Gehalt an Flavonoiden während des Wachstums und der Blütenentwicklung von Calendula officinalis L.

Unsere Studie verwendet eine zugängliche und zuverlässige kolorimetrische Methode zur Quantifizierung des Gesamtflavonoids, die die Datenanalyse in phytochemischen Laboratorien erleichtert und die Erforschung von Verbindungen mit therapeutischen Eigenschaften unterstützt.

Der Flavonoidgehalt in Calendula wird während der Blütenentwicklung untersucht, um den optimalen Erntezeitpunkt zu ermitteln und ihr medizinisches und kommerzielles Potenzial zu maximieren.

Unser Protokoll ist eine empfindliche und effiziente Mikrotechnik, die die Quantifizierung von Flavonoiden mit kleinen Probenmengen ermöglicht, den Lösungsmittelverbrauch optimiert und die Analyse mit Pflanzenmaterial begrenzt ist.

[Dozent] Zu Beginn trocknest Du das Pflanzenmaterial in einem Umluftofen bei 40 Grad Celsius für 48 Stunden. Nach dem Trocknen nehmen Sie es aus dem Ofen, füllen Sie das getrocknete Material in Papierumschläge und lagern Sie diese im Dunkeln bei Raumtemperatur. Frieren Sie das Pflanzenmaterial mit flüssigem Stickstoff ein, um es für das Mahlen vorzubereiten. Anschließend mahlen Sie das gefrorene Material in einem Porzellanmörser, bis es eine gleichmäßige Textur erreicht. Bereiten Sie die Proben vor, indem Sie 25 Milligramm des pulverisierten Materials aus jeder Probe wiegen. Geben Sie 500 Mikroliter 80%iges Methanol zum gewogenen Material. Um Flavonoide zu extrahieren, inkubieren Sie die Mischung eine Stunde lang bei 70 Grad Celsius. Nach der Inkubation die Mischung bei 731 g 13 Minuten lang zentrifugieren. Bereiten Sie nun Aliquote vor, indem Sie 150 Mikroliter des erhaltenen Extrakts nehmen und 37 Mikroliter 80% Methanol hinzufügen. Nehmen Sie 50 Mikroliter des Extrakts und fügen Sie 100 Mikroliter eines molaren Kaliumacetats und 100 Mikroliter 10% Aluminiumchlorid hinzu. Vervollständigen Sie die Lösung, indem Sie das Gesamtvolumen der Mischung mit destilliertem Wasser auf bis zu fünf Milliliter erhöhen. Stellen Sie die Absorptionswellenlänge eines Spektralphotometers auf 415 Nanometer ein und messen Sie die Extinktion der Lösung. Erstellen Sie die Kalibrierkurve, indem Sie Quercetinlösungen im Bereich von 50, 100, 175 und 350 Milligramm pro Milliliter vorbereiten. Um Kalibrierproben vorzubereiten, pipettieren Sie 500 Mikroliter der Quercetinlösung vom letzten Punkt der Kalibrierkurve und fügen Sie der Lösung 100 Mikroliter 10% Aluminiumchlorid und 100 Mikroliter ein molares Kaliumacetat hinzu. Fügen Sie dann 1,5 Milliliter 80% Methanol und 2,8 Milliliter destilliertes Wasser hinzu. Lassen Sie die Kalibrierlösungen 40 Minuten bei Raumtemperatur ruhen. Stellen Sie die Absorptionswellenlänge des Spektralphotometers auf 415 Nanometer ein und messen Sie die Extinktion der Kalibrierproben, um die Kalibrierkurve zu erstellen. Berechnen Sie abschließend die Flavonoidkonzentration und den Flavonoidgehalt pro Gramm Trockenmaterial. Diese Tabelle fasst zusammen, wie sich die Flavonoidkonzentration und die Flavonoidproduktion pro Pflanze von der ersten Knospenbildung bis zur vollen Blüte und Fruchtentwicklung in den Ringelblumenblütenköpfen unterscheiden. Zwischen den Stadien acht und 11 wurden höhere Konzentrationen an Gesamtflavonoiden beobachtet, die den Knospen mit getrennten Kelchblättern bis zu vollständig geöffneten Blütenköpfen entsprachen. In früheren Stadien, wie z. B. Knospen mit vereinigten Kelchblättern, und in späteren Stadien wie seneszenten Blütenköpfen, waren die Flavonoidkonzentrationen um 22 % bis 27 % niedriger als bei vollständig geöffneten Blütenköpfen. Diese Abbildung zeigt die Messung der Gesamtflavonoidkonzentration in der Trockenmasse von Ringelblumenblütenköpfen, ligulären Blüten und röhrenförmigen Blüten über die Blütenentwicklungsstadien hinweg. Die Ergebnisse deuten darauf hin, dass das Verständnis der Variation der Flavonoidkonzentration zwischen verschiedenen Blütenstrukturen und -stadien nützlich ist, um den optimalen Erntezeitpunkt zu bestimmen, um den Flavonoidgehalt in Ringelblumenblütenköpfen zu maximieren.