Name: Isolierung von lebenden myeloischen und epithelialen Zellpopulationen aus der Lunge der Maus (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-31T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 2 s
Description: Lernen Sie die Isolierung lebender myeloischer und epithelialer Zellpopulationen aus der Lunge der Maus. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Immunzell-Epithel-Interaktionen bei viralen Infektionen.

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<meta charset="utf8"></head><body>Isolierung von Immun- und Nicht-Immunzellen aus der Lunge von Mäusen für die Durchflusszytometrie

<ol><li>Wanner, A., Salathé, M., O'Riordan, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucociliary+clearance+in+the+airways%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Mucociliary clearance in the airways.</a> Am J Respir Crit Care Med. 154 (6), 1868-1902 (1996).</li>
<li>Mason, R. J., Williams, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+II+alveolar+cell.+Defender+of+the+alveolus%5BTitle%5D)+AND+%22Am+Rev+Respir+Dis%22%5BJournal%5D)">Type II alveolar cell. Defender of the alveolus.</a> Am Rev Respir Dis. 115 (1), 81-91 (1977).</li>
<li>Fehrenbach, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+epithelial+type+II+cell%3A+defender+of+the+alveolus+revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Res%22%5BJournal%5D)">Alveolar epithelial type II cell: defender of the alveolus revisited.</a> Respir Res. 2 (1), 33-46 (2001).</li>
<li>Basil, M. C., Alysandratos, K. -D., Kotton, D. N., Morrisey, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+repair+and+regeneration%3A+Advanced+models+and+insights+into+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Lung repair and regeneration: Advanced models and insights into human disease.</a> Cell Stem Cell. 31 (4), 439-454 (2024).</li>
<li>Hussell, T., Bell, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+macrophages%3A+plasticity+in+a+tissue-specific+context%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Alveolar macrophages: plasticity in a tissue-specific context.</a> Nat Rev Immunol. 14 (2), 81-93 (2014).</li>
<li>Gschwend, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+macrophages+rely+on+GM-CSF+from+alveolar+epithelial+type+2+cells+before+and+after+birth%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Alveolar macrophages rely on GM-CSF from alveolar epithelial type 2 cells before and after birth.</a> J Exp Med. 218 (1), e20210745(2021).</li>
<li>Gillich, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Capillary+cell-type+specialization+in+the+alveolus%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Capillary cell-type specialization in the alveolus.</a> Nature. 586 (7831), 785-789 (2020).</li>
<li>Schyns, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-classical+tissue+monocytes+and+two+functionally+distinct+populations+of+interstitial+macrophages+populate+the+mouse+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Non-classical tissue monocytes and two functionally distinct populations of interstitial macrophages populate the mouse lung.</a> Nat Commun. 10 (1), 3964(2019).</li>
<li>Chakarov, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+distinct+interstitial+macrophage+populations+coexist+across+tissues+in+specific+subtissular+niches%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Two distinct interstitial macrophage populations coexist across tissues in specific subtissular niches.</a> Science. 363 (6432), eaat3773(2019).</li>
<li>Tsukui, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collagen-producing+lung+cell+atlas+identifies+multiple+subsets+with+distinct+localization+and+relevance+to+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Collagen-producing lung cell atlas identifies multiple subsets with distinct localization and relevance to fibrosis.</a> Nat Commun. 11 (1), 1920(1920).</li>
<li>Aegerter, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza-induced+monocyte-derived+alveolar+macrophages+confer+prolonged+antibacterial+protection%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Immunol%22%5BJournal%5D)">Influenza-induced monocyte-derived alveolar macrophages confer prolonged antibacterial protection.</a> Nat Immunol. 21 (2), 145-157 (2020).</li>
<li>Johansson, C., Kirsebom, F. C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophils+in+respiratory+viral+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunol%22%5BJournal%5D)">Neutrophils in respiratory viral infections.</a> Mucosal Immunol. 14 (4), 815-827 (2021).</li>
<li>Li, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monocyte-derived+alveolar+macrophages+autonomously+determine+severe+outcome+of+respiratory+viral+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Monocyte-derived alveolar macrophages autonomously determine severe outcome of respiratory viral infection.</a> Sci Immunol. 7 (71), eabj5761(2022).</li>
<li>Moll, H. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+transplantation+of+syngeneic+lung+adenocarcinoma+cells+to+study+PD-L1+expression%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Orthotopic transplantation of syngeneic lung adenocarcinoma cells to study PD-L1 expression.</a> J Vis Exp. (143), e58101(2019).</li>
<li>Warshamana, G. S., Corti, M., Brody, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TNF-%CE%B1%2C+PDGF%2C+TGF-%CE%B21+expression+by+primary+mouse+bronchiolar-alveolar+epithelial+and+mesenchymal+cells%3A+TNF-%CE%B1+induces+TGF-%CE%B21%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Mol+Pathol%22%5BJournal%5D)">TNF-α, PDGF, TGF-β1 expression by primary mouse bronchiolar-alveolar epithelial and mesenchymal cells: TNF-α induces TGF-β1.</a> Exp Mol Pathol. 71 (1), 13-33 (2001).</li>
<li>Corti, M., Brody, A. R., Harrison, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+primary+culture+of+murine+alveolar+type+II+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Isolation and primary culture of murine alveolar type II cells.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 14 (3), 309-315 (1996).</li>
<li>Quantius, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+virus+infects+epithelial+stem%2Fprogenitor+cells+of+the+distal+lung%3A+Impact+on+Fgfr2b-driven+epithelial+repair%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Influenza virus infects epithelial stem/progenitor cells of the distal lung: Impact on Fgfr2b-driven epithelial repair.</a> PLoS Pathog. 12 (5), e1005544(2016).</li>
<li>Wu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcardiac+perfusion+of+the+mouse+for+brain+tissue+dissection+and+fixation%5BTitle%5D)+AND+%22BIO+Protoc%22%5BJournal%5D)">Transcardiac perfusion of the mouse for brain tissue dissection and fixation.</a> BIO Protoc. 11 (8), e3988(2021).</li>
<li>Morton, J., Snider, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+collection+and+processing+of+lungs+from+aged+mice+for+histological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Pathobiol+Aging+Age+Relat+Dis%22%5BJournal%5D)">Guidelines for collection and processing of lungs from aged mice for histological studies.</a> Pathobiol Aging Age Relat Dis. 7 (1), 1313676(2017).</li>
<li>Bijgaart, R. J. E., van den Kong, N., Maynard, C., Plaks, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+live+imaging+of+lung+metastasis+and+their+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Ex vivo live imaging of lung metastasis and their microenvironment.</a> J Vis Exp. (108), e53741(2016).</li>
<li>Shi, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+purification+of+immune+cells+from+the+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Immunopharmacol%22%5BJournal%5D)">Isolation and purification of immune cells from the liver.</a> Int Immunopharmacol. 85, 106632(2020).</li>
<li>Short, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+virus+damages+the+alveolar+barrier+by+disrupting+epithelial+cell+tight+junctions%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Influenza virus damages the alveolar barrier by disrupting epithelial cell tight junctions.</a> Eur Respir J. 47 (3), 954-966 (2016).</li>
<li>Laidlaw, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD4%2B+T+cell+help+guides+formation+of+CD103%2B+lung-resident+memory+CD8%2B+T+cells+during+influenza+viral+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">CD4+ T cell help guides formation of CD103+ lung-resident memory CD8+ T cells during influenza viral infection.</a> Immunity. 41 (4), 633-645 (2014).</li>
<li>D'Agostino, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+isolation+and+characterization+of+lung+tissue-resident+memory+T+cells+and+airway-trained+innate+immunity+after+intranasal+vaccination+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for isolation and characterization of lung tissue-resident memory T cells and airway-trained innate immunity after intranasal vaccination in mice.</a> STAR Protoc. 3 (2), 101652(2022).</li>
<li>Waal, A. M., de Hiemstra, P. S., Ottenhoff, T. H., Joosten, S. A., vander Does, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+epithelial+cells+interact+with+immune+cells+and+bacteria+to+shape+the+microenvironment+in+tuberculosis%5BTitle%5D)+AND+%22Thorax%22%5BJournal%5D)">Lung epithelial cells interact with immune cells and bacteria to shape the microenvironment in tuberculosis.</a> Thorax. 77 (4), 408-416 (2022).</li>
<li>Bhattacharya, J., Westphalen, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage-epithelial+interactions+in+pulmonary+alveoli%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunopathol%22%5BJournal%5D)">Macrophage-epithelial interactions in pulmonary alveoli.</a> Semin Immunopathol. 38 (4), 461-469 (2016).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 mL Spritze mit Slip Tip</td><td>VWR</td><td>BD309659</td><td></td></tr><tr><td>1,7 mL Mikrozentrifugenröhrchen</td><td>DOT Scientific</td><td>RN1700-GMT</td><td></td></tr><tr><td>10 mL Pipetten (Einweg)</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-567-603</td><td></td></tr><tr><td>10 mL Spritze mit BD Luer-Lok Spitze</td><td>VWR</td><td>75846-756</td><td></td></tr><tr><td>123 Stück eBeads Counting Beads</td><td>Thermo Scientific</td><td>01-1234-42</td><td></td></tr><tr><td>12-Kanal-Pipette (30-300ul)</td><td>USA Scientific&nbsp;</td><td>7112-3300</td><td></td></tr><tr><td>16% Paraformaldehyd</td><td>VWR</td><td>100503-917</td><td></td></tr><tr><td>23 G Nadel mit normaler Fase</td><td>VWR</td><td>305194</td><td></td></tr><tr><td>27 G Nadel mit regulärer Fase</td><td>VWR</td><td>BD305109</td><td></td></tr><tr><td>5 mL Pipetten (Einweg)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>170373</td><td></td></tr><tr><td>50 mL Zentrifugenröhrchen</td><td>Olympus&nbsp;</td><td>28-108</td><td></td></tr><tr><td>96-Well-Rundbodenplatte</td><td>Corning</td><td>3797</td><td></td></tr><tr><td>ACK Lysingpuffer</td><td>Gibco</td><td>A100492-01</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 Anti-Maus CD11c</td><td>BioLegend</td><td>117311</td><td></td></tr><tr><td>Anti-F4/80 Ratte Monoklonaler Antikörper (PE (Phycoerythrin)/Cy7)</td><td>BioLegend</td><td>123114</td><td></td></tr><tr><td>APC Anti-Maus CD64 (Fc&gamma; RI)</td><td>BioLegend</td><td>139306</td> APC/<td></td></tr><tr><td>Cyanine7 Anti-Maus CD45</td><td>BioLegend</td><td>103115</td><td></td></tr><tr><td>BD Insyte Autoguard Shielded IV Katheter</td><td>VWR</td><td>381423</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 421 Anti-Maus I-A/I-E (MHC-II)</td><td>BioLegend</td><td>107632</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 421 Anti-Maus/Mensch CD11b</td><td>BioLegend</td><td>101235</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 605 Anti-Maus Ly-6C</td><td>BioLegend</td><td>128036</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 711 Anti-Maus CD45</td><td>BioLegend</td><td>103147</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J Mäuse&nbsp;</td><td>Jackson Laboratories</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cd140a (PDGFRA) Monoklonaler Antikörper (APA5), PE-Cyanin7, eBioscience</td><td>Life Technologies</td><td>25-1401-82</td><td></td></tr><tr><td>CD170 (Siglec F) Monoklonaler Antikörper (1RNM44N), PE</td><td>Life Technologies</td><td>12170280</td><td></td></tr><tr><td>Zellsiebe</td><td>Corning</td><td>352350</td><td></td></tr><tr><td>Zentrifuge</td><td>Eppenodorf</td><td>Zentrifuge 5910R</td><td></td></tr><tr><td>Desoxyribonuklease I aus der bovinen Bauchspeicheldrüse (DNase)</td><td>Millipore Sigma</td><td>DN25-100MG</td><td>Rekonstituiert bei 20 mg/ml in DPBS als Stammlösung, gelagert bei -20 μg; C</td></tr><tr><td>Dispase</td><td>VWR</td><td>76176-668</td><td>Einmal aufgetaut und als 1 mL Aliquot bei -20 &deg gelagert; C</td></tr><tr><td>Präparierzange (Dumont #7)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11297-00</td><td></td></tr><tr><td>Sezierschere</td><td>Fine Science Tools</td><td>14060-09</td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>14190250</td><td></td></tr><tr><td>eBioscience Fixierset</td><td>Life Technologies</td><td>00-5523-00</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Life Technologies</td><td>AM9260G</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>VWR</td><td>TX89125170HU</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>GeminiBio</td><td>100-106</td><td>Einmal aufgetaut und vor der Langzeitlagerung als Aliquote bei -20 &deg wärmeinaktiviert; C</td></tr><tr><td>FITC Anti-Maus CD31 Antikörper</td><td>BioLegend</td><td>102406</td><td></td></tr><tr><td>Gibco RPMI 1640 Medium</td><td>Fisher Scientific</td><td>11-875-093</td><td></td></tr><tr><td>Objektträger</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-552-3</td><td></td></tr><tr><td>graduiertes Reservoir</td><td>USA Scientific&nbsp;</td><td>1930-2235</td><td></td></tr><tr><td>Eiskübel</td><td>Corning</td><td>432128</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin-Hydrocholorid-Injektion (100 mg/ml)</td><td>Dechra</td><td></td><td>Ketamin- und Xyalazin-Euthanasierungsgemisch kann bei 30 mg/ml Ketaminhydrochlorid und 4,5 mg/ml Xylazin in sterilem DPBS bis zu einem Monat aufbewahrt werden.</td></tr><tr><td>Liberase</td><td>Millipore Sigma</td><td>5401119001</td><td>rekonstituiert bei 5 mg/ml in DPBS als Stammlösung, gelagert bei -20 &de; C</td></tr><tr><td>Deckel für 96-Well-Platten</td><td>Fisher Scientific</td><td>07-201-731</td><td></td></tr><tr><td>Orbital Incubator Shaker</td><td>Barnstead Lab-Line</td><td>SHKE4000</td><td></td></tr><tr><td>p1000 Pipette</td><td>Eppenodorf</td><td>3123000063</td><td></td></tr><tr><td>p1000 Spitzen</td><td>USA Scientific</td><td>1122-1830</td><td></td></tr><tr><td>p200 Pipette</td><td>Eppenodorf</td><td>3123000055</td><td></td></tr><tr><td>p200 Spitzen</td><td>USA Scientific&nbsp;</td><td>1110-1700</td><td></td></tr><tr><td>PE Anti-Maus CD326 (Ep-CAM)</td><td>BioLegend</td><td>118206</td><td></td></tr><tr><td>PerCP/Cyanin5.5 Anti-Maus CD104 Antikörper</td><td>BioLegend</td><td>123614</td><td></td></tr><tr><td>PerCP/Cyanin5.5 Anti-Maus Ly-6G</td><td>BioLegend</td><td>127616</td><td></td></tr><tr><td>Pipet-Aid&nbsp;</td><td>Drummond</td><td>4-000-101</td><td></td></tr><tr><td>Gereinigtes Anti-Maus-CD16/32 </td><td>BioLegend</td><td>101302</td><td>Im Text als "Fc-Block" bezeichnet </td></tr><tr><td>Sprühflasche</td><td>VWR</td><td>23609-182</td><td></td></tr><tr><td>Nahtmaterial (Größe 2-0)</td><td>VWR</td><td>100190-026</td><td></td></tr><tr><td>Auflagen</td><td>VWR</td><td>56617-014</td><td></td></tr><tr><td>Xysed (Xylazin 100 mg/ml)</td><td>Pivetal</td><td></td><td>Siehe Ketamin-Hydrocholorid-Hinweise oben.</td></tr><tr><td>Zombie Aqua Reparierbares Lebensfähigkeitsset</td><td>BioLegend</td><td>423102</td><td></td></tr></tbody></table>

isolierung von lebenden myeloischen und epithelialen zellpopulationen aus der lunge der maus

Isolation of Live Myeloid and Epithelial Cell Populations from the Mouse Lung

Ein erfolgreicher Verdau führt zu etwa 20-25 Millionen Zellen mit einer Lebensfähigkeit von 90 % bis 95 %. Wenn etwa 25.000 Zählperlen zu einer 8%igen Fraktion der Lunge hinzugefügt werden, sollten die Kügelchen 1%-3% der gesammelten Ereignisse beeinträchtigen. Nach dem Gating auf Singuletts sollten etwa 90 % bis 95 % der Zellen Zombie Aqua-negativ sein (was auf die Lebensfähigkeit hinweist) (Abbildung 2A, Abbildung 3A).
Von CD45...

Isolierung von lebenden myeloischen und epithelialen Zellpopulationen aus der Lunge der Maus

The lung is continuously exposed to pathogens and other noxious environmental stimuli, rendering it vulnerable to damage, dysfunction, and the development ...

isolation-live-myeloid-epithelial-cell-populations-from-mouse

Research

Forschung

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie und Infektion

Hier beschreiben wir ein Protokoll für die Isolierung und Kultivierung von murinen pulmonalen Endothelzellen. Dieses Verfahren umfasst mechanische und enzymatische Lungengewebe Dissoziation sowie eine 2-Schritt-Reinigungsverfahren mit anti-PECAM-1 und anti-ICAM-2-Antikörper, konjugiert an magnetische Kügelchen, die eine reine Endothelzellen Bevölkerung meist mikrovaskuläre Herkunft produziert.

Isolierung und Kultivierung von pulmonaler Endothelzellen aus neugeborenen Mäusen

In diesem Artikel zeigen wir die Isolierung von murinen Wohnsitz Lunge mesenchymalen Stammzellen (MSC Lunge), deren Expansion, Charakterisierung und Analyse der immunmodulatorischen Eigenschaften.

Isolation und Charakterisierung von Hoechst Low CD45 Negative Mouse Lung mesenchymalen Stammzellen

Ein hoch gereinigte Präparation von Mauslunge dendritischen Zellen beschrieben wird. Besonderer Nachdruck wird auf die Isolierung von konventionellen dendritischen Zellen Teilmenge gegeben.

Isolierung von Maus Lung Dendritischen Zellen

Wir beschreiben die schnelle Isolierung von primären murinen Typ II Alveolarepithelzellen (AECII) mittels Durchflusszytometrie negative Selektion. Diese AECII zeigen eine hohe Rentabilität und Reinheit und sind für ein breites Spektrum von funktionellen und molekularen Untersuchungen hinsichtlich ihrer Rolle bei der respiratorischen Erkrankungen wie Autoimmun-und Infektionskrankheiten geeignet.

Durchflusszytometrische Isolation of Primary Murine Type II Alveolarepithelzellen für Funktionelle und Molekulare Studien

Dieses Video zeigt eine in vitro Technik zur Identifizierung von Immunzellen, die sich in der Lunge von Mäusen befinden. Nach der Isolierung von Zielimmunzellen aus murinem Lungengewebe werden sie mit einem Cocktail aus Fluorophor-markierten Antikörpern gegen spezifische Marker auf angeborenen und adaptiven Immunzellen oberflächenmarkiert. Zusätzlich werden Monozyten, Makrophagen und dendritische Zellen mit einem intrazellulären Marker markiert. Anschließend werden die verschiedenen...

Eine in vitro Methode zur Identifizierung von angeborenen und adaptiven Immunzellen, die sich in der Lunge von Mäusen befinden

Dieses Protokoll beschreibt ein Isolationstechnik für primäre Lungen resident mesenchymalen Stromazellen von Ratten erhalten, durch die Verwendung von enzymatischen Verdauung, Dichtegradiententrennung, Kunststoff Haftung und CD146 + magnetisches Kügelchen Auswahl.

Isolierung von CD146<sup&gt; +</sup&gt; Resident Lung mesenchymalen Stromazellen aus Rattenlungen

Dieses Protokoll beschreibt die Verwendung der Durchflusszytometrie, um die Veränderungen der Immunzellzusammensetzung, des Zytokinprofils und des Chemokinprofils in der pulmonalen Umgebung nach einem vorübergehenden mittleren Hirnarterienverschluss, einem murinen Modell des ischämischen Schlaganfalls, zu identifizieren.

Charakterisierung von Immunzellen und proinflammatorischen Mediatoren im pulmonalen Milieu

Dieser Artikel bietet eine detaillierte Methodik für Gewebedissoziation und zelluläre Fraktionierungsansätze, die die Anreicherung lebensfähiger Epithelzellen aus proximalen und distalen Regionen der menschlichen Lunge ermöglichen. Hierin werden diese Ansätze für die funktionelle Analyse von Lungenepithel-Vorläuferzellen durch den Einsatz von 3D-Organoid-Kulturmodellen angewendet.

Isolierung und Anreicherung menschlicher Lungenepithel-Vorläuferzellen für Organoidkulturen

In diesem Artikel wurden primäre Lungenendothelzellen aus neonatalen Mäusen isoliert und kultiviert.

Isolierung von primären Lungenendothelzellen der Maus

Das im Folgenden beschriebene Protokoll ist eine einfache und effektive Methode zur Isolierung von Retinoid-haltigen Zellen aus hochgradig heterogenen Lungenzellpopulationen unter Verwendung spezifischer Retinoid-Autofluoreszenz und unter Anwendung einer fluoreszenzaktivierten Zellsortierung.

Isolierung von Lungen-Retinoid-haltigen Zellen durch Zellsortierung

Dieses Protokoll stellt eine auf Flusszytometrie basierende Methode vor, um lebensfähige alveoläre Typ-II-Epithelzellen (AECII) aus neonatalen, juvenilen oder adulten Mauslungen (infiziert oder nicht infiziert) zu isolieren. Dieser Ansatz ermöglicht nachgelagerte molekulare und/oder funktionelle Studien von AECII, um deren Rolle während der Lungenentzündung und -infektion zu identifizieren.

Isolierung von alveolären Typ-II-Epithelzellen aus neonatalen, juvenilen und adulten Mauslungen, anpassungsfähig für infektiöse experimentelle Umgebungen

Lernen Sie die Isolierung lebender myeloischer und epithelialer Zellpopulationen aus der Lunge der Maus. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung von Immunzell-Epithel-Interaktionen bei viralen Infektionen.

Isolierung von lebenden myeloischen und epithelialen Zellpopulationen aus der Lunge der Maus

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