Etablierung von Rattenmodellen, die geschlechtsangleichende Hormontherapien nachahmen

Unsere Forschung entwickelte Tiermodelle, um geschlechtsbejahende Hormontherapien für Transgender-Personen zu replizieren, wobei Testosteron für Transgender-Männer und Östrogen mit Anti-Androgen für Transgender-Frauen verwendet wurden. Wir untersuchen, ob diejenigen, die sich diesen Therapien unterziehen, genauso anfällig für Umweltchemikalien sind wie die Allgemeinbevölkerung und ob es langfristige Nebenwirkungen der Hormonbehandlung gibt. Dieses Modell ist einzigartig in seinem Bereich, da derzeit Daten und Werkzeuge zur Verfügung stehen, um die potenziell unterschiedliche Anfälligkeit von Transgender-Menschen, die sich einer Hormontherapie unterziehen, und deren Nebenwirkungen zu bewerten.

Eine wichtige Erkenntnis aus unserer Arbeit ist die Verwendung von geschlechtsspezifischem Leber-CPS als Marker zur Bewertung des Erfolgs von Hormontherapien. Dieser Ansatz, der in unserer Studie zum ersten Mal entwickelt wurde, bietet ein wertvolles Werkzeug, um die Genauigkeit und Wirksamkeit des Modells zu bestätigen.

Unser Protokoll schließt die Lücke im Verständnis der Langzeitwirkungen von Hormontherapien. Es wird auch untersucht, ob die tägliche Exposition gegenüber Lebensmitteln und Umweltchemikalien mit der Wirkung von Hormonbehandlungen interagieren oder deren Wirkung im Laufe der Zeit verändern kann.

In Zukunft werden wir untersuchen, ob sich das Modell für Langzeittests eignet, und wir werden zusätzliche Biomarker wie enge Verhaltenstests untersuchen, um Therapieeffekte besser beurteilen zu können.

[Dozent] Beginnen Sie damit, die Haut an der Injektionsstelle zu kneifen und anzuheben, um Testosteron und Östradiol plus Cyproteronacetat zu verabreichen, das in Sesamöl gelöst ist. Führen Sie die Nadel einer Ein-Milliliter-Spritze parallel zum Rücken des Tieres ein. Sobald sich die Nadel im Inneren befindet, injizieren Sie je nach Modell langsam 100 Mikroliter Testosteron oder 200 Mikroliter Östradiol plus Cyproteronacetat. Nach zweiwöchiger Behandlung legen Sie jede anästhesierte Ratte in Rückenlage auf ein Heizkissen. Bereiten Sie als Nächstes eine Fünf-Milliliter-Spritze mit einer 21-Gauge-Nadel vor und stellen Sie sicher, dass das Vakuum entfernt wird. Verwenden Sie die Finger, um das Herz zu lokalisieren. Reinigen Sie vorsichtig die Brustwand und führen Sie die Nadel vorsichtig senkrecht zum Körper in die seitliche Brustwand ein, an der Stelle, die mit den gebeugten Ellbogen ausgerichtet ist, zwischen den Rippen fünf und sechs. Sobald die Nadel den Herzventrikel erreicht, gelangt das Blut durch Kapillarität in die Spritze. Ziehen Sie den Spritzenkolben langsam und kontinuierlich zurück, bis das Blut entnommen ist. Nach dem Opfer legst du jedes Tier in Rückenlage auf den Seziertisch, wobei die Vorderbeine nach oben und die Hinterbeine nach unten zeigen. Fixieren Sie die Gliedmaßen mit Stecknadeln und besprühen Sie dann die Bauchfläche des Tieres mit einer Desinfektionslösung, um sie auf die Sektion vorzubereiten. Schneiden Sie mit einer Schere entlang der Mittellinie vom Schambein bis zum Oberbauch. Machen Sie zwei seitliche Schnitte entlang der medialen Oberflächen jeder hinteren Gliedmaße ab dem ventralen Bauchschnitt in der Mittellinie und legen Sie die Baucheingeweide frei. Bei männlichen Ratten werden die Hoden im intraabdominalen Hodensack exzidiert. Drücken Sie auf den Hodensack, um sicherzustellen, dass die Hoden hervorstehen, und greifen Sie sie sanft. Halte das viszerale Fett mit einer Zange fest und schneide dann vorsichtig die Hoden von den Eingeweiden ab. Wiegen Sie die Hoden, bevor Sie sie in Bois-Lösung für die histopathologische Analyse aufbewahren. Fassen Sie bei weiblichen Ratten vorsichtig nach der Gebärmutter. Identifizieren Sie die Eierstöcke an den Enden beider Gebärmutterhörner und schneiden Sie sie vom umgebenden viszeralen Fettgewebe ab. Wiegen Sie die Eierstöcke nach der Exzision. Fassen Sie anschließend die Leber mit einer Pinzette an und stellen Sie sicher, dass sie nicht bricht. Erfassen Sie mit einer Zange den Xiphoid-Prozess und schneiden Sie die Membran mit einer Schere vollständig durch. Trennen Sie mit einer Schere die Leber vom Zwerchfell. Heben Sie den Xiphoid-Prozess mit einer Pinzette an und extrahieren Sie die Leber aus der Bauchhöhle. Wiegen Sie die Leber nach der Exzision und lagern Sie sie entsprechend. Schneiden Sie mit einer Schere senkrecht am Hals des Tieres entlang. Entfernen Sie die Haut und die Muskulatur, um die Luftröhre freizulegen, in der sich die Schilddrüse befindet. Schneiden Sie die Enden der Luftröhre vorsichtig ab, um die Schilddrüse zu entfernen. Nach der Entnahme des Hodens greifen Sie nach dem Nebenhoden, der am hinteren Rand des Hodens befestigt ist und sich im Hodensack befindet. Um Sperma zu sammeln, reinigen Sie den Schwanz des rechten Nebenhodens, indem Sie Fett und Bindegewebe mit einer Schere entfernen. Trennen Sie den Schwanz vom restlichen Teil und legen Sie ihn in eine Petrischale, die einen Milliliter DMEM enthält. Schneiden Sie den Schwanz mit einer Schere ab und verwenden Sie eine frühere Pipette, um den Inhalt sanft fließen zu lassen und die Freisetzung zu erleichtern. Füllen Sie nun die gesammelte Flüssigkeit in ein 15-Milliliter-Röhrchen um und stellen Sie das Volumen mit DMEM auf 10 Milliliter ein, um einen Verdünnungsfaktor von eins bis 10 zu erreichen. Pipettieren Sie den Inhalt, um ihn zu homogenisieren und eine Suspension zu erzeugen. Nehmen Sie nach leichtem Schütteln 10 Mikroliter der Suspension, um die Neubauer-Kammer zu beladen.