Name: Live-Zell-Imaging mit Zeitrafferfotografie zur Untersuchung der Proliferationskinetik der epidermalen Keratinozyten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-06T13:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 21 s
Description: Lernen Sie Live-Zell-Imaging mit Zeitrafferfotografie zur Analyse epidermaler Keratinozyten-Proliferation. Diese Methode ermöglicht die Verfolgung von Zelllinien über mehrere Generationen hinweg.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Mateu, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+differences+between+neonatal+and+adult+fibroblasts+and+keratinocytes%3A+Donor+age+affects+epithelial-mesenchymal+crosstalk+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Functional differences between neonatal and adult fibroblasts and keratinocytes: Donor age affects epithelial-mesenchymal crosstalk in vitro.</a> Int J Mol Med. 38 (4), 1063-1074 (2016).</li>
<li>Handl, J., Čapek, J., Majtnerová, P., Báčová, J., Roušar, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+repeated+passaging+on+the+susceptibility+of+human+proximal+tubular+HK-2+cells+to+toxic+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Res%22%5BJournal%5D)">The effect of repeated passaging on the susceptibility of human proximal tubular HK-2 cells to toxic compounds.</a> Physiol Res. 69 (4), 731-738 (2020).</li>
<li>Moran, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+human+keratinocyte+cell+lines+for+barrier+studies%5BTitle%5D)+AND+%22JID+Innov%22%5BJournal%5D)">Characterization of human keratinocyte cell lines for barrier studies.</a> JID Innov. 1 (2), 100018(2021).</li>
<li>Seo, M. -D., Kang, T. J., Lee, C. H., Lee, A. -Y., Noh, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HaCaT+keratinocytes+and+primary+epidermal+keratinocytes+have+different+transcriptional+profiles+of+cornified+envelope-associated+genes+to+T+helper+cell+cytokines%5BTitle%5D)+AND+%22Biomol+Ther%22%5BJournal%5D)">HaCaT keratinocytes and primary epidermal keratinocytes have different transcriptional profiles of cornified envelope-associated genes to T helper cell cytokines.</a> Biomol Ther. 20 (2), 171-176 (2012).</li>
<li>Jahn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+immortalized+keratinocyte+cell+lines+display+distinct+capabilities+to+differentiate+and+reconstitute+an+epidermis+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Different immortalized keratinocyte cell lines display distinct capabilities to differentiate and reconstitute an epidermis in vitro.</a> Exp Dermatol. 33 (1), e14985(2024).</li>
<li>Xiao, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+cell+cycle+duration+is+a+phenotype+of+human+epidermal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Short cell cycle duration is a phenotype of human epidermal stem cells.</a> Stem Cell Res Ther. 15 (1), 76(2024).</li>
<li>Hirose, T., Kotoku, J., Toki, F., Nishimura, E. K., Nanba, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+quality+control+and+identification+of+human+keratinocyte+stem+cells+by+deep+learning-based+automated+cell+tracking%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Label-free quality control and identification of human keratinocyte stem cells by deep learning-based automated cell tracking.</a> Stem Cells. 39 (8), 1091-1100 (2021).</li>
<li>Roshan, A., Murai, K., Fowler, J., Simons, B. D., Nikolaidou-Neokosmidou, V., Jones, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+keratinocytes+have+two+interconvertible+modes+of+proliferation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Human keratinocytes have two interconvertible modes of proliferation.</a> Nat Cell Biol. 18 (2), 145-156 (2016).</li>
<li>Abegaze, B., Ijeh, N., Vittimberga, B., Ghadially, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generating+primary+cultures+for+the+purpose+of+keratinocyte+live+cell+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Generating primary cultures for the purpose of keratinocyte live cell imaging.</a> J Vis Exp. , In Press (2024).</li>
<li>Piedrafita, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single-progenitor+model+as+the+unifying+paradigm+of+epidermal+and+esophageal+epithelial+maintenance+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">A single-progenitor model as the unifying paradigm of epidermal and esophageal epithelial maintenance in mice.</a> Nat Commun. 11 (1), 1429(2020).</li>
<li>Ścieżyńska, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+culture+of+human+primary+keratinocytes-a+methods+review%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Isolation and culture of human primary keratinocytes-a methods review.</a> Exp Dermatol. 28 (2), 107-112 (2019).</li>
<li>Mansoury, M., Hamed, M., Karmustaji, R., Al Hannan, F., Safrany, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+edge+effect%3A+A+global+problem.+The+trouble+with+culturing+cells+in+96-well+plates%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Rep%22%5BJournal%5D)">The edge effect: A global problem. The trouble with culturing cells in 96-well plates.</a> Biochem Biophys Rep. 26, 100987(2021).</li>
<li>Malin-Mayor, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+reconstruction+of+whole-embryo+cell+lineages+by+learning+from+sparse+annotations%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Automated reconstruction of whole-embryo cell lineages by learning from sparse annotations.</a> Nat Biotechnol. 41 (1), 44-49 (2023).</li>
<li>Waliman, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+cell+lineage+reconstruction+using+label-free+4D+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Automated cell lineage reconstruction using label-free 4D microscopy.</a> Genetics. 228 (2), iyae135(2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>96 Well Imagelock-Platte</td><td>Schneidermuskel</td><td>BA-04856</td><td>Empfohlene Mikroplatten, die mit einer Maschine kompatibel sind, wenn eine 96-Well-Platte verwendet wird.</td></tr><tr><td>24-Bohrlochplatte</td><td>Corning</td><td>3524</td><td>Empfohlene Mikroplatten, die mit der Maschine kompatibel ist, wenn man eine 24-Well-Platte verwendet.</td></tr><tr><td>Amphotericin B, 50 mL</td><td>Corning</td><td>30-003-CF</td><td>Verdünnen auf 5x (kommt im 100x-Original) für 5x PSA – 1x für Medienwechsel 1x</td></tr><tr><td>Epilife, 50 mL</td><td>Gibco</td><td>MEP1500CA</td><td>Füge S7 hinzu, betrachte Primosín</td></tr><tr><td>IncuCyte S3</td><td>Schneidermuskel</td><td>4637</td><td>Imager (Zoom/SX5 akzeptable Alternativen)</td></tr><tr><td>Penicillin/Streptomycin, 100 ml</td><td>Corning</td><td>30-002-Cl</td><td>Verdünnen auf 5x (kommt im 100x-Original)</td></tr><tr><td>Primocin</td><td>Invivogen</td><td>ANT-PM-05</td><td>1 mL pro 500 mL Medium</td></tr><tr><td>Ergänzung Staffel 7</td><td>Gibco</td><td>S0175</td><td>Epilife hinzugefügt</td></tr></tbody></table>

live-zell-imaging mit zeitrafferfotografie zur untersuchung der proliferationskinetik der epidermalen keratinozyten

Live Cell Imaging with Time Lapse Photography to Study Epidermal Keratinocyte Proliferation Kinetics

Live-Zell-Imaging mit Zeitrafferfotografie zur Untersuchung der Proliferationskinetik der epidermalen Keratinozyten

Live-cell imaging is an evolving and somewhat challenging method to study keratinocyte behavior in vitro. Historically, keratinocyte division behavior was ...

live-cell-imaging-with-time-lapse-photography-to-study-epidermal

Research

Forschung

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemie

Imaging embryonalem Gewebe in Echtzeit wird über längere Zeit eine Herausforderung. Hier präsentieren wir Ihnen einen Test zur Überwachung der zellulären und subzellulären Veränderungen im Rückenmark Küken für längere Zeit mit hoher räumlicher und zeitlicher Auflösung. Diese Technik kann für andere Regionen des Nervensystems und sich entwickelnden Embryo angepasst werden.

Hochauflösende Live-Bildgebung von Zell-Verhalten in der Entwicklung von Neuroepithel

Wir beschreiben ein Protokoll mit Kammer-Objektträgern und Medien zu pflanzen Keimblätter für die konfokale Bildgebung der Epidermis über mehrere Tage der Entwicklung immobilisieren, zu dokumentieren stomatal Differenzierung. Fluorophor-markierte Proteine ​​können dynamisch durch Expression und subzelluläre Lokalisation verfolgt werden, das Verständnis ihrer möglichen Rollen bei der Zellteilung und Zelltyp-Differenzierung.

Langfristige, High-Resolution Konfokale Zeitraffer Bildgebung<em&gt; Arabidopsis Cotyledon</em&gt; Epidermis während der Keimung

Zeitraffer-Bildgebung verwendet wird, um das Verhalten von primären präneoplastischen Brustepithelzellen aus gentechnisch veränderten Mausmodellen Brustkrebsrisiko abgeleitet, um zu bestimmen, ob es Korrelationen zwischen spezifischen Verhaltensparametern und unterschiedlichen genetischen Läsionen sind beurteilen.

Zeitraffer-Imaging of Primary Präkanzeröse Brustepithelzellen aus gentechnisch veränderten Mausmodellen der Breast Cancer Abgeleitet

Dieses Protokoll beschreibt die Verwendung von Multiphotonen - Mikroskopie ausgedehnte Zeitraffer-Bildgebung von mehrzelligen Interaktionen in Echtzeit durchzuführen, in vivo auf Einzelzellauflösung.

Erweiterte Zeitraffer-Intravital Imaging von Echtzeit-Vielzellige Dynamics im Tumormikromilieu

Hier präsentieren wir Ihnen die Echtzeit-Überwachung der Zellwanderung in einem Wundheilung Assay mit TIP60-abgereicherte MCF10A Brust Epithelzellen. Die Umsetzung des live-Zelle bildgebender Verfahren in unserem Protokoll erlaubt uns, Analyse und Visualisierung von einzelligen Bewegung in Echtzeit und über die Zeit.

Live-Darstellung der Brust Epithelzelle Migration nach der vorübergehenden Erschöpfung der TIP60

Morphologische Veränderungen treten in immunreagierenden Fibroblastenzellen nach aktivierung auf und fördern Veränderungen bei der Zellrekrutierung. Verwendung von 2-Photonen-Bildgebung in Verbindung mit einem gentechnisch veränderten Fibroblasten-spezifischen Protein 1 (FSP1)-cre; tdTomato floxed-stop-floxed (TB/TB) Mauslinie und grün fluoreszierend markiert Lipopolysaccharid-FITC, können wir hochspezifische Aufnahme von Lipopolysaccharid in dermalen Fibroblasten und morphologischen...

In Vivo Zwei-Farben 2-Photon Enzgebung von genetisch markierten Reporterzellen in der Haut

Hier stellen wir ein Protokoll zur Beurteilung der Dynamik der Spindelbildung und der mitotischen Progression vor. Unsere Anwendung der Zeitraffer-Bildgebung ermöglicht es dem Anwender, Zellen in verschiedenen Stadien der Mitose zu identifizieren, mitotische Defekte zu verfolgen und zu identifizieren und die Spindeldynamik und das mitotische Zellschicksal bei Exposition gegenüber Anti-Mitotik-Medikamenten zu analysieren.

Live Cell Imaging zur Bewertung der Dynamik von Metaphasen-Timing und Zellschicksal nach mitotischen Spindelstörungen

Hier beschreiben wir ein Protokoll zur systematischen Kultivierung epidermaler Sphäroide in 3D-Suspensionskultur. Dieses Protokoll hat weitreichende Anwendungen für den Einsatz in einer Vielzahl von epithelialen Gewebetypen und für die Modellierung mehrerer menschlicher Krankheiten und Zustände.

Etablierung eines epidermalen Sphäroidkultursystems mit hohem Durchsatz zur Modellierung der Plastizität von Keratinozyten-Stammzellen

Das Protokoll stellt ein neues Werkzeug zur Vereinfachung der intravitalen Bildgebung mittels invertierter konfokaler Mikroskopie dar.

Optimierter intravitaler Bildgebungsansatz für die Langzeitüberwachung der Dynamik des Epithelgewebes auf einem inversen konfokalen Mikroskop

Die Kombination aus iterativem Bleaching-Extends-Multiplexity (IBEX) und einem kommerziellen Nukleotidmarkierungsassay (Click-iT EdU) ermöglicht den Nachweis und die Kategorisierung von sich teilenden Zelltypen in hochdynamischen Prozessen in fixierten gefrorenen murinen Gewebeschnitten. Darüber hinaus ermöglicht eine neuartige Open-Source-Bildverarbeitungspipeline eine Bilderfassung und -analyse mit hohem Durchsatz.

Hochdurchsatz-Bildgebungs- und Analyse-Workflow zur Bewertung von Hautzell-Phänotypen und Proliferationszuständen in Gewebeproben

Dieses Protokoll beschreibt die Kultivierung von frisch gewonnenen (Passage 0) Keratinozyten für die Verwendung in der Lebendzellbildgebung.

Generierung von Primärkulturen für die Bildgebung lebender Keratinozyten

Lernen Sie Live-Zell-Imaging mit Zeitrafferfotografie zur Analyse epidermaler Keratinozyten-Proliferation. Diese Methode ermöglicht die Verfolgung von Zelllinien über mehrere Generationen hinweg.

Live-Zell-Imaging mit Zeitrafferfotografie zur Untersuchung der Proliferationskinetik der epidermalen Keratinozyten

Weitere Videos entdecken