Name: Entnahme vestibulärer Endorgane unter physiologischen Bedingungen während der Labyrinthektomie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-29T14:50:00.000+00:00
Duration: 3 min 8 s
Description: Lernen Sie eine Unterwassertechnik zur Entnahme vestibulärer Endorgane während der Labyrinthektomie. Diese Methode ermöglicht die direkte Untersuchung menschlichen Innenohrgewebes unter physiologischen Bedingungen.

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</ol>

<table><tbody><tr><td>10x Phosphat gepufferte Kochsalzlösung</td><td>Stamm Sigma-Aldrich</td><td>P5493</td><td></td></tr><tr><td>32% Paraformaldehyd Stammlösung</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>50-980-495</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>111545144</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 568 Anti-Maus Sekundärantikörper</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>115575146</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 Anti-Ziegen-Sekundärantikörper</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>705607003</td><td></td></tr><tr><td>Balanced Salt Solution</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14040117</td><td></td></tr><tr><td>Rinderserumalbumin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>10711454001</td><td></td></tr><tr><td>Konfokalmikroskop</td><td>Nikon A1&nbsp;</td><td>A1</td><td></td></tr><tr><td>Deckglas (18 mm x 18 mm, Dicke #1,5 )</td><td>Corning&nbsp;</td><td>2850-18</td><td></td></tr><tr><td>Endo-Scrub 2 Reinigungshülle für Linsen</td><td>Medtronic</td><td>IPCES2SYSKIT</td><td></td></tr><tr><td>Ethylendiamintetraessigsäure (EDTA)</td><td>Säurelösung Sigma-Aldrich</td><td>E8008</td><td></td></tr><tr><td>Ziege Anti-Oncomodulin Antikörper</td><td>R& D Systems</td><td>AF6345</td><td></td></tr><tr><td>Hopkins 0-Grad-Teleskop</td><td>Karl Storz</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Maus Anti-Calretinin-Antikörper</td><td>BD Biosciences</td><td>610908</td><td></td></tr><tr><td>ProLong Gold Antifading-Reagenz</td><td>Invitrogen</td><td>P10144</td><td></td></tr><tr><td>Kaninchen Anti-Tenascin C Antikörper</td><td>Millipore</td><td>AB19013</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>9036-19-5</td><td></td></tr></tbody></table>

entnahme vestibulärer endorgane unter physiologischen bedingungen während der labyrinthektomie

Harvest of Vestibular End-Organs under Physiologic Conditions during Labyrinthectomy

Mit dieser Technik wurden der humane Utriculus sowie die Ampullen des lateralen und oberen Kanals intakt und mit minimalem Trauma entnommen (Abbildung 2). Wie in Abbildung 2 zu sehen ist, können die Ampullen mit einem erheblichen Teil des Membranleiters entnommen werden. Die Immunfluoreszenzmarkierung mit Anti-Tenascin-C (extrazelluläres Matrixprotein) und Anti-Oncomodulin (kleines Calcium-bindendes Protein der Parvalbumin-Proteinfamilie) zeigte intakte vestibuläre Haarzellen vom Typ 1 (Abbildung 3). Die Dichte der Haarzellen betrug 82 pro 10.000 μm2. Diese Ergebnisse zeigen die Nützlichkeit dieser Technik für die Entnahme von menschlichem Innenohrgewebe mit minimalem Trauma für das Neuroepithel.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67523/67523fig01.jpg"> 
Abbildung 1: Illustration des chirurgischen Aufbaus. Illustration des chirurgischen Aufbaus: Die linke Mastoidhöhle ist mit dem lateralen, oberen und hinteren Bogengang dargestellt. Die Mastoidhöhle wird in eine ausgewogene Salzlösung getaucht und ein Null-Grad-Endoskop wird verwendet, um die Mastoidhöhle zu visualisieren, während ein Diamantbohrer verwendet wird, um das Labyrinth zu öffnen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67523/67523fig01large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67523/67523fig02.jpg"> 
Abbildung 2: Membranöses Labyrinth. Die entnommenen (A) humanen Utricula und lateralen und (B) Ampullen des oberen Kanals unter einem Lichtstereomikroskop bei 5-facher Vergrößerung. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67523/67523fig02large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67523/67523fig03.jpg"> 
Abbildung 3: Utriculus. Projektionen der Immunfluoreszenzmarkierung des menschlichen Utriculus bei 40-facher Vergrößerung, aufgenommen mit einem konfokalen Mikroskop. Kelch-Synapsenspalten sind mit Anti-Tenascin-C-Antikörpern markiert (grün). Vestibularzellen vom Typ 1 werden mit Anti-Oncomodulin (rot) gefärbt. Maßstab: 50 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67523/67523fig03large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung anzuzeigen.</a>

Entnahme vestibulärer Endorgane unter physiologischen Bedingungen während der Labyrinthektomie

The living human inner ear is challenging to study because it is encased within dense otic capsule bone that limits access to biological tissue. ...

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