Name: Bewertung der Zelltodsignalisierung durch Immunfluoreszenz in einem Rattenmodell für ischämische Schlaganfälle (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-03T15:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 32 s
Description: Erfahren Sie, wie Immunfluoreszenz in einem MCAO-Rattenmodell die Zelltodsignalisierung bei ischämischem Schlaganfall analysiert. Diese Methode identifiziert molekulare Targets wie Cathepsin B und Apoptose für neue Therapieansätze.

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<meta charset="utf8"></head><body>Immunfluoreszenzfärbung zur Untersuchung des Zelltods in MCAO-Schlaganfallmodellen der Ratte

<table><tbody><tr><td>Akoya Vectra Polaris</td><td>Akoya Biosciences</td><td>N/A</td><td>Vectra Polaris Multispektrales Bildgebungssystem&nbsp;</td></tr><tr><td>Wasserfreies Ethanol</td><td>Chengdu Jinshan Chemisches Reagenz Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphin</td><td>West China Hospital</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Carprofen</td><td>West China Hospital</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Cathepsin-B Antikörper</td><td>Abcam</td><td>Ab214428</td><td></td></tr><tr><td>Kryostat</td><td>LEICA &</td><td>LEICA CM 1950</td><td></td></tr><tr><td>Digitalkamera</td><td>OLYMPUS</td><td>TG-7</td><td></td></tr><tr><td>Ziege Anti-Ratte IgG (H+L) (FITC konjugiert)</td><td>Elabscience</td><td>&nbsp; E-AB-1021</td><td></td></tr><tr><td>Ziegenserum</td><td>Solarbio</td><td>SL038</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism 10 Software</td><td>N/A</td><td>https://www.graphpad-prism.cn/?c=i&a=prismdownload_cn</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>N/A</td><td>https://imagej.net/ij/</td><td></td></tr> <tr><td>Immunhistochemie</td><td>Stift Biosharp</td><td>http://www.biosharp.cn/index/product/details/language/en/product_id/2828.html</td><td></td></tr><tr><td>InForm-Software</td><td>Akoya Biosciences</td><td>Version 2.6.0</td><td>Systemsoftware für das multispektrale Bildgebungssystem&nbsp;</td></tr><tr><td>Iodophor Desinfektionslösung</td><td>Huatian Technology Industry Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>RWD Life Science Co.</td><td>https://www.rwdstco.com/inhalation-anesthesia-solutions/</td><td></td></tr> <tr><td>Eindeckmedium mit DAPI</td><td>Solarbio</td><td>S2110</td><td></td></tr><tr><td>Nylon monofile</td><td>RWD Life Science Co.</td><td>https://www.rwdstco.com/</td> Optimale Schnitttemperatur (OCT) <td></td></tr><tr><td></td><td>Verbindung Epredia</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyd</td><td>Biosharp</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Phosphatpufferlösung (PBS)</td><td>Solarbio</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Prism</td><td>GraphPad&nbsp;</td><td>Version 10</td><td></td></tr><tr><td>Proteinase K</td><td>Tiangen</td><td>RT403-02</td><td></td></tr><tr><td>Kochsalzlösung</td><td>Kelun Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Sprague-Dawley Ratten</td><td>Huafukang Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Saccharose</td><td>BioFroxx</td><td>1245GR500</td><td></td></tr><tr><td>Chirurgische Instrumente</td><td>RWD Life Science Co.</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>TO-Typ transparenter biologischer Arbeitsstoff&nbsp; &nbsp;</td><td>Beijing Solarbio Wissenschaft & Verifizierter Lieferant - Tecnology Co., Ltd.</td><td>http://www.solarbio.net/</td><td></td></tr> <tr><td>Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC) Lösung</td><td>Solarbio</td><td>G3005</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>BioFroxx</td><td>1139ML100</td><td></td></tr><tr><td>TUNEL kit</td><td>Elabscience</td><td>&nbsp; E-CK-A321</td><td></td></tr></tbody></table>

bewertung der zelltodsignalisierung durch immunfluoreszenz in einem rattenmodell für ischämische schlaganfälle

Evaluating Cell Death Signaling by Immunofluorescence in a Rat Model of Ischemic Stroke

Die Ratten werden während der MCAO einer 120-minütigen Ischämie unterzogen, gefolgt von einer 22-stündigen Reperfusion. Die Mortalitätsrate war während der MCAO-Operation minimal und lag innerhalb der Reperfusionsphase bei etwa 25%. In der MCAO-Gruppe wurden signifikante Hirnschäden beobachtet, während im Großhirn der Sham-Gruppe kein Infarkt beobachtet wurde (24,87 ± 1,21 % vs. 0 % Summe der Infarktfläche auf das gesamte Hirnareal; MCAO [n = 3] vs. Sham [n = 3], P &lt; 0,001; Abbildung 1A,B...

Bewertung der Zelltodsignalisierung durch Immunfluoreszenz in einem Rattenmodell für ischämische Schlaganfälle

Stroke is a leading cause of death and disability worldwide. Most cases of stroke are ischemic and result from the occlusion of the middle cerebral artery ...

evaluating-cell-death-signaling-immunofluorescence-rat-model-ischemic

Research

Forschung

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowissenschaften

Chirurgische Induktion der ischämischen Hirnschädigung in der Ratte ist ein weit verbreitetes Modell für Schlaganfall-Forschung. Hier zeigen wir die Induktion fokaler zerebraler Ischämie durch Verschluss der mittleren Hirnarterie. Visualisierung der resultierenden Infarkt durch histologischer Färbung und Magnetresonanz-Tomographie wird ebenfalls angezeigt.

Fokaler zerebraler Ischämie-Modell von Endovascular Suture Verschluss der mittleren Hirnarterie im Rat

Mehrere Tiermodelle von zerebraler Ischämie wurden entwickelt, um den menschlichen Zustand des Schlaganfalls simulieren. Dieses Protokoll beschreibt die Endothelin-1 (ET-1) induzierte mittlere Zerebralarterie (MCAO) Modell für ischämischem Schlaganfall bei Ratten. Darüber hinaus sind wichtige Erwägungen, Vorteile und Nachteile dieses Modells diskutiert.

Endothelin-1 induzierte Middle Cerebral Artery Occlusion Modell für ischämischen Schlaganfall mit Laser Doppler Flowmetrie Guidance in Rat

Bilaterale Carotisokklusion mit systemischer Hypotonie gekoppelt produziert globales Gehirn Ischämie bei der Ratte, was zu einer Beschädigung des Hippocampus mit reproduzierbaren Schwere. Tier Probanden mit vorhersagbaren Mustern der Hirnschädigung beeinträchtigt sind, erholen sie zweckmäßig und Mortalitätsraten sind vergleichsweise gering.

2-Gefäßverschluss / Hypotonie: Eine Ratte Modell der globalen Hirnischämie

Zerebrale Perfusion Überwachung wurde gezeigt, dass die Genauigkeit des ischämischen Schlaganfalls Modelle zu verbessern. Technische Schwierigkeiten oft die Begrenzung der Verwendung dieses unverzichtbares Werkzeug für zerebrovaskuläre Forschung. In diesem Video wird ein optimiertes System gezeigt, dass eine Einzel-oder Multi-Site hämodynamische Monitoring bei intraluminalen Mitte Zerebralarterie bei Ratten zu erhalten.

Optimierte System for Cerebral Perfusion Überwachung im Rat Stroke Modell Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

Wir präsentieren ein neues Fluoreszenz-Technik für die selektive in situ-Markierung der aktiven Fresszellen, die klar aus Zell Leichen in der Schlaganfall. Der Ansatz ist wichtig für die Beurteilung Gehirn Reaktion auf Ischämie, da nur ein kleiner Teil der in ischämischen Gehirn vorhanden Phagozyten in der Clearance des Zelltodes beteiligt.

Die Beurteilung Phagozytische Clearance von Cell Death in Experimental Stroke ligierbaren von Fluoreszenzsonden

Hirnschäden infolge zerebraler Ischämie können nicht-invasiv abgebildet und an Ratten untersucht werden, wobei eine präklinische Positronen-Emissions-Tomographie in Verbindung mit der injizierbaren radioaktiven Sonde 18F-Fluordesoxyglucose verwendet wird. Darüber hinaus erhöht die Verwendung moderner Softwaretools, die VOI-Gehirnvorlagen (Volume of Interest) enthalten, die quantitativen Informationen, die aus diesen Studien gewonnen werden, drastisch.

Nicht-invasive Bildgebung und Analyse der zerebralen Ischämie in lebenden Ratten mit Hilfe der Positronen-Emissions-Tomographie mit<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG

Eine Methode zur Abgabe neuronaler Stammzellen, anpassungsfähig für Injektionslösungen oder Suspensionen, durch die gemeinsame Halsschlagader (Maus) oder externe Halsschlagader (Ratte) nach ischämischem Schlaganfall wird berichtet. Injizierte Zellen sind breit über das Gehirn Parenchym verteilt und kann bis zu 30 d nach der Geburt nachgewiesen werden.

Intra-arterielle Lieferung von neuronalen Stammzellen an das Ratten- und Maushirn: Anwendung auf zerebrale Ischämie

Hier stellen wir ein Protokoll zur Beurteilung der Immunzellfunktion nach ischämischem Schlaganfall mittels durchflusszytometrischer Analyse in einem Mini-Schlaganfallmodell vor. Diese Methode ermöglicht eine detaillierte Untersuchung der neuroimmunen Interaktionen und kann für die Untersuchung anderer neurodegenerativer Erkrankungen angepasst werden, um unser Verständnis der Immunantworten in der Schlaganfallpathologie zu verbessern.

Isolierung und durchflusszytometrische Bewertung neuroimmuner Interaktionen in einem Mini-Schlaganfall-Mausmodell

Als Reaktion auf Lebensmittel oder Arzneimittel-gepaart Hinweise nimmt im Laufe einer Periode der Abstinenz und dies kann zu einer erhöhten Anfälligkeit für Rückfälle Verhaltensweisen beziehen. Hier haben wir detailliert ein Verfahren zur Bewertung dieser "Inkubationszeit der Begierde" in Ratten, die selbst verwalteten Saccharose haben.

Eine allgemeine Methode zur Bewertung der Inkubation von Saccharose Craving in Ratten

Primär disassoziierte embryonale Hippocampus-Neuronalkulturen sind nützlich, um die Signalmechanismen zu untersuchen, die am Neuronentod beteiligt sind. Die Geschlechtsbestimmung der Embryonen vor der Isolierung und Dissoziation des Hippocampus ermöglicht die Herstellung separater männlicher und weiblicher Kulturen, was es dem Forscher ermöglicht, geschlechtsspezifische Zellsignale zu identifizieren und zu untersuchen.

Geschlechtsstratifizierte neuronale Kulturen zur Untersuchung des ischämischen Zelltods

Erfahren Sie, wie Immunfluoreszenz in einem MCAO-Rattenmodell die Zelltodsignalisierung bei ischämischem Schlaganfall analysiert. Diese Methode identifiziert molekulare Targets wie Cathepsin B und Apoptose für neue Therapieansätze.

Bewertung der Zelltodsignalisierung durch Immunfluoreszenz in einem Rattenmodell für ischämische Schlaganfälle

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