Name: Dreidimensionales In-vitro-Differenzierungsprotokoll für kraniale Neuralleistenzellen für Multiplex-Assays (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-14T14:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 55 s
Description: Lernen Sie ein dreidimensionales In-vitro-Differenzierungsprotokoll für kraniale Neuralleistenzellen aus Maus-Embryonalstammzellen. Diese Methode reduziert die Variabilität der Neurosphärengröße und ermöglicht Multiplex-Assays.

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<ol><li>Rothstein, M., Bhattacharya, D., Simoes-Costa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+basis+of+neural+crest+axial+identity%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">The molecular basis of neural crest axial identity.</a> Dev Biol. 444, S170-S180 (2018).</li>
<li>Smeriglio, P., Zalc, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cranial+neural+crest+cells+contribution+to+craniofacial+bone+development+and+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Osteoporos+Rep%22%5BJournal%5D)">Cranial neural crest cells contribution to craniofacial bone development and regeneration.</a> Curr Osteoporos Rep. 21 (5), 624-630 (2023).</li>
<li>Zalc, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reactivation+of+the+pluripotency+program+precedes+formation+of+the+cranial+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Reactivation of the pluripotency program precedes formation of the cranial neural crest.</a> Science. 371 (6529), eabb4776(2021).</li>
<li>Perera, S. N., Kerosuo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+road+again%3A+Establishment+and+maintenance+of+stemness+in+the+neural+crest+from+embryo+to+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">On the road again: Establishment and maintenance of stemness in the neural crest from embryo to adulthood.</a> Stem Cells. 39 (1), 7-25 (2021).</li>
<li>Nguyen, B. H., Ishii, M., Maxson, R. E., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culturing+and+manipulation+of+O9-1+neural+crest+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Culturing and manipulation of O9-1 neural crest cells.</a> J Vis Exp. (140), e58346(2018).</li>
<li>Ishii, M., Arias, A. C., Liu, L., Chen, Y. B., Bronner, M. E., Maxson, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+stable+cranial+neural+crest+cell+line+from+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Dev%22%5BJournal%5D)">A stable cranial neural crest cell line from mouse.</a> Stem Cells Dev. 21 (17), 3069-3080 (2012).</li>
<li>Rada-Iglesias, A., Bajpai, R., Prescott, S., Brugmann, S. A., Swigut, T., Wysocka, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenomic+annotation+of+enhancers+predicts+transcriptional+regulators+of+human+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Epigenomic annotation of enhancers predicts transcriptional regulators of human neural crest.</a> Cell Stem Cell. 11 (5), 633-648 (2012).</li>
<li>Cederquist, G. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specification+of+positional+identity+in+forebrain+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Specification of positional identity in forebrain organoids.</a> Nat Biotechnol. 37 (4), 436-444 (2011).</li>
<li>Rada-Iglesias, A., Bajpai, R., Swigut, T., Brugmann, S. A., Flynn, R. A., Wysocka, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+unique+chromatin+signature+uncovers+early+developmental+enhancers+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A unique chromatin signature uncovers early developmental enhancers in humans.</a> Nature. 470 (7333), 279-283 (2011).</li>
<li>Prescott, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancer+divergence+and+cis-regulatory+evolution+in+the+human+and+chimp+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Enhancer divergence and cis-regulatory evolution in the human and chimp neural crest.</a> Cell. 163 (1), 68-83 (2015).</li>
<li>Chaddah, R., Arntfield, M., Runciman, S., Clarke, L., van der Kooy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clonal+neural+stem+cells+from+human+embryonic+stem+cell+colonies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Clonal neural stem cells from human embryonic stem cell colonies.</a> J Neurosci. 32 (23), 7771-7781 (2012).</li>
<li>Bajpai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CHD7+cooperates+with+PBAF+to+control+multipotent+neural+crest+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">CHD7 cooperates with PBAF to control multipotent neural crest formation.</a> Nature. 463 (7283), 958-962 (2010).</li>
<li>Sipahi, R., Zupanc, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stochastic+cellular+automata+model+of+neurosphere+growth%3A+Roles+of+proliferative+potential%2C+contact+inhibition%2C+cell+death%2C+and+phagocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Theor+Biol%22%5BJournal%5D)">Stochastic cellular automata model of neurosphere growth: Roles of proliferative potential, contact inhibition, cell death, and phagocytosis.</a> J Theor Biol. 445, 151-165 (2018).</li>
<li>Mori, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+neurosphere+size+on+the+growth+rate+of+human+neural+stem%2Fprogenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Effect of neurosphere size on the growth rate of human neural stem/progenitor cells.</a> J Neurosci Res. 84 (8), 1682-1691 (2006).</li>
<li>Kress, C., Vandormael-Pournin, S., Baldacci, P., Cohen-Tannoudji, M., Babinet, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonpermissiveness+for+mouse+embryonic+stem+%28ES%29+cell+derivation+circumvented+by+a+single+backcross+to+129%2FSv+strain%3A+establishment+of+ES+cell+lines+bearing+the+Omd+conditional+lethal+mutation%5BTitle%5D)+AND+%22Mamm+Genome%22%5BJournal%5D)">Nonpermissiveness for mouse embryonic stem (ES) cell derivation circumvented by a single backcross to 129/Sv strain: establishment of ES cell lines bearing the Omd conditional lethal mutation.</a> Mamm Genome. 9 (12), 998-1001 (1998).</li>
<li>Simões-Costa, M., Bronner, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+neural+crest+identity%3A+a+gene+regulatory+recipe%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Establishing neural crest identity: a gene regulatory recipe.</a> Development. 142 (2), 242-257 (2015).</li>
<li>Memberg, S. P., Hall, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dividing+neuron+precursors+express+neuron-specific+tubulin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Dividing neuron precursors express neuron-specific tubulin.</a> J Neurobiol. 27 (1), 26-43 (1995).</li>
<li>Kim, C. N., Shin, D., Wang, A., Nowakowski, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+molecular+dynamics+of+the+developing+human+thalamus%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal molecular dynamics of the developing human thalamus.</a> Science. 382, eadf9941(2023).</li>
<li>Grimaldi, A., Comai, G., Mella, S., Tajbakhsh, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+bipotent+progenitors+that+give+rise+to+myogenic+and+connective+tissues+in+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22ELife%22%5BJournal%5D)">Identification of bipotent progenitors that give rise to myogenic and connective tissues in mouse.</a> ELife. 11, e70235(2022).</li>
<li>To, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multiomic+atlas+of+human+early+skeletal+development%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A multiomic atlas of human early skeletal development.</a> Nature. 635 (8039), 657-667 (2024).</li>
<li>Bajpai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+stages+of+rapid+and+uniform+neuralization+of+human+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Differ%22%5BJournal%5D)">Molecular stages of rapid and uniform neuralization of human embryonic stem cells.</a> Cell Death Differ. 16 (6), 807-825 (2009).</li>
<li>Kerosuo, L., Nie, S., Bajpai, R., Bronner, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crestospheres%2C+Long-term+maintenance+of+multipotent%2C+premigratory+neural+crest+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Crestospheres, Long-term maintenance of multipotent, premigratory neural crest stem cells.</a> Stem Cell Reports. 5 (4), 499-507 (2015).</li>
<li>Abe, S., Yamaguchi, S., Sato, Y., Harada, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sphere-derived+multipotent+progenitor+cells+obtained+from+human+oral+mucosa+are+enriched+in+neural+crest+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Sphere-derived multipotent progenitor cells obtained from human oral mucosa are enriched in neural crest cells.</a> Stem Cells Transl Med. 5 (1), 117-128 (2016).</li>
<li>Jensen, J. B., Parmar, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strengths+and+limitations+of+the+neurosphere+culture+system%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Strengths and limitations of the neurosphere culture system.</a> Mol Neurobiol. 34 (3), 153-161 (2006).</li>
<li>Ziegler, L., Grigoryan, S., Yang, I. H., Thakor, N. V., Goldstein, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+generation+of+Schwann+cells+from+human+embryonic+stem+cell-derived+neurospheres%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Rev+Rep%22%5BJournal%5D)">Efficient generation of Schwann cells from human embryonic stem cell-derived neurospheres.</a> Stem Cell Rev Rep. 7 (2), 394-403 (2011).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0,22 μm m Spritzenvorsatzfilter</td><td>ClearLine</td><td>146560</td><td></td></tr><tr><td>15 mL Konisches Polypropylen-Röhrchen</td> mit hoher Klarheit <td>Falcon</td><td>352096</td><td></td></tr><tr><td>200 &micro; L ClearLine Plus Low Binding Filterspitzen</td><td>Dutscher</td><td>713263</td><td></td></tr><tr><td>40 & micro; m Filter</td><td>Falcon</td><td>352340</td><td></td></tr><tr><td>5 mL Serologische Pipette</td><td>Starstedt</td><td>86.1253.001</td><td></td></tr><tr><td>50 mL High-Clarity Polypropylen Konisches Röhrchen</td><td>Falcon</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Accutase</td><td>Merck-Sigma</td><td>A6964</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 Esel Anti Kaninchen IgG (H+L)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A21206</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594 Esel Anti Maus IgG (H+L)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A21203</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 Esel Anti Ziegen IgG (H+L)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>A31571</td><td></td></tr><tr><td>Antibiotisch-antimykotische Lösung&nbsp;</td><td>Merck-Sigma</td><td>A5955</td><td></td></tr><tr><td>B27 PLUS Nahrungsergänzungsmittel</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>Rinderserumalbumin (BSA)</td><td>Merck-Sigma</td><td>A9418</td><td></td></tr><tr><td>Chloroform</td><td>Carlo Erba</td><td>438601</td><td></td></tr><tr><td>Kollagenase Typ IV</td><td>Thermofisher Scientific, Gibco</td><td>17104019</td><td></td></tr><tr><td>Costar 6 Well, klare, TC-behandelte Mehrfach-Well-Platten</td><td>Corning</td><td>3516</td><td></td></tr><tr><td>Deckbrille, rund</td><td>VWR</td><td>&nbsp; 630-2113&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>DMEM KnockOut</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10829018</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12+Glutamax</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10565018</td><td></td></tr><tr><td>DMEM mit hohem Glukosegehalt</td><td>Merck-Sigma</td><td>D0822</td><td></td></tr><tr><td>DNA LoBind&nbsp; Röhrchen, 2 mL</td><td>Eppendorf</td><td>30108078</td><td></td></tr><tr><td>DNase/RNasefreies destilliertes Wasser</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10977-035</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco' s Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>14190144</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf Safe-Lock Röhrchen, 0,5 mL</td><td>Eppendorf</td><td>30121023</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf Safe-Lock Röhrchen, 2 mL</td><td>Eppendorf</td><td>30120094</td><td></td></tr><tr><td>ESGRO mLIF Medium Supplement</td><td>Merck-Sigma</td><td>ESG1107</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol 70%</td><td>Carlo Erba</td><td>528170</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Rinderserum</td><td>Merck-Sigma</td><td>F7524</td><td></td></tr><tr><td>Fibronektin</td><td>Merck-Sigma</td><td>F085-2MG</td><td></td></tr><tr><td>Fluoromount-G</td><td>Invitrogen</td><td>00-4958-02</td><td></td></tr><tr><td>Gelatinelösung</td><td>Merck-Sigma</td><td>ES-006-B</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMAX</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>Human EGF</td><td>Peprotech</td><td>AF-100-15-500UG</td><td></td></tr><tr><td>Humaner FGF-basischer</td><td>Antikörper Peprotech</td><td>100-18B</td><td></td></tr><tr><td>Humaner SOX9-Antikörper</td><td>R& Dsystems</td><td>AF3075</td><td></td></tr><tr><td>Insulin aus der Bauchspeicheldrüse des Rinders</td><td>Merck-Sigma</td><td>I6634</td><td></td></tr><tr><td>iScript cDNA-Synthesekit</td><td>Biorad</td><td>1708891</td><td></td></tr><tr><td>Maus Anti-Human-AP-2 alpha Monoklonaler Antikörper, unkonjugierter</td><td>DSHB</td><td>3B5</td><td></td></tr><tr><td>Maus Anti-Human-PAX7 Monoklonaler Antikörper, unkonjugierter</td><td>DSHB</td><td>PAX7</td><td></td></tr><tr><td>N2-Zusatz</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>Neurobasales Medium</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>21103049</td><td></td></tr><tr><td>mit Nicht-Gewebekulturen behandelte Platte, 96 Well,</td><td>Falcon</td><td>351172</td><td></td></tr><tr><td>mit flachem Boden behandelte Platte, 96 Well, U-Boden</td><td>Falcon</td><td>351177</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyd 16%ige Lösung, EM-Klasse</td><td>Elektronenmikroskopie Sciences</td><td>15710</td><td></td></tr><tr><td>Propan-2-ol</td><td>Carlo Erba</td><td>415154</td> gereinigter Anti-Tubulin &beta<td></td></tr><tr><td>; 3 (TUJ1) Antikörper</td><td>Biolegend</td><td>MMS-435P</td><td></td></tr><tr><td>RapiClear 1,47</td><td>Sunjin Lab</td><td>RC147001</td><td></td></tr><tr><td>RapiClear 1,52</td><td>Sunjin Lab</td><td>RC152001</td><td></td></tr><tr><td>Scotch doppelseitig 12,7 mm & 22,8 m</td><td></td><td></td><td>Klares faserloses doppelseitiges Klebeband</td></tr><tr><td>SensiFAST SYBR No-ROX Kit</td><td>Meridian Bioscience</td><td>BIO-98020</td><td></td></tr><tr><td>Sterile chirurgische Einwegskalpelle</td><td>Swann-Morton</td><td>05XX</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost Plus Adhäsionsmikroskop-Objektträger</td><td>Epredia</td><td>J1800AMNZ</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Thermofisher</td><td>Scientific A16046. </td><td></td>AP</tr><tr><td>TRIzol Reagenz</td><td>FisherScientific</td><td>15596026</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA (0,05%)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>25300054</td><td></td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Fisher Scientific</td><td>10113103</td><td></td></tr><tr><td>TWIST1 Kaninchen mAb (IF-formuliert)</td><td>Zellsignaltechnologie</td><td>E7E2G</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-Mercaptoethanol</td><td>Thermofisher Scientific</td><td></td><td></td>31350010</tr></tbody></table>

dreidimensionales in-vitro-differenzierungsprotokoll für kraniale neuralleistenzellen für multiplex-assays

Cranial Neural Crest Cells Three-Dimensional In Vitro Differentiation Protocol for Multiplexed Assay

Gemäß dem Protokoll wurden mES-Kolonien dissoziiert und 3000 Zellen in nicht-TC-behandelte U-Boden-96-Well-Platten ausgesät. An Tag 2 wurden aggregierte NS in nicht TC-behandelte 96-Well-Platten mit flachem Boden überführt, damit sie sich anlagern konnten. Eine vereinfachte Visualisierung des NS-Aggregationsprotokolls ist in Abbildung 1A dargestellt. NS wurden bis zum Tag 9 kultiviert und dann für die Immunfluoreszenzfärbung verarbeitet. Zellen, die vom NS auf die Platte migriert waren, wurd...

Dreidimensionales In-vitro-Differenzierungsprotokoll für kraniale Neuralleistenzellen für Multiplex-Assays

With their remarkable capacity to generate both ectodermal and mesenchymal derivatives, cranial neural crest cells (CNCC) have attracted a lot of interest ...

cranial-neural-crest-cells-three-dimensional-vitro-differentiation

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Um Neuralleiste Stammzellen (NCSC) in vitro zu kultivieren, ist ein spezielles Medium (NCSCM) erforderlich. Wesentlicher Bestandteil der NCSCM ist Hühnerembryo-Extrakt (CEE). Wir beschreiben hier genaue Techniken, um eine maximale Menge an reinem und hochwertigem CEE, einschließlich Details wie die Isolierung, Mazeration, Zentrifugation und Filtration zu produzieren.

Herstellung von Hühnerembryo-Extrakt für die Kultivierung von Murine Neural Crest Stem Cells

Isolierung von embryonalen Neuralleiste vom Neuralrohr erleichtert die Verwendung...

Isolierung und Kultivierung von Zellen der Neuralleiste aus embryonalen murinen Neuralrohr

Dieses Video veranschaulicht eine Technik zur Isolierung von kranialen Nervenfalten aus der Mittelhirnregion von Hühnerembryonen. Es wird ein detaillierter Präparierungsprozess der Neuralfalten, ihre Platzierung und Befestigung auf Fibronektin-beschichteten Deckgläsern vorgestellt, gefolgt von der Beobachtung der Migration von Neuralleistenzellen aus den Neuralfalten.

Isolierung von schädelförmigen Nervenfalten aus einem Kükenembryo für eine Zellkultur der Neuralleiste

Neuralleiste (NC)-Zellen aus humanen pluripotenten Stammzellen (hpSC) abgeleitet haben ein großes Potenzial für die Modellierung menschlichen Entwicklung und Krankheit und für die Zell-Ersatz-Therapien. Hier ein Feeder-freie Adaption des derzeit weit...

Feeder freie Ableitung von Neural Crest Vorläuferzellen aus menschlichen pluripotenten Stammzellen

Mit der Absicht, Veränderungen in miRNAs auf differenzierten humanen neuralen Stammzellen (hNSCs) zu charakterisieren, beschreiben wir die hNSC-Differenzierung auf einem dreidimensionalen System, die Bewertung von Veränderungen in der microRNA-Expression durch miRNA-PCR-Arrays und computergestützte Analysen zur Vorhersage von miRNA-Zielen und deren Validierung durch duale Luciferase-Assays.

Differenzierung einer Menschen Neural Stem Cell Line auf Dreidimensional Kulturen, Analyse der MicroRNA und mutmaßlichen Zielgene

Wir beschreiben eine Technik für die zur Erzeugung von zwei- oder dreidimensionalen Embryoidkörpern murinen embryonalen Stammzellen. Wir dann erklären, wie neuronale Differenzierung der Zellen Embryoidkörper von Retinsäure zu induzieren, und wie ihr Zustand der Differenzierung von Vorläuferzellmarker Immunofluoreszenz und Immunoblotting analysiert.

Analyse von Retinsäure-induzierte neuronale Differenzierung von embryonalen Stammzellen der Maus in zwei und drei-dimensionale Embryoidkörpern

Dieses Protokoll beschreibt die Zerlegung und Kultur von kranialen neuralen Kammzellen aus Mausmodellen, in erster Linie für die Untersuchung der Zellmigration. Wir beschreiben die verwendeten Live-Bildgebungstechniken und die Analyse von Geschwindigkeits- und Zellformänderungen.

Dissection, Culture and Analysis of Primary Cranial Neural Crest Cells from Mouse for the Study of Neural Crest Cell Delamination and Migration

Hier wird ein Protokoll zur Erzeugung einer einzelzelligen Kultur menschlicher embryonaler Stammzellen und deren anschließende Differenzierung in neuronale Vorläuferzellen vorgestellt. Das Protokoll ist einfach, robust, skalierbar und eignet sich für Arzneimittelscreenings und anwendungen in der regenerativen Medizin.

Effiziente neuronale Differenzierung mit einzelzellischer Kultur menschlicher embryonaler Stammzellen

In diesem Protokoll beschreiben wir eine stabile, hocheffiziente Differenzierungsstrategie für die Erzeugung postganglionischer sympathischer Neuronen aus menschlichen pluripotenten Stammzellen. Dieses Modell wird Neuronen für die Verwendung von Studien zu multiplen autonomen Störungen zur Verfügung stellen.

Effiziente Differenzierung postganglionischer Sympathika-Neuronen mit humanen pluripotenten Stammzellen unter feederfreien und chemisch definierten Kulturbedingungen

Hier haben wir eine kostengünstige und einfach zu bedienende Methode etabliert, die eine schnelle und effiziente Differenzierung von embryonalen Stammzellen in Neuronen leitet. Diese Methode eignet sich für die Popularisierung unter Laboratorien und kann ein nützliches Werkzeug für die neurologische Forschung sein.

Neuronale Differenzierung von Maus embryonalen Stammzellen In vitro

Dieses vielseitige Protokoll beschreibt die Isolierung von primären Neuralleistenzellen (NCCs) durch die Exzision von kranialen Neuralfalten aus Hühnerembryonen. Nach der Beschichtung und Inkubation entstehen wandernde NCCs aus neuronalen Faltenexplantaten, was eine Beurteilung der Zellmorphologie und -migration in einer vereinfachten 2D-Umgebung ermöglicht.

Präparation und morphologische Analyse von Küken-Schädel-Neuralleistenzellkulturen

Lernen Sie ein dreidimensionales In-vitro-Differenzierungsprotokoll für kraniale Neuralleistenzellen aus Maus-Embryonalstammzellen. Diese Methode reduziert die Variabilität der Neurosphärengröße und ermöglicht Multiplex-Assays.

Dreidimensionales In-vitro-Differenzierungsprotokoll für kraniale Neuralleistenzellen für Multiplex-Assays

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