Lebendzell-Förster-Resonanz-Energietransfer-Bildgebung der metabolisch regulierten Akt-Aktivierungsdynamik in HepG2-Zellen

Die zelluläre Heterogenität ist ein Hindernis für die genaue Beschreibung der Feinheiten der zellulären Dynamik, die im Wesentlichen herausgemittelt werden. Deshalb sind wir hier, um einzelne Zellen abzubilden. Jüngste Entwicklungen bei genetisch kodierten FRET-Biosensoren haben die Spezifität verbessert und die Echtzeit-Verfolgung von Akt innerhalb von Zellen revolutioniert, was für das Verständnis der Heterogenetik und die Entwicklung personalisierter Arzneimitteltherapien von entscheidender Bedeutung ist.

Krebs und Diabetes durchlaufen komplexe Stoffwechselwege. Um die Biokomplexität des Insulin-Signalwegs bei Krebs zu entschlüsseln, verwenden wir modernste Lebendzell-FRET-Bildgebung mit Einzelzellauflösung. Wir haben festgestellt, dass die Optimierung der konfokalen Mikroskop-, Hardware- und Softwarekonfiguration sowie die Feinabstimmung der Laserleistung und die Anpassung der Detektorverstärkung entscheidend sind, um Rauschen und spektrales Übersprechen in FRET-Signalen zu minimieren.