzungen führen studieren beschäftigt. Das beschriebene System kann auch genutzt werden, um Strategien zu erkunden, um das Nachwachsen der funktionellen Blutgefäße in der Netzhaut und ZNS zu...

Beurteilung der Gefäß Regeneration im ZNS Verwenden der Maus Retina

Wir führen drei verschiedene Gewebe Vorbereitung Techniken für immunhistochemische Visualisierung der Ratte retinalen mikrovaskuläre perizyten, d. h. Cryo-Abschnitte, ganze-Reittiere und hypotone Isolierung des vaskulären-Netzes.

Netzhaut Cryo-Abschnitte, ganze-Reittiere und hypotone isoliert Gefäßsystem Vorbereitungen für immunhistochemische Visualisierung von Mikrovaskulären Perizyten

In-vivo-Bildgebung ist ein leistungsfähiges Werkzeug für das Studium der Biologie in Gesundheit und Krankheit. Dieses Protokoll beschreibt die transpupille Bildgebung der Netzhaut der Maus mit einem Standard-Zwei-Photonen-Mikroskop. Es zeigt auch verschiedene In-vivoimaging-Methoden, um mehrere zelluläre Kohorten der Netzhaut fluoreszierend zu markieren.

Transpupille Zwei-Photonen-In-vivo-Bildgebung der Netzhaut der Maus

Dieses Protokoll beschreibt eine detaillierte Methode zur Herstellung und Immunfluoreszenzfärbung von Netzhaut-Flachhalterungen und Analysen von Mäusen. Auch die Verwendung der Fluoresceinfundusangiographie (FFA) bei Mäusewelpen und die Bildverarbeitung werden ausführlich beschrieben.

Überwachung des dynamischen Wachstums von Netzhautgefäßen im sauerstoffinduzierten Retinopathie-Mausmodell

Dieser Artikel beschreibt einen gut etablierten und reproduzierbaren Lektin-Färbungsassay für die gesamten Netzhautpräparate und die Protokolle, die für die quantitative Messung von Gefäßparametern erforderlich sind, die bei proliferativen und nicht-proliferativen Retinopathien häufig verändert sind.

Quantifizierung vaskulärer Parameter in der gesamten Netzhaut von Mäusen mit nicht-proliferativen und proliferativen Retinopathien

Das retinale Gefäßsystem der Maus ist besonders interessant, um die Mechanismen der Gefäßmusterbildung zu verstehen. Dieses Protokoll misst automatisch den Durchmesser von Netzhautgefäßen der Maus aus fluoreszierenden Angiographie-Fundusbildern in einem festen Abstand zur Sehscheibe.

Messung des retinalen Gefäßdurchmessers aus Fluoreszenzangiographie-Bildern der Maus

Es wurde ein Schutzassay entwickelt, um die Widerstandsfähigkeit des retinalen Gefäßsystems gegen den Tod durch Diabetes/diabetische Retinopathie-bedingte Beleidigungen wie oxidativen Stress und Zytokine zu überwachen.

Ein Assay zum Nachweis des Schutzes des Netzhautgefäßsystems vor diabetesbedingtem Tod bei Mäusen

Dieses Manuskript beschreibt ein detailliertes Protokoll zur Isolierung retinaler glialer Müller-Zellen aus Mausaugen. Das Protokoll beginnt mit der Enukleation und Dissektion von Mausaugen, gefolgt von der Isolierung, Aussaat und Kultivierung von Müller-Zellen.

Isolierung von primären retinalen glialen Müller-Zellen der Maus

Erfahren Sie die 3D-Visualisierung retinaler Perizyten bei Mäusen durch Immunfärbung und Gewebe-Clearing. Diese Methode ermöglicht präzise räumliche Analysen der Gefäßmorphologie.

3D-Visualisierung von retinalen vaskulären Perizyten bei Mäusen durch Immunfärbung

Weitere Videos entdecken