Name: Isolierung von humanen mesenchymalen Stromazellen mitBAMBI-Gehalt anhohemMFGE8-Nabelschnurgehalt (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-10T14:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 5 s
Description: Erfahren Sie die Isolierung von BAMBI hoch MFGE8 hoch UC-MSCs aus menschlicher Nabelschnur mittels Durchflusszytometrie. Diese Methode ermöglicht die Analyse spezifischer Subpopulationen für die Stammzelltherapie.

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<meta charset="utf8"></head><body>Funktionelle Analyse von BAMBI-Subpopulationenmit hohemMFGE8-hohem UC-MSC-Gehalt

<ol><li>Liechty, K. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+mesenchymal+stem+cells+engraft+and+demonstrate+site-specific+differentiation+after+in+utero+transplantation+in+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Human mesenchymal stem cells engraft and demonstrate site-specific differentiation after in utero transplantation in sheep.</a> Nat Med. 6 (11), 1282-1286 (2000).</li>
<li>Zhou, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+and+advances+in+clinical+applications+of+mesenchymal+stromal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Challenges and advances in clinical applications of mesenchymal stromal cells.</a> J Hematol Oncol. 14 (1), 24(2021).</li>
<li>Xie, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tnf-alpha-mediated+m%286%29a+modification+of+elmo1+triggers+directional+migration+of+mesenchymal+stem+cell+in+ankylosing+spondylitis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Tnf-alpha-mediated m(6)a modification of elmo1 triggers directional migration of mesenchymal stem cell in ankylosing spondylitis.</a> Nat Commun. 12 (1), 5373(2021).</li>
<li>Mcguire, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell-derived+interleukin-28+drives+the+selection+of+apoptosis+resistant+bone+metastatic+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell-derived interleukin-28 drives the selection of apoptosis resistant bone metastatic prostate cancer.</a> Nat Commun. 12 (1), 723(2021).</li>
<li>Yuan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell+therapy+induces+flt3l+and+cd1c%28%2B%29+dendritic+cells+in+systemic+lupus+erythematosus+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell therapy induces flt3l and cd1c(+) dendritic cells in systemic lupus erythematosus patients.</a> Nat Commun. 10 (1), 2498(2019).</li>
<li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Umbilical+cord+mesenchymal+stem+cell+transplantation+in+active+and+refractory+systemic+lupus+erythematosus%3A+A+multicenter+clinical+study%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Umbilical cord mesenchymal stem cell transplantation in active and refractory systemic lupus erythematosus: A multicenter clinical study.</a> Arthritis Res Ther. 16 (2), R79(2014).</li>
<li>Ortiz, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell+engraftment+in+lung+is+enhanced+in+response+to+bleomycin+exposure+and+ameliorates+its+fibrotic+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell engraftment in lung is enhanced in response to bleomycin exposure and ameliorates its fibrotic effects.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100 (14), 8407-8411 (2003).</li>
<li>Phinney, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+heterogeneity+of+mesenchymal+stem+cells%3A+Implications+for+cell+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">Functional heterogeneity of mesenchymal stem cells: Implications for cell therapy.</a> J Cell Biochem. 113 (9), 2806-2812 (2012).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+transcriptome+atlas+of+human+mesenchymal+stem+cells+exploring+cellular+heterogeneity%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Single-cell transcriptome atlas of human mesenchymal stem cells exploring cellular heterogeneity.</a> Clin Transl Med. 11 (12), e650(2021).</li>
<li>Chen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+and+spatial+transcriptomics+decodes+wharton%27s+jelly-derived+mesenchymal+stem+cells+heterogeneity+and+a+subpopulation+with+wound+repair+signatures%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Single-cell and spatial transcriptomics decodes wharton's jelly-derived mesenchymal stem cells heterogeneity and a subpopulation with wound repair signatures.</a> Adv Sci (Weinh). 10 (4), e2204786(2023).</li>
<li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+heterogeneity+reveals+a+unique+bambi%28high%29+mfge8%28high%29+subpopulation+of+human+uc-mscs%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Dissecting heterogeneity reveals a unique bambi(high) mfge8(high) subpopulation of human uc-mscs.</a> Adv Sci (Weinh). 10 (1), e2202510(2022).</li>
<li>Tsuji, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+different+cell-detaching+methods+on+the+viability+and+cell+surface+antigen+expression+of+synovial+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Effects of different cell-detaching methods on the viability and cell surface antigen expression of synovial mesenchymal stem cells.</a> Cell Transplant. 26 (6), 1089-1102 (2017).</li>
<li>Lai, T. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+methods+of+detaching+adherent+cells+and+their+effects+on+the+cell+surface+expression+of+fas+receptor+and+fas+ligand%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Different methods of detaching adherent cells and their effects on the cell surface expression of fas receptor and fas ligand.</a> Sci Rep. 12 (1), 5713(2022).</li>
<li>Avinash, K., Malaippan, S., Dooraiswamy, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+of+isolation+and+characterization+of+stem+cells+from+different+regions+of+oral+cavity+using+markers%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Methods of isolation and characterization of stem cells from different regions of oral cavity using markers: A systematic review.</a> Int J Stem Cells. 10 (1), 12-20 (2017).</li>
<li>Galvao, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rock+inhibition+drives+resolution+of+acute+inflammation+by+enhancing+neutrophil+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Rock inhibition drives resolution of acute inflammation by enhancing neutrophil apoptosis.</a> Cells. 8 (9), 964(2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,6 mL Mikrozentrifugenröhrchen</td><td>Corning&nbsp;</td><td>Axygen MCT-060-A</td><td></td></tr><tr><td>1,5 mL Mikrozentrifugenröhrchen</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>MCT-001-150</td><td></td></tr><tr><td>100 mm Zellkulturschale</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>12311</td><td></td></tr><tr><td>12-Well-Platte</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>11210</td><td></td></tr><tr><td>15-ml-Zentrifugenröhrchen</td><td>Nanjing Vazyme Material Technology</td><td>TCF00115</td><td></td></tr><tr><td>24-Well-Platte</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>11310</td><td></td></tr><tr><td>50-ml-Zentrifugenröhrchen</td><td>Nanjing Vazyme Material Technology</td><td>TCF00150</td><td></td></tr><tr><td>5 mL Rohre mit rundem Boden</td><td>Corning</td><td>FALCON 352003</td><td></td></tr><tr><td>70 &mu; m cell Sieb</td><td>Falcon</td><td>352350</td><td>Verdünnung: 1:1000</td></tr><tr><td>APC anti-human CD79a (Ig&alpha;) Antikörper</td><td>BioLegend</td><td>333505</td><td>581 Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>APC/Cyanin7 Anti-Human-CD73 (Ecto-5'-Nukleotidase) Antikörper</td><td>BioLegend</td><td>344022</td><td>G46-6 Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>APC-Cy7 Maus IgG1, &kappa; Isotypkontrolle</td><td>BD Bioscience</td><td>557873</td><td>MOPC-31C (Isotyp-Kontrolle) Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>BAMBI-Antikörper</td><td>Bioss</td><td>bs-12418R</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 510 Anti-Maus/humaner CD44-Antikörper</td><td>BioLegend</td><td>103044</td><td>5E10 Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>Brilliant Violet 510 Ratte IgG2b, &kappa; Isotyp Ctrl Antikörper</td><td>BioLegend</td><td>400646</td><td>MOPC-21 (Isotypkontrolle) Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>CD105 (Endoglin) monoklonaler Antikörper&nbsp; APC</td><td>eBioscience</td><td>17-1057-42</td><td>HM47 Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>Zellzählkammer Objektträger</td><td>Shanghai QIUJING</td><td>XB-K-25</td><td></td></tr><tr><td>Zentrifuge</td><td>Peking BAIYANG</td><td>BY-320C</td><td></td></tr><tr><td>ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix</td><td>Vazyme</td><td>Q711-02</td><td></td></tr><tr><td>Chloroform</td><td>XILONG Scientific</td><td>13700908</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12 (1:1) basisch (1x)</td><td>Gibco</td><td>C11330500BT</td><td></td></tr><tr><td>EDTA (0,5 M), pH 8,0, RNASE-frei</td><td>Invitrogen</td><td>AM9260G</td><td>Verdünnung: 1:1000</td></tr><tr><td>Ethanol&nbsp; &nbsp;</td><td>XILONG Scientific</td><td>12803405</td><td></td></tr><tr><td>Fötales Rinderserum (FBS)</td><td>Gibco</td><td>10099-141C&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>FITC Maus Anti-Human CD34</td><td>BD Bioscience</td><td>555821</td><td>IM7 Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>FITC Maus Anti-Human CD45</td><td>BD Bioscience</td><td>555482</td><td>AD2 Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>FITC Maus Anti-Human HLA-DR</td><td>BD Bioscience</td><td>555811</td><td>SN6 Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>Durchflusszytometer</td><td>BD Bioscience</td><td>FACSAria&trade; III ZellsortiererAria</td><td></td></tr><tr><td>Flowjo</td><td>BD Bioscience</td><td>V10</td><td></td></tr><tr><td>Reagenz für sanfte Zelldissoziation</td><td>STEMCELL Technologies</td><td>100-0485</td><td></td></tr><tr><td>Ziege Anti-Maus IgG H& L (Alexa Fluor 488)</td><td>abcam</td><td>ab150113</td><td>HI30 Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>Ziege Anti-Kaninchen IgG H& L (AlexaFluor 594)</td><td>abcam</td><td>ab150080</td><td>Verdünnung: 1:1000</td></tr><tr><td>HiScript II Q RT SuperMix für qPCR (+gDNA Wiper)</td><td>Vazyme</td><td>R223-01</td><td></td></tr><tr><td>Inverse Mikroskope</td><td>Nikon</td><td>ECLIPSE Ts2</td><td></td></tr><tr><td>Isopropylalkohol</td><td>XILONG Scientific</td><td>12802505</td><td></td></tr><tr><td>MFGE8 Antikörper</td><td>Biorbyt</td><td>orb388429</td><td>Verdünnung: 1:100</td></tr><tr><td>Mikrozentrifuge</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>FRESCO 21</td><td></td></tr><tr><td>Maus IgG1 kappa Isotypkontrolle APC</td><td>eBioscience</td><td>17-4714-42</td><td>P3.6.2.8.1 (Isotypkontrolle) Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>Maus IgG1 kappa Isotypsteuerung FITC</td><td>eBioscience</td><td>11-4714-42</td><td>eBMG2b (Isotypkontrolle) Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>Maus IgG2b kappa Isotypsteuerung FITC</td><td>eBioscience</td><td>11-4732-42</td><td>RTK4530 (Isotyp-Kontrolle) Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>PBS (10x)</td><td>Sangon Biotech (Shanghai)</td><td>E607016-0500</td><td></td></tr><tr><td>PE-Cy5 Maus Anti-Human-CD90&nbsp;</td><td>BD Bioscience</td><td>555597</td><td>P3.6.2.8.1 (Isotyp-Kontrolle) Verdünnung: 1:200</td></tr><tr><td>PE-Cy5 Maus IgG1 & Kappa; Isotypkontrolle</td><td>BD Bioscience</td><td>550618</td><td></td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin 100x</td><td>Cytiva</td><td>SV30010</td><td>Verdünnung: 1:100</td></tr><tr><td>Real-Time PCR System</td><td>Applied Biosystems byThermo Fisher</td><td>Scientific Q6</td><td></td></tr><tr><td>RNasefreies Wasser</td><td>QIAGEN</td><td>129112</td><td></td></tr><tr><td>Spektralphotometer</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>NanoDrop One (840-317400)</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Mikropipettenspitzen</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td></td><td>Verdünnung: 1:100</td></tr><tr><td>T75 Zellkulturflasche</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>13212A</td><td></td></tr><tr><td>Thermocycler</td><td>Applied Biosystems byThermo Fisher Scientific</td><td>Veriti</td><td></td></tr><tr><td>Tri Reagenz</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T9424</td><td></td></tr><tr><td>Typsin-EDTA Lösung</td><td>Bio-Channel Biotechnologie</td><td>BC-CE-005</td><td></td></tr><tr><td>CO2&nbsp; Inkubator</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>3111</td><td></td></tr></tbody></table>

isolierung von humanen mesenchymalen stromazellen mitbambi-gehalt anhohemmfge8-nabelschnurgehalt

Isolation of Human BAMBIhighMFGE8high Umbilical Cord-Derived Mesenchymal Stromal Cells

Abbildung 1 zeigt die Expressionsprofile der Zelloberflächenmarker von humanen UC-MSCs. Kultivierte MSCs waren stark positiv für die CD44-, CD73-, CD90- und CD105-Expression und negativ für die CD14-, CD34-, CD45-, CD79- und HLA-DR-Expression. Die BAMBI-hohen MFGE8-hohen MSCs wurden aus kultivierten humanen UC-MSCs sortiert und ihre BAMBI- und MFGE8-Expression wurde nach einer Expansion über 3-4 Passagen mittels Durchflusszytometrie erneut analysiert (Abbildung 2</strong...

Isolierung von humanen mesenchymalen Stromazellen mitBAMBI-Gehalt anhohemMFGE8-Nabelschnurgehalt

Umbilical cord-derived mesenchymal stromal/stem cells (UC-MSCs) present low immunogenicity and potent immunomodulatory effects for treating various ...

isolation-human-bambihighmfge8high-umbilical-cord-derived-mesenchymal

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Forschung

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Dieses Protokoll beschreibt die Isolierung und anschließende Expansion von mesenchymalen Stromazellen und Endothelzellen Kolonie-bildenden Zellen, ohne die Verwendung von tierischen Serum autologen Paare für experimentelle Zwecke der Transplantation zu generieren.

Isolation und tierisches Serum Freie Expansion der menschlichen Nabelschnur Derived mesenchymale Stromazellen (MSCs) und Endothelial Colony Forming Progenitorzellen (ECFCs)

Mesenchymale Stammzellen (MSCs) haben ein Differenzierungspotenzial in Richtung osteoblastischer Linie, wenn sie mit löslichen Faktoren oder spezifischen Biomaterialien stimuliert werden. Diese Arbeit stellt eine neuartige Option für die Verabreichung von MSCs aus der humanen Amnionmembran (AM-hMSCs) vor, die die bovine Knochenmatrix Nukbone (NKB) als Gerüst verwendet.

Isolierung von humanen mesenchymalen Stammzellen und deren Anbau an der porösen Knochenmatrix

Hier stellen wir ein Protokoll für die Präparation der menschlichen Nabelschnur (UC) und fetaler placenta Probe in Kord Belages (CL), Wharton-Sulze (WJ), Cord-Plazenta-Übergang (CPJ) und fetale Plazenta (FP) für die Isolierung und Charakterisierung von mesenchymalen Stromazellen (MSCs), um die Explantation Kultur-Technik.

Isolierung und Charakterisierung von mesenchymalen Stromazellen aus Nabelschnur und Fetal Placenta

Menschlichen Nabelschnur (UC) erhalten Sie während der Perinatalperiode durch Frühgeburt, Begriff und postterm Lieferung. In diesem Protokoll beschreiben wir die Isolierung und Charakterisierung von UC-mesenchymale Stammzellen (UC-MSCs) von Föten/Säuglinge bei 19-40 Wochen der Schwangerschaft.

Isolierung und Charakterisierung der menschlichen Nabelschnur gewonnenen mesenchymalen Stammzellen aus Frühgeborenen und Kleinkindern Begriff

Diese Studie stellt ein einzigartiges stumpfes Dissektionsverfahren vor, um die Integrität von Wharton-Gelee (WJ) zu erhalten, was zu weniger beschädigtem WJ und einer größeren Menge und Lebensfähigkeit der entnommenen mesenchymalen Stammzellen (MSCs) führt. Die Methode zeigt eine überlegene Ausbeute und Proliferationsfähigkeit im Vergleich zu herkömmlichen scharfen Dissektionsmethoden.

Isolierung von mesenchymalen Stammzellen aus der Nabelschnur mit hoher Ausbeute und geringer Schädigung

In diesem Bericht zeigen wir ein System zur Isolierung und Kultur Spenderzellen von der Maus Brustdrüse und orthotop Transplantation dieser Zellen in Empfängermäuse zu Stromatumoren analysieren: epitheliale Interaktionen während Mammatumor Entwicklung.

Mammary Transplantation von Stromazellen und Carcinoma Cells in C57BL/6J-Mäuse

Karzinom-assoziierte Fibroblasten (CAF) reichen in Myofibroblasten innerhalb des Tumorstroma, spielen eine wichtige Rolle bei der Vertreibung der Tumorprogression. Wir entwickelten ein coimplantation Tumor xengraft Modell für experimentell erzeugen CAF von der menschlichen Brustdrüse Fibroblasten. Das Protokoll beschreibt, wie CAF Myofibroblasten, dass die Fähigkeit zur Tumorentstehung fördern erwerben zu etablieren.

Experimentelle Erzeugung von Karzinom-assoziierte Fibroblasten (CAF) von menschlichen Brustkrebszellen Fibroblasten

Das beschriebene Verfahren Isolierung und Charakterisierung von menschlichen Zahnpulpa Stammzellen (hDPSCs) unter Verwendung...

Isolation, Charakterisierung und vergleichende Differenzierung humaner Dental Pulp Stammzellen aus bleibenden Zähne mit zwei verschiedenen Methoden abgeleitet

Die Isolierung von Krebsstammzellen (KSZ), die direkt aus menschlichen Geweben ist Voraussetzung für ihre biologische Charakterisierung. Dieses Manuskript beschreibt eine Methode zur Isolierung von Prostata-Krebsstammzellen aus menschlichen Geweben, aber auch mit Tipps zur Fehlerbehebung schwierige Schritte.

Isolierung von Krebs Stammzellen aus menschlichen Prostatakrebs-Proben

Aufbau primären Endometrium-Stroma-Zellkultursysteme von Hysterektomie Proben ist eine wertvolle biologische Technik und ein entscheidender Schritt vor der Verfolgung einer Vielzahl von Forschungszielen. Hier beschreiben wir zwei Verfahren verwendet, um stromale Kulturen von chirurgisch entfernten endometrialen Geweben menschlichen Patienten zu etablieren.

Zwei Methoden zur Festlegung von primären humanen Endometrium Stromazellen aus Hysterektomie Proben

Erfahren Sie die Isolierung von BAMBI hoch MFGE8 hoch UC-MSCs aus menschlicher Nabelschnur mittels Durchflusszytometrie. Diese Methode ermöglicht die Analyse spezifischer Subpopulationen für die Stammzelltherapie.

Isolierung von humanen mesenchymalen Stromazellen mit^{BAMBI-Gehalt an}hohem^{MFGE8-Nabelschnurgehalt}

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